Задача 2.

Необходимо провести развернутое бактериологическое исследование на определение бактерий семейства Enterobacteriaceae (дизентерийную и кишечно-тифозную группы), энтеротоксигенных стафилококков и т.д., с использованием сред Эндо, Левина, Плоскирева, сред обогащения – селенитовой и др., ЖСА. Если выделенные штаммы принадлежат к одному виду, можно дополнительно провести фаготипирование, определить факторы вирулентности, антибиотикочувствительность. При совпадении фенотипов по всем признакам, делается заключение о единстве штаммов, которое можно подтвердить молекулярно-генетическими исследованиями (генотипированием).

Возможный механизм – фекально-оральный, путь – алиментарный, но возможен и контактно-бытовой, источником инфекции может быть как больной, поступивший в стационар, так и медицинский персонал, работник столовой и др.

КЛИНИЧЕСКАЯ МИКРОБИОЛОГИЯ

1.В бактериологическую лабораторию поступили три образца фекалий от больных с предварительным диагнозом «Дисбактериоз кишечника». Какое лабораторное исследование нужно провести для постановки окончательного диагноза? Перечислите основные среды для посева и разведения материала. Какой основной показатель используется для определения степени дисбактериоза?

Задача 1.

Необходимо провести бактериологическое исследование на дисбактериоз методом серийных разведений. Его этапы:

1) Из пробирки с материалом приготовить серию разведений до 10-9

2) Из разведений 107 и 109 посеять глубоким уколом в полужидкую среду Блаурока или Бактофок (для определения бифидобактерий)

3) Из разных разведений (105, 107) сделать посевы на чашки Петри:

- на среду Эндо (для выделения бактерий кишечной группы)

- на 5% кровяной агар (для изоляции многих видов микроорганизмов и определения гемолитической активности)

- на ЖСА – желточно-солевой агар (для выделения стафилококков и учета лецитиназной активности)

4) Провести количественный и качественный учет результатов посевов

5) Окончательно идентифицировать выделенные бактерии (энтеротест, стафитест и др.) и подсчитать количество бактерий каждого вида в 1 г фекалий.

6) Составит протокол исследования, сравнить с нормами по каждому виду и определить степень дисбиотических нарушений.

Основной показатель степени дисбактериоза: количество бифидобактерий.

2. В бактериологическую лабораторию поступил образец мочи от пациента с предварительным диагнозом «Инфекция мочевых путей». Перечислите этапы лабораторного исследования для подтверждения возможного диагноза. Назначение методики секторальных посевов по Гольду? На основании каких критериев подтверждается этиологическая значимость выделенного микроорганизма?

Задача 2.

Нужно провести бактериологическое исследование мочи. Его этапы:

1) Центрифугирование мочи;

2) Посев по Гольду: из осадка бактериологической петлей провести посев (30-40 штрихов) на 1-й сектор чашек Петри с питательными средами (Эндо и 5% кровяным агаром). После этого петлю прожечь и провести 4 штриховых посева из 1-го сектора во второй, аналогичным способом из 2-го в 3-й и из 3-го в 4-й, прожигая петлю после пересева с каждого сектора;

3) Чашки инкубировать в термостате при 37ºС в течение 18-24 часов;

4) Подсчитать число колоний, выросших в разных секторах. Количество бактерий в 1 мл материала определить по специальной расчетной таблице (Ю.М. Фельдман и др. Количественное определение бактерий в клиническом материале // Лаб. Дело, 1984);

5) идентифицировать выделенный микроорганизм бактериологическим методом и определить чувствительность к антибиотикам.

Посев по Гольду дает возможность определить количество клеток в 1 мл материала. Этиологическая значимость выделенного микроорганизма подтверждается на основании количественного критерия – показателя микробной обсемененности (КОЕ≥10⁵). Если моча взята стерильно катетером, обнаружение и более низких концентраций микроорганизма может свидетельствовать о бактериурии.