58. Принципы современных методов подсчета форменных элементов крови и определения содержания гемоглобина в современных гематологических анализаторах.

[5] Исследование крови — один из важнейших методов оценки состояния функции кроветворения и диагностики многих заболеваний.

Обычный общий клинический анализ крови предоставляет в распоряже­ние врача одновременно следующие показатели: концентрацию гемоглобина количество эритроцитов, цветовой показатель, количество лейкоцитов с подсчетом лейкоцитарной формулы, скорость оседания эритроцитов. В современных гемоанализаторах для подсчета клеток крови использует­ся принцип проточной цитометрии с кондуктометрическим и/или оптическим методами регистрации сигналов прохождения суспензии форменных элементов через суженный участок капилляра со скоростью до 30 м/с.

1. Кондуктометрический метод регистрации, основан на измерении разницы электропроводности клеток крови и используемого для разбавления жидкости (электролита). Причем этот метод позволяет не только подсчитать количество клеток, но и охарактеризовать объем каждой проходя­щей через апертурное отверстие клетки, поскольку амплитуда сигнала пропор­циональна объему замещенного электролита. Определение объемов позволяет дифференцировать эритроциты и тромбоциты, а после лизиса клеток проводить подсчет лейкоцитов по их ядрам, а также дифференцировать лейкоциты по раз­мерам ядер на малые и большие. Измерение объемов клеток позволяет рассчи­тать их средний объем и степень анизоцитоза, а также построить гистограммы распределения основных клеточных популяций по их объему. Кроме того, в ре­зультате суммирования прямо измеренных объемов эритроцитов в единице объема крови можно получить показатель гематокрита.

2. Оптического метод. Анализ колебаний интенсивности проходящего через раствор крови светового потока в результате его частичного поглощения и рассеивания клетками крови, а также их флюоресценции после предварительного добавления к ним специальных красителей. В качестве ис­точников света и для возбуждения флюоресценции используют газовые лазеры или дуговые ртутные лампы. Сигналы регистрируют по 5 параметрам: прямое светорассеяние (под углом 0,5-2°) для оценки размеров клетки; угловое свето­рассеяние (под углом 15-150°) для изучения гранулярности цитоплазмы; ос­лабление осевого света (светопоглощение) для анализа размеров и плотности клеток; флюоресценция (в том числе поляризация (поляризация света лазера) флюоресценции и анализ флюоресцентных сигналов волновой формы) для изу­чения специфических клеточных компонентов, структур, ферментов и т. д. Оп­тический метод дает возможность производить дифференциальный подсчет всех основных типов лейкоцитов: эозинофилов, базофилов, нейтрофилов, мо­ноцитов и лимфоцитов. Для определения содержания гемоглобина в большинстве гематологических анализаторов используется гемоглобинцианидный метод. Знание показателей гематокрита, гемоглобина и эритроцитов позволим рассчитать эритроцитарные индексы: средний объем эритроцитов, среднее содержание гемоглобина в эритроците и среднюю концентрацию гемоглобина в эритроците.

59. Значения некоторых морфологических показателей крови в норме и единицы их измерения: гематокрит; количество эритроцитов; среднее содержание гемоглобина в одном эритроците; средний объем эритроцитов: СОЭ: количество ретикулоцитов; содержание гемоглобина; количество тромбоцитов; количество лейкоцитоз.

• Гематокрит –часть объема крови приходящегося на долю эритроцитов (форменных элементов): ♂ – 0.4-0.49 л/л, ♀ – 0.36-0.42л/л;

• Количество эритроцитов: (3,9-5,1)10¹²/л, (3,7-4,9)10¹²/л;

• Среднее содержание гемоглобина в одном эритроците:25.4-34.6 пг;

• Средний объем эритроцитов:80-100 мкм³, 79-98 мкм³;

• СОЭ:♂ – 1-10мм/ч, ♀ – 2-15мм/ч;

• Количество ретикулоцитов:0,5-1,2%;

• Содержание гемоглобина: ♂ – 130-170 г/л, ♀ – 120-150 г/л;

• Количество тромбоцитов:(150-450)×10⁹/л;

• Количество лейкоцитов:(4-9)×10⁹/л;

60. Значения некоторых показателей гомеостаза в норме и единицы их измерения: рН венозной и артериальной крови; вязкость цельной крови и плазмы крови: общее содержание белка в плазме: общий объем крови в организме (в % от массы тела): осмотическое давление плазмы крови; онкотическое давление плазмы крови; содержание глюкозы в крови.

• рН венозной крови 7,34;

• рН артериальной крови 7,4;

• вязкость цельной крови 4,5-5,0 по отношению к вязкости воды, принятой за 1.0;

• вязкость плазмы крови 1,8-2,2 по отношению к вязкости воды, принятой за 1,0;

• общее содержание белка в плазме 60-85 г/л;

• общий объем крови в организме человека 6-8% от массы тела;

• осмотическое давление плазмы крови 290±10 мосмоль/кг (7,3 атм. Или 5600 мм рт. ст., или 745 кПа);

• онкотическое давление плазмы крови 25-30 мм рт. ст.;

• содержание глюкозы в крови 3,33-5,55 ммоль/л.