19. Исследование лекарственного средства, стерилизуемого в процессе производства. Произвести учет посева для определения антимикробного действия лекарственного средства и указать дальнейшие действия.

Отбор образцов для анализа. Число образцов из каждой серии от 3-40, в зависимости от метода стерилизации, для автоклавированных ср-в-10. Для исслед лс д б приготовлены в виде р-ров, суспензий или эмульсий. Опред антимикробного д-вия лс. Во избежание неправильной оценки результатов анализа необходимо определить однократно для каждого наименования лекарственного средства обладает ли оно антимикробным действием.

Для опред антимикробного действия из ампулы с лс следует внести по 1мл в 3 пробирки с 10 мл тиогликолевой среды и в 1 пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро. Для контроля в 3 пробирки с тиогликолевой средой и в пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро вносятся по 1 мл стерильной дистиллированной воды.

Затем во все пробирки следует внести по 0,1 мл взвеси тест-штамма, содержащего 1000 клеток в 1 мл. В пробирки с тиогликолевой средой вносятся штаммы Staphylococcus aureus; Bacillus subtilis; Escherichia coli; в пробирки с соево-казеиновой средой или средой Сабуро — Candida albicans. Посевы в тиогликолевой среде инкубируют при 30-35`С в течение 2 суток, а на соево-казеиновой среде, или среде Сабуро, при 20-25`С в течение 3 суток.

При отсутствии антимикробного д-вия лс в опытных и контрольных пробирках должен наблюдаться рост перечисленных тест-микробов. В этом случае можно продолжать исследование и провести прямой посев данного лекарственного средства на стерильность.

При наличии антимикробного действия устраняют его. Для этого испол:

-соответств анактиваторы, указанные в частных фармакопейных статьях (например, пенициллиназа-для пенициллинов и цефалоспоринов)

-при отсутствии соответств инактиватора препарат при посеве разводят, увеличивая объём пит среды до 250 мл.

-если при этом сохр антимикробное действие лс, для посева используют метод мембранной фильтрации.

20. Произвести учет посева лс, стерилизуемого в процессе производства. Сделать вывод.

Исслед лс, стерилизуемых в процессе производства. Л с для инъекций, глаз капли, мази, плёнки, др л с, в отношении кот имеются соответств указания в нормативно - технической документации (НТД), д б стерильными. Отбор образцов для анализа - число образцов из каждой серии от 3 до 40, в зависимости от метода стерилизации, для автоклавированных ср-в - 10. Для исслед л с д б приготовлены в виде растворов, суспензий или эмульсий.

Опред антимикробного д-вия лс. Во избежание неправильной оценки результатов анализа необход опред однократно для каждого наименования лс, обладает ли оно антимикробным действием.

Для опред антимикробного д-вия из ампулы с лс следует внести по 1 мл в 3 пробирки с 10 мл тиогликолевой среды и в 1 пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро. Для контроля в 3 пробирки с тиогликолевой средой и в пробирку с 10 мл жидкой соево-казеиновой среды или среды Сабуро вносится по 1 мл стерильной дистиллированной воды.

Затем во все пробирки следует внести по 0.1 мл микробной взвеси тест - штамма, содержащего 1000 клеток в 1 мл. В пробирки с тиогликолевой средой вносятся штаммы Staphylococcus aureus; Bacillus subtilis; Escherichia coli; в пробирки с соево-казеиновой средой или средой Сабуро - Candida albicans

Опред антимикробного д-вия лс Посевы в тиогликолевой среде инкубируют при 30-35°С в течение 2 суток, а на соево-казеиновой среде или среде Сабуро - при 20-25°С в течение 3 суток.

При отсутст антимикробного д-вия л с в опытных и контрольных пробирках должен наблюдаться рост перечисленных тест - микробов.

В этом случае можно продолжать исслед и провести прямой посев данного л с на стерильность.

При наличии антимикробного действия устраняют его. Для этого используют:

1. Соответств инактиваторы, указанные в частных фармакопейных статьях (н, пара-аминобензойная кислота для сульфаниламидов, пенициллиназа - для пенициллинов и цефалоспоринов).

2. При отсут соответст инактиватора препарат при посеве разводят, увелич объём пит ср до 250 мл.

3. Если при этом сохр антимикробное д-вие лс, для посева испол метод мембранной фильтрации.

Посев л с на стерильность (метод прямого посева). Испытуемый препарат, если необходимо, растворяют в соответствующем растворителе и высевают в количествах, указанных в таблице.

Кол-во испытуемого препарата для посева в зависимости от объёма содержимого единицу (ампул, флаконов), составляющих серию. * - Если объём содержимого единицы превышает 100 мл, предпочтительнее использовать метод мембранной фильтрации.

Посевы с тиогликолевой средой инкубируют при т от 30 до 35°С, а в соево-казеиновой среде или среде Сабуро - от 20 до 25°0С. Продолжит инкубации посевов в обеих пит средах составляет 14 суток. Если во всех посевах роста нет, лекарственный препарат стерилен.

Метод мембранной фильтрации. При опред стерильности лс, обладающих антимикробным действием, и л с, разлитых в ёмкости больше 100 мл, испол метод мембранной фильтрации. Л с фильтруют в асептических условиях через 2 мембранных фильтра, затем смывают 3-4 порциями по 100 мл физ. Р-ра. Каждую мембрану стерильными ножницами разрезают пополам, половину помещают в тиогликолевую среду, половину - в жид соево-казеиновую среду или среду Сабуро.

Посевы выдерживают в термостате при тех же т в теч 7 сут при ежедневном просмотре. Для контроля полноты смывания др мембрану разрезают пополам, и по половине мембраны помещают в пит среды, куда засевают тест - микробы: Staphylococcus aureus и Candida albicans. Наличие роста этих микробов после инкубации в термостате указывает на полноту смывания. Для контроля стерильности условий фильтрования производят фильтрование растворителя, и фильтры засевают в те же пит среды.

Испытание на пирогенность проводится путём введения воды или лс кроликам с измерением ректальной т. При этом строго соблюдаются условия, искл возможность повышения т тела кроликов от случайных причин.

Вода для инъекций или р-р лекарственного средства считается пирогенным, если повышение температуры тела кроликов превышает предельные показатели, указанные в фармакопее.