Определение группы и резус-принадлежности крови с цоликлонами. Техника. Интерпретация результатов
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СТАНДАРТНЫХ СЫВОРОТОК.
Стандартные сыворотки готовятся на станции переливания крови и поступают в лабораторию в запаянных ампулах помеченных этикеткой, на которой обозначена группа и дата изготовления.
П
РОВЕДЕНИЕ
ИССЛЕДОВАНИЯ:
с целью определения группы крови
эритроциты исследуемой крови смешивают
со стандартными сыворотками, содержащими
агглютинины ά
и β
(III и II группа).
Нанесите на тарелку по крупной капле
сывороток III и II группы, с целью
обязательного контроля – I и IV группы.
Наденьте перчатки. Получите кровь из
пальца путем скарификации. Затем
небольшое количество крови поместите
рядом с каплей сыворотки и осторожно
перемешайте. В течение 5 минут, слегка
покачивая тарелку, наблюдайте за каплями.
Агглютинация выглядит в виде мелких
красных крупинок, постепенно увеличивающихся
в размере на фоне светлеющей плазмы. На
основании наличия или отсутствия
агглютинации сделайте вывод о группе
крови.
ОЦЕНКА РЕЗУЛЬТАТОВ.
Отсутствие агглютинации в обеих пробах служит доказательством принадлежности исследуемой крови к I (0) группе крови. Если агглютинация произошла с сыворотками I (0) и III (В), то кровь принадлежит ко II (А) группе. Если агглютинация произошла с сывороткой II (А) и I (0) – то кровь III (В) группы. В случае агглютинации в сыворотках всех трех групп кровь следует отнести к IV (АВ) группе. С сывороткой IV группы агглютинации не происходит никогда, так как в ней нет никаких агглютининов. Смотри схему!
ОПРЕДЕЛЕНИЕ ГРУППЫ КРОВИ С ПОМОЩЬЮ СИНТЕТИЧЕСКИХ ЦОЛИКЛОНОВ.
Цоликлоны - это растворы, содержащие аналоги агглютининов ά и β. При этом методе агглютинация происходит между одноименными агглютиногенами исследуемой крови и агглютининами цоликлонов. Эритротесты цоликлон анти-А (розовый цвет) и анти-В (синий цвет) предназначены для определения групп крови человека взамен стандартных изогемагглютинирующих сывороток. Для каждого определения группы крови достаточно применять по одной серии реагентов анти-А и анти-В.
Проведение исследования: нанесите на тарелку по одной капле реагента анти-А и анти-В и рядом по одной капле крови. Реактив и каплю крови перемешайте и в течение 2,5-5 минут при легком покачивании наблюдайте за появлением агглютинации. Результат реакции может быть положительным – появление агглютинации, и отрицательным – отсутствие агглютинации. Оценка результата осуществляется по таблице 1 и схеме.
ОПРЕДЕЛЕНИЕ РЕЗУС-ФАКТОРА.
Кроме агглютиногенов, определяющих четыре группы крови, эритроциты могут содержать в разных комбинациях и многие другие агглютиногены. Среди них особенно большое значение имеет резус- фактор. Rh-агглютиноген не имеет в плазме «врожденных» агглютининов.
Они могут вырабатываться иммунной системой резус-отрицательного реципиента
при переливании ему резус-положительной крови или организмом резус-отрицательной матери, беременной резус-положительным плодом, если плацента имеет дефекты, и вследствие нарушения ее барьерных функций кровь плода и матери смешиваются. В первом случае повторное переливание резус-несовместимой крови может привести к аутоиммунному гемолизу. Во втором
случае, если целостность плаценты нарушена, иммунная система матери вырабатывает резус-антитела к эритроцитам плода, что может привести к частичному, а при высоком титре антител к полному, гемолизу крови плода и его внутриутробной смерти. Определение резус-фактора в настоящее время проводится двумя способами:
1. Экспресс-метод: на тарелку наносятся 1 капля контрольной сыворотки и 1 капля стандартной антирезус сыворотки. Рядом с каждой сывороткой наносят по одной капле исследуемой крови. Размешивается стеклянной палочкой и в течение 1-2 минут наблюдается реакция. Если исследуемая кровь резус-положительная, то в пробе со стандартной антирезус сывороткой наблюдается агглютинация эритроцитов (в контроле ее быть не должно). Если кровь резус отрицательная, агглютинация отсутствует в обеих пробах. При возникновении агглютинации в пробе с контрольной сывороткой определение следует повторить либо проводить другими методами.
2. Метод стандартных цоликлонов: 1 каплю реагента «цоликлон анти-D-супер»
наносится на тарелку. Рядом 1 капля исследуемой крови. При наличии агглютинации
кровь считается резус-положительной, а при отсутствии агглютинации –
резус-отрицательной.
