На казахском языке

Основная:

1.Сейтембетов Т.С., Төлеуов Б.И., Сейтембетова А.Ж.. Биологиялық химия.-Қарағанды.-2007.

2. Тапбергенов С.О. Медициналық биохимия.-Павлодар.-2008.

2.Сеитов З.С., Биологиялык химия, 2007

3.Сейтембетова А.Ж.., Лиходий С.С., Биологиялық химия, 1994.

Дополнительная:

1.Биохимия сұрақтары мен жауаптары. ҚР ҰҒА корр., проф. С.М. Адекеновтің ред. басшылығымен.-Астана,2003.

На английском языке

1. Lehninger « Principles of biochemistry», Fourth Edition, David L.Nelson, Michael M. Cox, 2005.

2. Murray R.K., Granner D.K., Mayes P.A., Rodwell V.W., Harpers Biochemistry.1988.

3. Saini A.S., Kaur J., Textbook of biochemistry.- New Delhi,1995.

7. Контроль (вопросы, тесты, задачи и пр.)

Упражнения для самоконтроля.

1. Допишите недостающие кислоты, участвующие в реакции и укажите фермент, катализирующий эту реакцию.

СН₃ СООН

 

НС - NН₂ + ? (СН₂)₂ + ?

 

СООН НС - NН₂

СООН

2. Напишите продукты декарбоксилирования аминокислот, обладающие активным биологическим действием.

3. Напишите образование креатинфосфата и креатина, укажите место их образования и значение креатинфосфата.

4. Назовите реакции, протекающие в печени при обмене белков.

5. В каких органах протекают этапы биосинтеза креатина?

Ситуационные задачи

1. В исследуемой сыворотке крови количество креатина 1,2 ммоль/л. О нарушении работы какого органа можно думать?

2. Какие физиологические эффекты ГАМК используют для лечение неврологических заболевании (эпилепсия, возбуждаемость).

Лабораторная работа

Методическое указание 14

Количественное определение содержания креатинина в сыворотке

крови и моче по цветной реакции ЯФФЕ (метод Поппера).

Принцип. Креатинин реагирует с пикриновой кислотой с образованием в щелочной среде окрашенных в оранжево-красный цвет соединений. Интенсивность окраски пропорциональна концентрации креатинина.

1. Ход определения креатинина в сыворотке крови. 2 мл сыворотки крови смешивают в пробирке с 6 мл насыщенного прозрачного раствора пикриновой кислоты. Через 5 мин. пробирку помещают на 15-20 сек. в кипящую водяную баню, затем содержимое пробирки фильтруют. Берут три пробирки и вносят в них в указанном порядке следующие реактивы.

Пробирки Реактивы	1 опыт	2 контроль	3 стандарт
Фильтрат	4мл	—	—
Стандартный раствор креатинина (1мг%)х	—	—	1мл
Пикриновая кислота насы-щенный раствор	—	3мл	3мл
Едкий натр 10% раствор	0,2мл	0,2мл	0,2мл
Вода дистиллированная	до 10мл	до 10мл	до 10мл

Через 10мин. пробы колориметрируют на ФЭКе против контрольной пробы в кювете с рабочей длиной 2 см при зеленом светофильтре.

Расчет:

Ех х 100

Х = мг%

Ест

Х - содержание креатинина в сыворотке крови в мг%

Ех - экстинкция опытной пробы

Ест - экстинкция стандартной пробы

1мг % - концентрация креатинина в стандартной пробе

2. Ход определения креатинина в моче. В три мерные на 100мл колбы вносят в указанном порядке следующие реактивы:

Пробирки Реактивы	1 опыт	2 контроль	3 стандарт
Моча	0,5мл	—	—
Стандартный раствор креатинина (100мг%)	—	—	0,5мл
Пикриновая кислота насы-щенный раствор	3мл	3мл	3мл
Тщательно встряхивают
Едкий натр 10% раствор	0,2мл	0,2мл	0,2мл
Оставить при комнатной	температуре	на 10 минут
Вода дистиллированная	до 100мл	до 100мл	до 100мл

Колориметрировать на ФЭКе против контроля в кювете с рабочей длиной.

1 см при зеленом светофильтре.

Расчет. Сст х Ех х а 0,5 х Ех х а Ех х а

Х = = =

Е_ст х в х 1000 Ест х 0,5 х 1000 Ест х 1000

Х - содержание креатинина в суточном количестве мочи в г

Сст - количество мг креатинина в стандартном растворе - 0,5мг

Ех - экстинкция опытной пробы

Ест - экстинкция стандартной пробы

а - суточное количество мочи в мл

в - количество мочи взятое для анализа

1000 - коэффициент пересчета на г.

В норме в суточном количестве мочи содержится 0,5-2,0г креатинина

Определения содержания креатинина по конечной точке в сыворотке крови и моче.

Креатинин КТ “ДДС”

Принцип метода

Метод основан на реакции Яффе. Креатинин в щелочной среде взаимодействует с пикриновой кислотой с образованием окрашенного комплекса. Интенсивность окраски прямо пропорциональна концентрации креатинина в образце и измеряется фотометрически при длине волны 500 (490-510) нм.

Подготовка к анализу

Реагенты 1,2,3 и 4 готовы к использованию.

Проведение анализа

Компоненты реакционной смеси отбирать в количествах, указанных в таблицах 1 и 2.

Определение креатинина в сыворотке крови

Таблица 1

Отмерить, мл	Опытная проба	Калибровоч-ная проба	Контрольная (холостая) проба
Сыворотка крови Вода дистилированная Калибратор Реагент 3	0,5 1,0 - 0,5	- 0,5 0,25 0,25	- 0,75 - 0,25
Пробы перемешать. Опытную пробу через 3-5 мин. центрифугировать при 900 g в течение 5-7 мин.
Супернатант	1,0	-	-
Реагент 1	0,5	0,5	0,5
реагент 2	0,5	0,5	0,5

Пробы перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18-25С) точно в течении 20 мин. Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб в кювете 3,0; 5,0 или 10 мм при длинне волны 500 нм против холостой пробы. Определение креатинина в моче.

Таблица 2

Отмерить, мл	Опытная проба	Калибровоч-ная проба	Контрольная (холостая) проба
Разведенная моча Вода дистилированная Калибратор Реагент 3 Реагент 1 Реагент 2	0,5 0,25 - 0,25 0,5 0,5	- 0,5 0,25 0,25 0,5 0,5	- 0,75 - 0,25 0,5 0,5

Пробы тщательно перемешать и инкубировать при комнатной температуре (+18-25С) точно в течении 20 мин. Измерить оптическую плотность опытной и калибровочной проб в кювете 3,0; 5,0 или 10 мм при длине волны 500 нм против холостой пробы.