IV. Клиника и эпидемиология (признаки заболевания, формы)

     Источником герпетической инфекции являются люди, инфицированные ВПГ как при манифестной, так и при латентной инфекции (вирусоносители). При манифестной форме вирус обнаруживается в крови и моче (в период вирусемии), в различных биологических жидкостях в зависимости от локализации поражения: содержимом везикул, отделяемом эрозий и язв, носоглоточной слизи, конъюнктивальном секрете, слезе, менструальной крови, околоплодных водах, вагинальном и цервикальном секретах, сперме. При латентной форме ВПГ также может присутствовать в биологических материалах, но в меньшем количестве.

     Пути передачи вирусов герпеса:

     - воздушно-капельный;

     - контактно-бытовой;

     - половой;

     - парентеральный;

     - трансплацентарный

     Вирус передается через зараженные предметы: посуду, полотенце, игрушки, постельное белье и др. Возможна передача инфекции при поцелуях. При генитальном герпесе ВПГ передается половым путем, и большинство людей инфицируются с началом половой жизни. Группами риска по заражению являются лица с множественными и случайными половыми контактами.

     Пути передачи двух типов ВПГ от человека к человеку различны, хотя во многом провести четкие границы не представляется возможным. Ранее считалось, что ВПГ-1 поражает только верхнюю половину тела, а ВПГ-2 — нижнюю, однако в настоящее время выяснилось, что четкой закономерности нет. Заражение людей ВПГ-1 начинается в детстве при прямом контакте с инфицированными людьми и достигает 70-90% инфицированности у взрослых людей. Для ВПГ-2 инфицированность повышается, начиная с подросткового возраста, и доходит до 15% у взрослых, а в отдельных группах населения достигает 50%. Перенесенная в детстве инфекция, обусловленная ВПГ-1, не предотвращает заражения ВПГ-2, но тяжесть течения заметно снижается, чаще заболевание переходит в латентную и бессимптомную форму.

     В период вирусемии возможен парентеральный путь передачи инфекции. Этим путем нередко инфицируются наркоманы. Определенное эпидемиологическое значение имеют и медицинские манипуляции, проводимые с использованием контаминированного инструментария при нарушении правил дезинфекции и стерилизации.

     Вертикальный механизм передачи (от матери плоду) ВПГ реализуется различными путями. При генитальном герпесе у женщин инфицирование чаще происходит интранатально во время прохождения плода по родовым путям, также вирус может проникнуть в полость матки восходящим путем через цервикальный канал с поражением последа и плода. При любой острой форме герпетической инфекции (даже лабиальной) или обострении хронической у беременной, если имеется вирусемия, возможно инфицирование плода трансплацентарно. Число случаев инфекции ВПГ у новорожденных составляет от 1 на 3000 до 1 на 20000 рожденных живыми.

V. Микробиологическая диагностика

ВПГ-1 и ВПГ-2

     Материалом для исследования служат содержимое везикул, соскобы со слизистой оболочки полости рта, зева, конъюктивы, влагалища, шейки матки, уретры, спинномозговая жидкость (в зависимости от локализации процесса), кровь.

     Применяют: экспресс-метод, вирусологический и серологический методы. 

     Экспресс-метод. Световая микроскопия заключается в приготовлении мазков из свежих герпетических высыпаний, окрашивании их по Романовскому-Гимзе и выявлении многоядерных клеток, содержащих ацидофильные внутриядерные включения (тельца Липшютца). Люминесцентная микроскопия проводится с использованием иммунных противогерпетических сывороток. 

     Вирусологический метод включает индикацию герпесвирусов:

– в культурах клеток (по ЦПД – образование гигантских многоядерных клеток, внутриядерных телец-включений, лизис клеток);

– в куриных эмбрионах (по образованию бляшек на хорионаллантоисной оболочке);

– на лабораторных животных (гибель мыши после введения исследуемого материала в мозг). 

     Идентификацию осуществляют в реакции нейтрализации на животных, куриных эмбрионах или клеточных культурах с использованием стандартных противогерпетических иммунных сывороток.

     Серологический метод. Определяют антитела и нарастание титров антител к герпес-вирусам в РН ЦПД, РСК и ИФА. Наличие в исследуемой сыворотке специфических Ig М свидетельствует об острой первичной инфекции, наличие Ig G – об обострении хронической инфекции. 

ВГЧ-3 (Varicella zoster)

     Материалом для исследования являются содержимое везикул, кровь, спинномозговая жидкость.

     Используют экспресс-метод, молекулярно-генетический, вирусологический и серологический методы.

     Экспресс-метод. При световой микроскопии в ядрах пораженных клеток выявляются элементарные тельца Арагао. Используются также электронная и люминесцентная микроскопии.

     Молекулярно-генетический метод. У больных опоясывающим лишаем применяется ПЦР.

     Вирусологический метод. Индикацию осуществляют на клеточных культурах с последующей идентификацией вирусов в РН ЦПД и РСК. 

     Культивируется данный вирус в клеточных культурах легких, почек и фибробластов эмбриона человека с образованием внутриядерных включений и агрегацией хроматина в «псевдоядрышки», остановкой деления клеток в метафазе, сморщиванием и разрывом хромосом. ВГЧ-3 не репродуцируется в организме лабораторных животных и на хорионаллантоисной оболочке куриного эмбриона.

     Серологический метод. Исследуются парные сыворотки крови обследуемого в РН ЦПД, РСК и ИФА для выявления антител к ВГЧ-3 и нарастания их титра (при острой инфекции определяются Ig М, при хронической – Ig G). 

ВГЧ-5 (Цитомегаловирус)

     Материалом для исследования являются слюна, моча, кровь, соскобы со слизистых оболочек и пр.

     Используют экспресс-метод, молекулярно-генетический, вирусологический и серологический.

     Экспресс-метод. Применяются электронная, люминесцентная, световая микроскопия.

     Молекулярно-генетический. Применяется ПЦР. 

     Вирусологический метод. Используют первичные культуры фибробластов кожи и легкого эмбриона человека, миоцитов, диплоидные клетки W1-38. ЦПД проявляется через несколько недель и выражается образованием гигантских округлых клеток, содержащих 1-2 базофильных внутриядерных телец-включений, примыкающих к ядерной мембране. Пространство между включением и ядерной мембраной остается просветленным, что придает инфицированной клетке вид «совиного глаза». Возможно образование эозинофильных внутрицитоплазматических телец-включений, а также инфицирование тканей без морфологических изменений. В культуральную среду ЦМВ выделяется в незначительных количествах. Идентифицируют вирус в РН ЦПД со специфической диагностической сывороткой.

     Серологический метод. Для выявления антител в сыворотке крови обследуемого и нарастания их титра применяются РСК, РПГА, РН ЦПД, ИФА.

ВГЧ-6, ВГЧ-7

     Материалом для исследования являются кровь и слюна.

     Используют экспресс-метод, молекулярно-генетический метод, вирусологический и серологический.

     Экспресс-метод. Применяются электронная, люминесцентная, световая микроскопия.

     Молекулярно-генетический. Применяется ПЦР. 

     Вирусологический метод. Для индикации вирусов исследуемый материал вводят в культуру клеток активированных первичных Т-лимфоцитов. Для идентификации используют РН ЦПД.

     Серологический метод. Для выявления антител в сыворотке крови обследуемого и нарастания их титра применяются ИФА и иммуноблоттинг.

ВГЧ-4 (Вирус Эпштейн-Барр)

    Используют экспресс-метод, молекулярно-генетический, вирусологический и серологический.

    Экспресс-метод. Применяются электронная, люминесцентная, световая микроскопия.

    Молекулярно-генетический. Применяется ПЦР. 

    Вирусологический метод. Культивируют эти вирусы только в культуре В-лимфоцитов человека и приматов. Инфицирование лимфоцитов приводит к их трансформации в лимфобластоидные клетки, способные продолжительно расти в культурах. Идентифицируют в РН ЦПД.

     Серологический метод. Для выявления антител в сыворотке крови обследуемого и нарастания их титра применяется ИФА.

ВГЧ-8 (ассоциирован с саркомой Капоши)

     Используют молекулярно-генетический, вирусологический и серологический (ИФА) методы диагностики.

     Молекулярно-генетический метод – используется ПЦР.

     Вирусологический метод. При его проведении для культивирования ВГЧ-8 используют культуру В-лимфоцитов, моноцитов, эндотелиоцитов человека.

    Серологический метод – используется ИФА.