Добавил:
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Микробиологические исследования мяса.ppt
Скачиваний:
205
Добавлен:
30.05.2014
Размер:
3.55 Mб
Скачать

Бактериологические исследования мяса

Отбор проб

Подготовка образцов к исследованию и проведение

Методы обнаружения аэробов

Выявление возбудителя сибирской язвы

Выявление возбудителей рожи свиней, листериоза, пастереллеза

Выявление бактерий кокковой группы

Выявление бактерий рода Salmonella

Выявление бактерий рода Proteus

Методы обнаружения анаэробов

Методы обнаружения микобактерий

При различных заболеваниях животных и птицы мышцы и внутренние органы нередко обсеменены микроорганизмами. Продукты убоя этих животных (птицы) могут вызвать у человека инфекционные или пищевые заболевания.

Цель бактериологического анализа — подтверждение или исключение диагноза на инфекционные болезни, а также выяснение вопроса о наличии в мясе микробов, вызывающих пищевые токсикоинфекции и токсикозы.

Бактериологическое исследование проводят в случаях, предусмотренных действующими Правилами ветери нарного осмотра убойных животных и ветеринарно- санитарной экспертизы мяса и мясных продуктов (1983 г.) и нормативно-технической документацией (ГОСТ 21237— 75. Мясо. Методы бактериологического анализа).

1.при подозрении на остропротекающие инфекционные заболевания (сибирская язва, эмфизематозный карбункул и др.);

2.при ящуре в случае обнаружения в мышцах единичных некротических очагов;.

3.при чуме свиней, роже, пастереллезе и болезни Ауески в случае отсутствия патологических изменений в мускулатуре туши и во внутренних органах;

4.при некробактериозе в случае поражения нескольких органов и удовлетворительной упитанности туши;

5.при лейкозе. в случае поражения отдельных лимфатических узлов или органов и отсутствия изменений в скелетной мускулатуре;

6.при мыте;

7.при беломышечной болезни и кетозах, если изменения в мускулатуре слабо выражены (цвет бело-розовый) или при патологоанатомических изменениях в органах или части скелетной мускулатуры;

8.при инфекционном ринотрахеите, парагриппе-3, вирусной диарее, аденовирусной инфекции с наличием патологоанатомических изменений в туше и во внутренних органах;

9.при стахиботриотоксикозе в случае отсутствия патологоанатомических изменений (некротических участков);

10.при осложненном течении онхоцеркоза с признаками гнойно-некротических процессов;

11.при пироплазмидозах в случае исчезновения желтушности в течение двух суток;

12.при маститах, эндометритах, параметритах коров и овец;

13.во всех случаях вынужденного убоя животных независимо от причин убоя и принадлежности животных;

14.при отравлении или подозрении на отравление ядовитыми веществами химического или растительного происхождения;

15.при подозрении на сальмонеллезные заболевания или на обсеменение мяса сальмонеллами;

16.при желудочно-кишечных заболеваниях;

17.при тяжело протекающих заболеваниях органов дыхания;

18.при обширных ожогах, кровоизлияниях с воспалительными явлениями в лимфатических узлах и признаках септического процесса или при небольших кровоизлияниях в подкожной клетчатке, во внутренних органах, на слизистых оболочках;

19.при отеках внутренних органов и частей туши;

20.при жировом перерождении печени;

21.при наличии гнойных очагов в печени, почках, селезенке и легких;

22.при желтушном окрашивании всех тканей туши, исчезающем в течение двух суток;

23.при обнаружении серозных и фибринозных, перикардитов у свиней;

24.при септикопиемических заболеваниях;

25.при гнойных нефритах, нефрозах;

26.при удалении кишечника из туши позднее чем через 2 ч. после убоя животного;

27.при обнаружении в паренхиматозных органах множественных абсцессов;

28.при доставке на колхозный рынок неклейменого мяса без головы и внутренних органов или без справки ветеринарного врача (фельдшера);

29.при сомнительной свежести мяса или других продуктов и невозможности установить их доброкачественность органолептическим путем, а также во всех других случаях, когда санитарная оценка не может быть дана по результатам ветеринарного осмотра;

30.по требованию органов ветеринарного и санитарного надзора;

31.при обнаружении в сырокопченых колбасах бактерий группы кишечной палочки или протея после дополнительной выдержки в течение 10—12 сут. в случае сохранения нормальных органолептических свойств.

В зависимости от предполагаемого диагноза и характера патологоанатомических изменений для бактериологического исследования в ветеринарную лабораторию направляют:

две пробы мышц — часть сгибателя или разгибателя передней и задней конечности или кусок другой мышцы имеете с покрывающей его фасцией размером не менее 8 х 6 х 6 см;

лимфатические узлы (не менее двух) — поверхностный шейный или собственно подкрыльцовый и наружном подвздошный; от свиных туш

— подчелюстной и поверхностный шейный дорсальный или подкрыльцовый первого ребра и подколенной складки. Лимфатические узлы берут целиком вместе с окружающими их соединительной и жировой тканью;

внутренние органы — целиком селезенку и почку, долю печени с печеночным лимфатическим узлом или опорожненным желчным пузырем. Поверхность разреза доли печени прижигают до образования струпа;

трубчатую кость (посылают для уточнения диагноза с целью выделения более чистой культуры возбудителя). При исследовании полутуш или четвертин туш в лабораторию направляют кусок мышцы, лимфатические узлы и трубчатую кость.

Пробы берут стерильными инструментами. Каждую пробу в отдельности заворачивают в пергаментную бумагу или полиэтиленовую пленку и складывают в общий бумажный пакет. На нем ставят дату отбора пробы, номер туши и направляют в ветеринарную лабораторию в запломбированном (или опечатанном) металлическом ящике с нарочным.

Если же лаборатория находится на большом расстоянии от места взятия материала и его невозможно доставить в течение 24—30 ч., то для предупреждения размножения гнилостной микрофлоры пробы консервируют. Для этого их помещают в 30 %-ный водный раствор глицерина. Воду предварительно стерилизуют кипячением. Материал можно консервировать в стерильном вазелиновом масле. Консервирующую жидкость заливают в количестве, в 4—5 раз превышающем объем материала.

Обработанный материал укладывают в оцинкованный ящик и пересыпают опилками, смоченными дезинфицирующим средством. При необходимости тару с образцами опечатывают или пломбируют.

В сопроводительном документе указывают: вид мяса, его принадлежность, перечень пересылаемых проб и их количество, причину направления материала, краткие патологоанатомические данные, предполагаемый диагноз, дату взятия образцов и подпись лица, напра вившего их на исследования.

Кроме того, следует сообщить данные осмотра туши и внутренних органов, основное содержание ветеринарного документа с места доставки туш и какое требуется провести исследование.

Пробы: мясо, лимфатические узлы, внутренние органы, костный мозг

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Бактериоскопия мазков-отпечатков

 

Посевы

 

Реакция преципитации на сибирскую

 

 

язву (при подозрении)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Мясо-пептонный

 

 

Элективные

 

агглютинацииРеакцияс моноре- -Оцепторнымии Н-адсорбиро-

 

Среды обогащения (для

 

агарТрехсахарныйКрумвиде-Олькеницкого

 

МПА

 

 

МПБ

 

 

Желатин

 

 

 

сМПА кровью

 

 

сывороткамиванными

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

агар

 

 

 

 

 

 

 

 

среды

 

 

 

 

накопления сальмонелл)

 

 

 

 

 

 

Изучение характера роста,

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Элективные среды

 

 

 

 

 

 

 

микроскопия мазков из

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

(агар Эндо,

 

 

 

 

 

 

подозрительных колоний

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

агар Левина)

 

 

 

 

 

Определение подвижности

 

 

 

 

 

 

 

 

Изучение характера

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

роста, микроскопия

 

 

 

 

 

 

 

Проба на каталазу (для

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

мазков из

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

подозрительных

 

 

 

 

 

 

обнаружения листерий)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

колоний

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Отсевы

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Определение

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

подвижности

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Пестрый ряд

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Углеводная среда

 

Мясо-пептонный

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

с салицином

 

 

 

печеночный агар

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Скошенный агар по

 

 

 

Среда

 

 

 

 

 

Шукевичу и агар

 

 

 

Китта-Тароцци

 

 

 

 

 

Плоскирева (для

 

 

 

 

(на анаэробы)

Ковальчука

 

 

 

обнаружения протея)

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Изучение

 

 

 

 

 

Изучение характера

 

 

 

 

 

 

 

 

 

характера

 

 

 

 

 

 

роста. Мик-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

роста,

модификации

 

 

 

 

роскопия мазков

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

микроскопия

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

мазков

 

 

 

 

 

 

Определение

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

подвижности

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Биопроба

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

в

 

 

 

 

 

Пестрый ряд

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Реакция

Пестрый

 

Биопроба

 

 

 

агглютинации с

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

монорецептор-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ными О- и Н-

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

ряд

 

 

 

 

 

адсорбированными

 

 

 

 

 

 

 

 

сыворотками

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Образцы освобождают от жировой и соединительной ткани, погружают на 2—3 мин. в спирт и два раза обжигают с поверхности. Для приготовления суспензии стерильными ножницами из глубины исследуемых образцов (из разных мест) вырезают кусочки размером 2 х 1,5 х 2,5 см; лимфатические узлы разрезают пополам. Для приготовления мазков-отпечатков для бактериоскопии (2—10) одновременно с приготовлением суспензии отбирают кусочки мышц, лимфатических узлов, органов. Мазки фиксируют и окрашивают по Граму и одним из специальных методов (например, метод Ольта, Муромцева) для выявления капсул возбудителя сибирской язвы.

Для посева составляют две пробы по 15 г каждая (одна —из кусочков мышц и лимфатических узлов; другая — из кусочков печени, почек, селезенки. Каждую пробу помещают в стерильные стаканы гомогенизатора, куда добавляют по 15 мл физиологического раствора (1 мл полученной взвеси содержит 0,5 г продукта) и отстаивают 10 мин. Затем петлей или пастеровской пипеткой из верхнего слоя надосадочной жидкости каждой взвеси делают посевы на поверхность подсушенного МПА для обнаружения возбудителей некоторых зооантропонозов (сибирская язва, рожа свиней, листериоз, пастереллез, а также кокковые инфекции); на поверхность элективной среды (среда Эндо или Левина) — для обнаружения сальмонелл и бактерий группы кишечных палочек; в среду Киллиана—для выделения Salmonella cholerae suis; в одну из сред обогащения (селенитовый Ф-бульон, Мюллера, Кауфмана и др.) —для накопления сальмонелл; в среду Б или Хейфеца— для обнаружения бактерий группы кишечных палочек; в конденсационную воду свежескошенного МПА (метод Шукевича) —для обнаружения бактерий рода Proteus; в среду Китта-Тароцци—при подозрении на анаэробные инфекции.

Посев в среду обогащения производят следующим

образом: в одну колбу со средой вносят 10 г измельченной пробы из мышц и лимфатических узлов; в другую — 10 г измельченных кусочков паренхиматозных органов (сердце, селезенки, печень).

Посевы помещают в термостат при температуре 37°С. Через 18 ч. их просматривают визуально, при необходимости — через лупу или под микроскопом при малом увеличении.

Если роста не наблюдается через 18 ч., то посевы выдерживают в термостате дополнительно 6 ч. В зависимости от результатов бактериоскопии и характера роста на питательных средах проводят исследование на наличие возбудителя определенной инфекции.