- •1. Понятие хроматографии. Основные цели и задачи.
- •2. Классификация хроматографических методов.
- •3. Элюентная хроматография.
- •4. Вытеснительная хроматография.
- •5. Фронтальная хроматография.
- •6. Хроматограмма. Основные характеристики хроматографического пика.
- •7. Основные характеристики удерживания и разделения компонентов на хроматограмме.
- •8. Основные закономерности сорбциолнных процессов. Фактор емкости и коэффициент извлечения.
- •9. Основные факторы размывания хроматографического пика.
- •10. Теория теоретических тарелок. Расчет вэтт и количества теоретических тарелок по хроматограмме.
- •11. Оценка эффективности и селективности хроматографической колонки.
- •12. Степень разделения компонентов и ее связь с параметрами хроматографической колонки.
- •13. Уравнение Ван-Деемтера для насадочной колонки.
- •14. Уравнение Голея для капиллярной колонки.
- •15. Определение оптимального значения скорости подвижной фазы.
- •16. Влияние температуры на размывание хроматографического пика.
- •17. Разделение компонентов в изотермическом режиме и режиме программирования температуры.
- •18. Газовая хроматография. Общие понятия.
- •19. Общая схема газо-жидкостного хроматографа.
- •20. Хроматографические колонки применяемые в гжх.
- •21. Методика заполнения насадочной колонки для гжх.
- •22. Основные характеристики подвижной фазы.
- •23. Общие требования к устройствам ввода пробы в гжх
- •24. Ввод газообразных и твердых проб в гжх
- •Ввод пробы
- •25. Ввод жидких проб в гжх
- •26. Детекторы в гжх, основные требования.
- •27. Интегральные и дифференциальные детекторы.
- •28. Потоковые и концентрационные детекторы.
- •29. Характеристики детекторов (чувствительность, порог чувствительности).
- •30. Линейность, селективность детекторов.
- •31. Общее устройство и принципиальная электрическая схема катарометра.
- •32. Типы термочувствительных ячеек и элементов детектора по теплопроводности.
- •33. Детектор по плотности.
- •34. Пламенно-фотометрический детектор.
- •35. Вольт-амперная характеристика ионизационных детекторов.
- •36. Пламенно-ионизационный детектор.
- •37. Детектор электронного захвата.
- •39. Фотоионизационный детектор.
- •40. Газоадсорбционная хроматография. Силы взаимодействия сорбата и сорбента.
- •41. Классификация разделяемых веществ и сорбентов в газоадсорбционной хроматографии.
- •42. Газожидкостная хроматография. Требования к неподвижной фазе.
- •43. Классификация жидких фаз. Основные представители.
- •44. Классификация жидких фаз по величине относительной полярности.
- •45. Влияние количества жидкой фазы и толщины пленки на эффективность колонки.
- •46. Жидкостная хроматография. Общие положения.
- •48. Распределительная жидкостная хроматография.
- •49. Ионообменная, ионная, ион-парная хроматография.
- •52. Общие закономерности проведения тонкослойной хроматографии
- •53. Сверхкритическая флюидная хроматография.
- •54. Схема и принцип действия жидкостного хроматографа. Хроматографические колонки.
- •55. Рефрактометрические детекторы
- •56. Фотометрические детекторы.
- •57. Флуореметрические детекторы.
- •58. Электрохимические, кондуктометрические и вольтамперометрические детекторы.
- •59. Качественный анализ в хроматографии. Основные цели и задачи, методы.
- •I.2. Использование табличных данных о характеристиках удерживания
- •60. Идентификация компонентов с использованием индексов удерживания Ковача.
- •61. Количественный анализ в хроматографии. Параметры пика используемые для количественного анализа.
- •62. Методы триангуляции. Измерение количественных параметров пиков различного разрешения.
- •63. Метод абсолютной калибровки и внутреннего стандарта.
- •64. Методы нормирования площадей
- •65. Какие электрокинетические явления лежат в основе метода капиллярного электрофореза?
- •66. Общее устройство систем капиллярного электрофореза. Основные ограничения метода.
- •67. Какова эффективность разделения методом капиллярного электрофореза (число теоретических тарелок) и за счет какого фактора она в основном достигается?
- •68. В чем заключается явление стекинга и какова его физическая природа?
- •69. Каков физический смысл критической концентрации мицеллообразования (ккм)?
- •70. Каково строение мицеллы и ее собственного двойного электрического слоя (дэс)?
56. Фотометрические детекторы.
а. Спектрометрический детектор с фиксированной длиной волны (λ) – наиб. простой и используется в жидкостных хроматографах для проведения серийных анализов. Источник света в них – ртутная лампа низкого давления, 90% излучения которой имеет λ =253,7 нм. Свет от этого источника проходит на проточную ячейку, в кот. непрерывно поступает элюат. Детектирование компонентов основано на том, что относительная плотность элюата и чистого элюента на данной λ заметно отличается.
б. Спектрофотометр с перестраиваемой λ состоит из источника света, монохроматора и фотоприемника. В кач-ве источника света используется дейтериевая лампа со спектром излучения 190-600 нм. Необходимую спектральную полосу выделяют с пом. интерференционных фильтров с заданной шириной спектральной полосы, или дифракционных решеток, имеющих 1000-3000 штрихов на миллиметре поверхности. Выделенный монохроматич. пучок света поочередно направляется на рабочую и сравнительную кюветы.
с. В спектрофотометрич. детекторах с плавно изменяющейся λ детектирование проводится путем сканирования по максимумам поглощения определяемых компонентов, что в больш-ве случаев требует остановки потока подв. фазы и занимает от нескольких секунд до нескольких минут (в зависимости от ширины охватываемого диапазона λ).
д. При использовании спектрофотометрических детекторов с диодной матрицей эти недостатки устраняются. Излучение с непрерывным широким спектром от источника проходит на проточную рабочую ячейку и попадает на дифракционную решетку, на кот. луч разлагается в спектр и монохроматические его составляющие фокусируются на плоскости, в кот. расположена фотодиодная матрица (в ней ок. 2000 фотодиодов). Применяя этот детектор можно за один хроматографич. цикл идентифицировать все хим. соединения, поглощающие в охватываемом матрицей диапазоне λ.
е. В жидкостных хроматографак часто используют универсальные детекторы - дифференциальные рефрактометры и интерферометры.
57. Флуореметрические детекторы.
Флюориметрические детекторы используются когда компоненты пробы флюоресцируют сами или когда эта способность у них появляется после образования соответ-щих производных. Чувствит-сть их проблиз-но в 100 раз выше чувствит-сти спектрофотометрич. детекторов, но они имеют более узкий диапазон линейности. В кач-ве источника излучения чаще используются УФ-источники. Интенсивность излучения, испускаемого флюоресцирующим компонентом, измеряется на λ, соответствующей максимуму спектра флюоресценции этого в-ва, находящемуся в области более длинных волн. Эти детекторы нельзя применять, если в элюенте содержатся примеси, способные вызывать гашение флюоресценции (напр., растворенный в элюенте кислород); если возникает рассеянный свет от источника, возбуждающего излучение, что может происходить из-за присутствия в элюате крупных рассеивающих излучение частиц.