Диагностика энзима в моче

Для определения концентрации амилазы чаще всего используют биохимическое исследование мочи. Анализ мочи на амилазу выполняют с помощью двух методик:

Амилаза мочи может значительно изменяться в течение дня, именно поэтому для получения более точных данных пациенту необходимо собирать биоматериал на протяжении суток. Для этого нужно:

1. За двое суток до проведения исследования исключить физические и психоэмоциональные перегрузки, употребление алкоголя, острой, жирной и копченой пищи, прием мочегонных препаратов.

2. Иметь дома большую чистую емкость для сбора суточного биоматериала и приготовить стерильный контейнер. Его можно приобрести в аптечной сети, если это невозможно – рекомендуется взять стеклянную емкость с крышкой и обдать ее только что вскипевшей водой.

3. Накануне анализа не стоит принимать лекарственные средства без острой необходимости. Женщинам нельзя сдавать мочу в период месячных.Собирание мочи начинают утром, первую порцию мочи рекомендуют выпустить в унитаз. Вся остальная биологическая жидкость, выделенная человеком за сутки, собирается в одну емкость, хранят которую в холодильнике. Чтоб получить достоверный результат теста, перед каждым мочеиспусканием нужно совершать тщательный туалет гениталий.

Норма панкреатической амилазы в моче взрослых людей составляет:В разовой пробе – от 10 до 490 ед/л;в суточной – до 590 ед/л.

20.Понятие «фермент». Классификация и номенклатура ферментов. Охарактеризуйте класс изомеразы, лиазы и лигазы. Примеры.

Ферменты – это каталитически активные белки. Как и химические катализаторы неорганической природы, они ускоряют химические реакции. В ходе реакции они претерпевают изменения, но по ее завершении возвращаются в исходное состояние. Ферменты не инициируют химические реакции, а только изменяют скорость их протекания. Они катализируют только энергетически возможные реакции. Практически все биохимические реакции катализируются ферментами. Организованная последовательность процессов обмена веществ возможна при условии, что каждая клетка обеспечена собственным генетически заданным набором ферментов.

Классификация ферментов.

В принятой классификации ферменты объединены в группы по типу важнейших биохимических процессов, лежащих в основе жизнедеятельности любого организма. По этому принципу все ферменты делят на 6 классов.

1.Оксидоредуктазы - ускоряют реакции окисления - восстановления.

2.Трансферазы - ускоряют реакции переноса функциональных групп и молекулярных остатков.

3.Гидролазы - ускоряют реакции гидролитического распада.

4.Лиазы - ускоряют негидролитическое отщепление от субстратов определенных групп атомов с образованием двойной связи (или присоединяют группы атомов по двойной связи).

5.Изомеразы - ускоряют пространственные или структурные перестройки в пределах одной молекулы.

6.Лигазы - ускоряют реакции синтеза, сопряженные с распадом богатых энергией связей.

Изомеразы – ферменты, катализирующие изомерные превращения в пределах одной молекулы. Изомеразы – сложные ферменты. К их коферментам относятся пиридоксальфосфат, дезоксиаденозилкобаламин, глутатион, фосфаты моносахаридов (глюкозо-1,6-дифосфат) и др.

Лиазы — ферменты, катализирующие разрыв С–О, С–С, C–N и других связей, а также обратимые реакции отщепления различных групп субстратов не гидролитическим путем. Выделяют 7 подклассов. Эти реакции сопровождаются образованием двойной связи или присоединением групп к месту двойной связи. Класс насчитывает около 230 ферментов. Лиазы – сложные ферменты, коферментами служат пиридоксальфосфат, тиаминдифосфат, магний, кобальт.

ЛИГАЗЫ. Ферменты этого класса участвуют в реакциях соединения двух и более простых веществ с образованием нового вещества. Эти реакции требуют затрат энергии извне в виде АТФ.

21.Классификация ферментов по типу катализируемой химической реакции (6 классов ферментов). Охарактеризуйте эти классы, приведите примеры.

Классификация ферментов.

В принятой классификации ферменты объединены в группы по типу важнейших биохимических процессов, лежащих в основе жизнедеятельности любого организма. По этому принципу все ферменты делят на 6 классов.

1.Оксидоредуктазы - ускоряют реакции окисления - восстановления.( Основными из оксидоредуктаз являются дегидрогеназы, оксидазы, каталаза, пероксидаза, липоксигеназа).

2.Трансферазы - ускоряют реакции переноса функциональных групп и молекулярных остатков.

3.Гидролазы - ускоряют реакции гидролитического распада.

4.Лиазы - ускоряют негидролитическое отщепление от субстратов определенных групп атомов с образованием двойной связи (или присоединяют группы атомов по двойной связи).

5.Изомеразы - ускоряют пространственные или структурные перестройки в пределах одной молекулы.

6.Лигазы - ускоряют реакции синтеза, сопряженные с распадом богатых энергией связей.

Оксидоредуктазы. Это ферменты, катализирующие окислительно-восстановительные реакции, которые происходят в живых организмах и, следовательно, связаны с процессами дыхания и брожения. Реакции окисления веществ в организмах всегда сопровождаются реакциями восстановления. Окисление протекает как процесс отнятия водорода (электронов) от субстрата, а восстановление — как присоединение атомов водорода (электронов) к акцептору.Окислению могут подвергаться разнообразные вещества — углеводы, жиры, белки, аминокислоты, витамины и др.(каталаза, пероксидаза, липоксигеназа)Трансферазы или ферменты переноса. Они ускоряют перенос целых групп и молекулярных остатков с одних соединений на другие, в результате чего образуются новые вещества. Трансферазы — один из наиболее обширных классов, которые имеют огромное значение для обмена веществ живых организмов( аминотрансферазы, фосфортрансферазы, глюкозилтрансферазы). Каждый из указанных подклассов трансфераз переносит только свойственные ему атомные группировки. Фосфортрансферазы ускоряют перенос остатков фосфорной кислоты на спиртовые, карбоксильные, азотсодержащие и др группы орг. соединенийГидролазы. Эти ферменты катализируют гидролиз, а иногда и синтез органических соединений с присоединением к ним воды. Гидролазы делят на ферменты, гидролизующие глюкозидные связи, подобные тем, которые встречаются в крахмале и целлюлозе и других полисахаридах, ферменты, гидролизующие пептидные связи в белках, и ферменты, гидролизующие сложные эфиры (жиры и др.). Изомеразы. Такие ферменты катализируют превращение органических соединений в их изомеры. В отличие от трансфераз изомеразы катализируют перенос групп только внутри молекулы. ( триозофосфатизомераза, альдозомутаротаза, фосфогексоизомераза) они играют важную роль в обмене веществ. Лигазы, или синтетазы- ускоряющих синтез сложных органических соединений из более простых. Реакция синтеза требует значительной затраты энергии, поэтому активность лигаз проявляется лишь в присутствии таких макроэргических соединений, как аденозинтрифосфорная кислота (АТФ)

22.Что такое «ингибиторы» и «активаторы» ферментов. Виды ингибирования.

1. Активаторы – вещества, которые повышают скорость ферментативных реакций, увеличивают активность ферментов. Они бывают органической и неорганической природы. Активаторы органической природы: желчные кислоты (активируют поджелудочную липазу), энтерокиназа (активирует трипсиноген) Активаторы неорганической природы: например, HCl активирует пепсиноген. 2. Ингибиторы – вещества, которые уменьшают активность ферментов и замедляют химические реакции. Различают обратимое и необратимое ингибирование: Если ингибитор связывается с молекулой фермента слабыми связями то такой ингибитор легко удаляется и активность фермента восстанавливается; Если ингибитор связывается с молекулой фермента прочными ковалентными связями, то наступает необратимое подавление активности фермента Необратимое ингибирование происходит при денатурация ферментовбелков под дей ствием концентрированных кислот и щелочей, солей тяжелых металлов, ультрафиолетовом облучении. Виды ингибирования