I.2. Использование табличных данных о характеристиках удерживания

В настоящее время опубликовано большое количество таблиц относительных удерживаемых объемов для самых разных веществ. Эти таблицы, а также компьютерные базы данных можно использовать для идентификации компонентов анализируемых проб при отсутствии необходимых эталонных веществ. Анализируемую пробу разделяют на колонке при условиях, указанных в соответствующей таблице, предварительно введя в нее небольшое количество вещества, служащего стандартом.

Для идентификации выделенных компонентов анализируемой пробы сравнивают полученные значения относительных удерживаемых объемов V_отн. с табличными данными. Так как внутри одного класса соединений графическая зависимость V_отн. от числа атомов n обычно прямолинейная, то построив калибровочный график зависимости lgV_отн. от n и определив V_отн. выделенных веществ можно достаточно полно их идентифицировать. Для построения калибровочного графика нужно знать V_отн. для 34 членов данного гомологического ряда.

Если в анализируемой пробе содержатся соединения различных классов, то для их идентификации нужно построить несколько аналогичных калибровочных графиков как для полярной, так и для неполярной неподвижной жидкой фазы. Дальнейшая идентификация осуществляется путем повторного выделения идентифицируемого вещества и исследования его различными физико-химическими методами.

Недостатки этого метода идентификации следующие:

 необходимость при анализе пробы точно соблюдать условия разделения, использованные при получении опубликованных данных;

 наличие дефицитных стандартов для веществ различных гомологических рядов.

Некоторыми преимуществами по сравнению с описанным выше методом при идентификации компонентов анализируемой пробы обладает метод Ковача.

Суть этого метода заключается в использовании линейной зависимости между логарифмами объемов удерживания и числом углеродных атомов нормальных парафинов, выраженным индексами удерживания I.

Идентификация по индексам удерживания по сравнению с другими методами идентификации имеет следующие преимущества:

– в качестве стандарта используется не случайное вещество, а гомологический ряд нормальных углеводородов, благодаря чему точность и воспроизводимость определения индексов очень высокие. Кроме того, нормальные углеводороды наиболее доступны в качестве стандартных веществ;

– значения индексов удерживания намного меньше зависят от температуры колонки, чем относительные удерживаемые объемы, что расширяет диапазон температур колонки, позволяющий проводить идентификацию;

– при наличии литературных данных по индексам удерживания Ковача можно проводить качественный анализ без применения индивидуальных веществ.

Однако результаты идентификации, полученные и методом Ковача, должны быть проверены другими независимыми методами.

I.3. Использование графических или аналитических зависимостей между относительными удерживаемыми объемами и другими физико-химическими свойствами веществ.

Если между логарифмами относительных удерживаемых объемов веществ одного гомологического ряда и другими физико-химическими характеристиками этих веществ, например температурами кипения, молекулярной рефракцией, молярным коэффициентом экстинкции и др., существует линейная зависимость, то для идентификации компонентов анализируемых веществ могут быть использованы соответствующие графические зависимости.

Например, на колонках с неполярным адсорбентом в последовательности, соответствующей их температуре кипения, выделяются вещества, относящиеся даже к разным классам. На колонках с полярной фазой линейность зависимости логарифма удерживаемых объемов от температуры кипения наблюдается для веществ одного гомологического ряда.

Так как относительный удерживаемый объем является функцией температуры хроматографической колонки, анализ следует проводить именно при тех условиях, для которых построен соответствующий график, иначе идентификация может оказаться неверной, потому что при изменении температуры может измениться даже порядок элюирования. Если рабочая температура отличается от требуемой величины, необходимо привести удерживаемый объем к соответствующей температуре при помощи зависимости lgV_отн. от 1/Т.

Для идентификации хроматографических пиков можно воспользоваться уже опубликованными графиками или построить необходимые кривые на основании результатов разделения калибровочных смесей.