10. Опыт. Изучение резорбционных свойств поврежденных клеток методом

сравнительного окрашивания.

Лабораторная работа № 1. Изучение тинкториальных свойств поврежденных клеток методом окрашивания.

Ход работы	Время ма­нипуляции, мин
1. В мерную пробирку добавить 1-2 капли антикоагулянта (цитрата натрия).	1
2. Лягушку обездвижить путем разрушения спинного мозга.	4
3. Лягушку декапитировать и собрать кровь в мерную пробирку.	5
4. Кровь развести в 10 раз физиологическим раствором, добавить несколько капель метиленовой или трипановой сини, по 0,5 мл смеси разлить в 3 пробирки.	2
5. Во вторую пробирку добавить 1 каплю соляной кисло­ ты, в третью — 5 капель, в четвертую — 10.	3
6. Подождать 4 мин.	4
7. Пастеровской пипеткой нанести содержимое каждой из пробирок в камеру Горяева. Рассмотреть под микроско­пом. Ядра поврежденных клеток окрашиваются в голу­бой цвет. Сосчитывают 100 клеток и высчитывают про­цент поврежденных.	15
8. Анализируют полученные результаты, оформляют в тетради для семинарских занятий.____________	6

11. Опыт. Развитие отека при повышении осмотического давления

перитонеальной жидкости (экспериментальный асцит).

Тема занятия: Патофизиология водно-солевого обмена. Патогенез

отеков.

Цель занятия: моделирование экспериментального асцита.

I / .I Опыт№ 1. Развитие отека при повышении осмотического давления • 'перитонеальной жидкости.

Для опыта берут двух крупных лягушек. Одной вводят в брюшную полость 2 мл 20 % раствора хлористого натрия или 40 % раствора глюкозы, второй -2 мл физиологического раствора (контроль). Лягушек взвешивают, помещают в сосуд с водой на 30 минут. После этого лягушек обездвиживают, вскрывают брюшную полость и определяют объем перитонеальной жидкости, собирая ее в мерные пробирки. Анализируют полученные результаты, делают выводы.

12. Опыт. Морфофункциональная атипия клеток при микроскопическом

исследовании опухолей. Определение индекса «злокачественности».

Тема: ПАТОФИЗИОЛОГИЯ ТКАНЕВОГО РОСТА. ОПУХОЛЕВЫЙ ПРОЦЕСС.

1-й час - Теория. Причины и механизмы малигнизации. Функциональные, морфологические, антигенные особенности опухолей.

2-3-и часы - Практика. Задание 1.Разобрать один из методов воспроизведения опухолей (метод перевивки) Задание 2. С помощью телевизионной техники продемонстрировать морфологические особенности клеток карциномы Эрлиха.

Задание 3, Микроскопическое изучение морфологической атипии малигнизированных клеток асцитной карциномы, полученной при экспериментальном моделировании. Задание 4. Микроскопическое исследование атипии опухолевых клеток больных с различными онкологическими заболеваниями.

Тема занятия: ПАТОФИЗИОЛОГИЯ ТКАНЕВОГО РОСТА.ОПУХОЛЕВЫЙ ПРОЦЕСС.

Теория: Причины и механизмы малигнизации. Функциональные,

морфологические, антигенные особенности опухолей. Практика. Задание 1. Разобрать один из методов воспроизведения опухолей.

Воспроизведения злокачественной опухоли в экспериментальных условиях путем перевивки малигнизированных клеток.

Мышь с клетками карциномы Эрлиха в брюшной полости наркотизируют тиопенталом (5 мг/100 г массы тела), Соблюдая асептику, пунктируют брюшную полость и отсасывают шприцем асептическую жидкость, которая содержит опухолевые клетки, По 0,2-0,4 мл асцитической жидкости вводят внутрибрюшишю контрольной мыши. Через 2 недели развивается карцинома с выраженным асцитом.

Задание 2. С помощью телевизионной техники продемонстрировать особенности клеток карциномы Эрлиха (полиморфизм, базофилию, ядерную и ядрышковую, митозы).

Задание 3. Микроскопическое изучение морфологической атипии малигнизированных клеток асцитной карциномы, полученной в результате экспериментального моделирования (перевивки опухоли).

Мышь с перевитой асцитной карциномой наркотизируют тиопенталом, пунктируют брюшную полость и извлекают шприцем 0,1 мл асцитической жидкости, содержащей опухолевые клетки. Наносят по маленькой капле асцита на предметное стекло, делают мазок, подсушивают его, фиксируют в 96° спирте 10 мин и окрашивают по Романовскому-Гимза 20 мин. Полученный препарат промывают в холодной воде, высушивают фильтровальной бумагой и микроскопируют.

Наблюдают выраженную морфологическую атипию опухолевых клеток (бласты, атипичные митозы, полиморфизм, гипертрофию и гиперхромию ядра, ядрышек, базофилию цитоплазмы), которая является отражением функциональной атипии. Зарисовывают участок препарата с наиболее выраженной атипией клеток асцитной опухоли. Обсуждают механизмы морфофункциональной атипии злокачественных клеток.

Задание 4. Микроскопическое исследование атипии опухолевых клеток больных с различными онкологическими заболеваниями (ув.40x10). Мазки-отпечатки опухолевых клеток, приготовленные в клинике, от больных с различными онкологическими заболеваниями (раки, саркомы, фибромы и др.) микроскопируют, зарисовывают участок препарата с максимальным полиморфизмом клеток. Затем в препаратах для вычисления «индекса злокачественности» в разных полях зрения подсчитывают общее количество клеток и число крупных атипичных бластов. Суммируют полученные данные и находят отношение числа бластов к общему количеству клеток, т.е. «индекс злокачественности». Подсчитывают 100 клеток и выражают этот показатель в процентах, Результаты подсчетов «индексов злокачественности» в разных препаратах заносят в таблицу, сравнивают и обсуждают.