11.2.3.2. Препараты с гистохимической реакцией на гликоген, атФазу и сдг

Чтобы убедиться в том, что скелетная мышца содержит мышечные волокна разных типов, необходимо поставить соответствующие гистохимические реакции (п. 1.1.4) – в том числе на активность ряда ферментов.

В этом случае приготовление препаратов имеет существенные особенности.

а) Взятый образец ткани

сразу не фиксируют (тогда все ферменты просто потеряли бы свою активность), а подвергают глубокомузамораживанию.

б) После замораживания приготовляют срезы.

в) Срезы размораживают и помещают в инкубационную среду – с таким составом, 

чтобы прошла изучаемая реакцияи чтобы один из её продуктов далокрашенное соединение.

г) Затем срезы промывают, фиксируют и заключают в консервирующую среду.

Гликоген

3. Препарат - гликоген в скелетных мышечных волокнах. ШИК-реакция.

а) На снимке видны поперечно срезанные мышечные волокна.

б) В их саркоплазме находятся глыбки гликогена (1), окрашенные в тёмно-малиновый цвет.

в) Более светлые на снимке волокна содержат меньше гликогена: это волокна I типа ("красные").

Полный размер

АТФаза

4. Препарат - типы мышечных волокон. Реакция на АТФазную активность.

Здесь тоже наблюдается подразделение мышечных волокон на 2 типа.

Волокна I типа (1) и при данной окраске являются более светлыми, что означает меньшую АТФазную активность.

Волокна II типа (2) - более тёмные: АТФаза быстрого типа.

Полный размер

СДГ

5. Препарат - типы мышечных волокон. Реакция на сукцинатдегидрогеназу.

1. а) Фермент СДГ содержится в митохондриях.

б) Поэтому гранулы проявления их активности, окрашенные в тёмно-синий цвет, маркируют расположение митохондрий.

2. Вновь видны различия между волокнами. -

Полный размер

Волокна I типа (1) теперь являются более тёмными - из-за большей активности СДГ, а волокна II типа (2) - более светлыми .

Как уже отмечалось, сердечная мышечная ткань развивается из утолщения висцерального листка спланхнотома – миоэпикардиальной пластинки.

9. Препарат - срез миокарда. Окраска железным гематоксилином.

Объеди- нение в функцио- нальные волокна

а) Основной элемент сердечной мышечной ткани – типичные кардиомиоциты (слово “типичные” часто опускают).

б) Это клетки цилиндрической формы, которые

стыкуются друг с другом своими основаниями, образуяфункциональные волокна.

Полный размер

Связи между "волок- нами"

"Волокна" связаны многочисленными анастомозами – за счёт того, что в этих участках кардиомиоциты

на концах раздвоены иконтактируют с клетками сразу двух "волокон".

Базаль- ная мембрана

а) Функциональные волокна окружены базальной мембраной.

б) Таким образом, последняя

покрывает лишь боковые поверхности кардиомиоцитов,

но не заходит на их основания (торцевые поверхности).

Размеры

а) Диаметр клеток (а значит, и диаметр "волокон") – около 20 мкм. Это

существенно меньше диаметра истинных волокон скелетной мышечной ткани (примерно 50-70 мкм; см. выше).

б) Длина кардиомиоцитов – примерно 100 мкм.