- •Часть I
- •Часть I
- •Предисловие
- •4. Содержание обучения.
- •Часть I модуль 1 «общие закономерности метаболизма. Метаболизм углеводов, липидов, белков и его регуляция» введение
- •Литература
- •Тема для самостоятельного изучения биохимия как наука. Этапы развития биохимии. Методы биохимических исследований
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература.
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - с. 9-11.
- •Приложение 1 Граф логической структуры
- •Содержательный модуль 1. «роль ферментов и витаминов в обмене веществ»
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. - с. 18-36.
- •Инструкция к практическому занятию Работа №1 «Количественное определение белка биуретовым методом»
- •Работа №2 «Доказательства белковой природы ферментов»
- •Приложение 1 Граф логической структуры
- •Тема 1.2. Исследование структуры и физико-химических свойств ферментов
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •Инструкция к практическому занятию
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.3. Определение активности ферментов. Исследование кинетики ферментативного катализа и влияния активаторов и ингибиторов
- •Содержание обучения
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія.- Київ-Тернопіль:Укрмедкнига, 2000.-с.88-89, 98-112
- •Инструкция к практическому занятию: “ Определение активности ферментов, исследование кинетики ферментативного катализа и влияния активаторов и ингибиторов“
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.4. Исследование роли кофакторов и коферментных форм витаминов в каталитической активности ферментов
- •Задание 4. Образуемая при работе в мышцах молочная кислота в покое частично превращается в пировиноградную, отдавая водород, в реакции называемой: а. Дегидратацией в. Дегидрированием
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль.: Укрмедкнига, 2000.- с. 89-92, 209-210, 399-404.
- •Работа і. Изучение коферментной функции витамина в1
- •Работа іі «Изучение коферментной функции витамина рр»
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.5. Исследование участия витаминов и коферментных форм витаминов в различных биохимических процессах
- •Конкретные цели: Цели исходного уровня:
- •D. Пиримидин
- •Содержание обучения
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •С. Фолиевая кислота
- •Работа III. Количественное определение витамина р в чае
- •Граф логической структуры
- •Задания для самопроверки и самокоррекции содержательного модуля «роль ферментов и витаминов в обмене веществ»
- •Содержательный модуль 2 «обмен веществ и энергии»
- •Тема 1.6. Исследование окислительного фосфорилирования и синтеза атф, ингибиторы и разобщители окислительного фосфорилирования
- •Конкретные цели: Исходный уровень:
- •Задание 1. Соединения а, в, с, д и е имеют соответственно редокс-потенциалы, равные
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1. Губський ю.Г. Біологічна хімія. - Київ-Тернопіль.: Укрмедкнига, 2000. - с. 122-142
- •Инструкция к практическому занятию «Иследование окислительного фосфорилирования и синтеза атф. Ингибиторы и разобщители окислительного фосфорилирования».
- •2. Раствор яблочной кислоты (малат) 0,5 0,5
- •3. Раствор 2,6-дхфи 0,5 0,5
- •4. Суспензия митохондрий - 0,5
- •2. Сукцинат 0,5 0,5
- •3. Раствор 2,6-дхфи 0,5 0,5
- •4. Суспензия митохондрий - 0,5
- •Г р а ф логической структуры
- •Организация дыхательной цепи в митохондриях
- •Цитохромы
- •Тема 1.7. Обмен веществ и энергии. Исследование функционирования цикла трикарбоновых кислот
- •Задание 1. В результате окислительно-восстановительной реакции окраска 2,6-дхфи обесцветилась. Что произошло с этим индикатором в окислительно – восстановительной реакции ?
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •D. Пиридоксина
- •Инструкция к практическому занятию
- •Граф логической структуры
- •Задания для самопроверки и самокоррекции содержательного модуля «обмен веществ и энергии»
- •Содержательный модуль 3. «метаболизм углеводов и его регуляция»
- •Тема 1.8. Исследование особенностей переваривания углеводов. Биосинтез и катаболизм гликогена. Превращение других моносахаридов в глюкозу
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1. Губський ю.Г. Біологічна хімія.- Київ-Тернопіль.:Укрмедкнига, 2000.-с. 57-65, 163-165, 176-179, 395-396.
- •Инструкция к практическому занятию “Определение активности -амилазы слюны»
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.9. Анаэробное окисление углеводов. Гликолиз. Биосинтез глюкозы – глюконеогенез
- •Содержание обучения
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Задача 2 Эритроциты не имеют митохондрий. Какой конечный продукт окисления глюко- зы в них образуется?
- •Инструкция к практическому занятию Работа I. Моделирование реакций гликогенолиза
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.10. Исследование аэробного окисления глюкозы. Пентозофосфатный путь преобразования глюкозы
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія.- Київ-Тернопіль.:Укрмедкнига, 2000.-с.144-145, 153, 156-162, 154-155.
- •Инструкция к практическому занятию «Количественное определение пировиноградной кислоты в моче»
- •Граф логической структуры
- •Задания для самопроверки и самокоррекции содержательного модуля «метаболизм углеводов и его регуляция»
- •Содержательный модуль 4 «метаболизм липидов и его регуляция»
- •Тема 1.11. Структура и функции клеточных мембран
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •1.Губський ю.Г. Біологічна хімія.- Київ-Тернопіль.:Укрмедкнига, 2000.-с. 78-85.
- •Граф логической структуры
- •Мембраны – главный структурный элемент клетки
- •Липосома
- •Приложение 3 пол (перекисное окисление липидов)
- •Защита биомембран от пол
- •Неферметативные антиоксиданты
- •Тема 1.12. Исследование особенностей переваривания липидов. Возможные нарушения переваривания липидов и транспорта в крови экзогенных липидов
- •Конкретные цели : Цели исходного уровня:
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •1. Губський ю.І. Біологічна хімія. – Київ – Тернопіль: Укрмедкнига, 2000. – с. 190-194, 224-228, 389, 396-398
- •Инструкция к практическому занятию «Кинетика действия панкреатической липазы»
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.13. Исследование обмена жирных кислот и кетоновых тел. Бета-окисление жирных кислот.Биосинтез и трансформация холестерола
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников. Обязательная литература
- •Инструкция к практическому занятию: «Количественное определение холестерина в крови и кетоновых тел в моче»
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.14. Исследование биосинтеза жирных кислот, триацилглицеридов и фосфолипидов. Нарушения липидного обмена: ожирение, жировая инфильтрация печени
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников. Обязательная литература.
- •Граф логической структуры задания для самопроверки и самокоррекции содержательного модуля «метаболизм липидов и его регуляция»
- •Тема 1.15. Исследование химического состава желудочного сока. Особенности переваривания белков
- •Конкретные цели: Цели исходного уровня:
- •Содержание обучения
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Обязательная литература
- •Дополнительная литература
- •Задания для самостоятельной аудиторной работы
- •3. 1. Решите задачу
- •Этапы переваривания белков
- •Инструкция к практическому занятию «Химический состав желудочного сока»
- •Обнаружение молочной кислоты в желудочном соке по реакции Уффельмана
- •Ход работы
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.16. Исследование преобразований аминокислот (дезаминирование, трансаминирование, декарбоксилирование)
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников. Обязательная литература
- •Дополнительная литература
- •Задания для самостоятельной аудиторной работы
- •Іі. Завершите схемы приводимых ниже метаболических преобразований
- •Инструкция к практическому занятию: «Определение активности АлАт и АсАт»
- •Определение активности АсАт
- •Определение активности АлАт
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.17. Исследование процессов детоксикации аммиака и биосинтеза мочевины
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие выполнить целевые виды деятельности:
- •Найти материал для освоения этих вопросов можно в одном из следующих источников: Обязательная литература
- •Дополнительная литература
- •Задания для самостоятельной аудиторной работы
- •Задание № 1
- •Задание № 2
- •Задание № 3
- •Задание № 4
- •Инструкция к практическому занятию “Количественное определение мочевины в крови”
- •Ход работы
- •Граф логической структуры
- •Тема 1.18. Специализированные пути обмена отдельных аминокислот. Биосинтез креатина. Нарушения обмена аминокислот
- •Основные теоретические вопросы, позволяющие восполнить целевые виды деятельности
- •Инструкция к лабораторной работе
- •Граф логической структуры
- •Граф логической структуры
Инструкция к практическому занятию
Работа 1. «Исследование термолабильности ферментов»
Принцип работы:
Каталитическая функция – уникальное свойство белков-ферментов, обусловленная их структурными особенностями. Активный центр фермента формируется на высшем структурном уровне белка, является комбинацией радикалов аминокислот в пространстве. Физические факторы могут изменять пространственную конфигурацию полипептидной цепи, следовательно, влиять на каталитическую функцию белков.
Материальное обеспечение: пробирки, 1% раствор крахмала, реактив Люголя, 10% раствор едкого натра (NaOH), 1% раствор сульфата меди (CuSO4)
Ход работы:
В чистую пробирку отливают небольшое количество неразведенной слюны (2-3 мл) и кипятят ее в течение 5-8 мин, после чего охлаждают. В 3 пробирки наливают по 10 капель 1% раствора крахмала. В 1-ю пробирку добавляют 10 капель некипяченой и разведенной в 10 раз слюны, во 2-ю - 10 капель прокипяченной и разведенной в 10 раз слюны, в 3-ю - 10 капель воды в качестве контроля. Все пробирки помещают в термостат при температуре 38°С на 10 мин. После этого содержимое пробирок делят на две части и проводят качественные реакции на крахмал (субстрат) и глюкозу ( конечный продукт расщепления крахмала).
Реакция на крахмал. К 5 каплям исследуемого раствора приливают 1 каплю р-ра Люголя, содержащего йод. В присутствии крахмала появляется синее окрашивание.
Реакция на глюкозу (реакция Троммера). К 5 каплям иследуемой жидкости приливают 5 капель 10% раствора едкого натра и 3 капли 1% раствора сульфата меди. Осторожно кипятят 1 мин до появления красного окрашивания, которое указывает на наличие глюкозы.
Работа 2. «Исследование влияния рН среды на активность ферментов»
Принцип работы:
Высший структурный уровень белка (чаще третичный, либо четвертичный) формируется за счет водородных связей, ионных и гидрофобных взаимодействий радикалов аминокислот. Способность к таким взаимодействиям зависит от степени диссоциации ионогенных групп аминокислот. На последнюю влияет рН среды.
Материальное обеспечение: пробирки, 1% раствор крахмала, реактив Люголя, набор буферных растворов
Ход работы:
Слюну предварительно разводят в 100 раз. Берут 6 пробирок и в каждую наливают по 2 мл буферного раствора с различным значением рН: 6.0, 6,4, 6.8, 7,2, 7,6, 8,0. Затем приливают по 1 мл 1% раствора крахмала и по 1 мл разведенной слюны. Перемешивают содержимое пробирок и термостатируют при 38°С в течение 10 мин. Затем во все пробирки добавляют по 1 капле р-ва Люголя, перемешивают, наблюдают окраску и отмечают рН, при котором амилаза действует наиболее активно.
Работа 3. «Исследование специфичности ферментов»
Принцип работы:
Способность ферментов избирательно превращать определенные субстраты обусловлена комплементарностью между структурой активного центра и субстрата. Это соответствие друг другу по принципу «ключа и замка» связано с набором радикалов аминокислот в активном центре, несущих определенные функциональные группы (-ОН, -SH, -NH3 + , -COO -), поэтому участвующих в связывании и последующем превращении специфических субстратов. Например, амилаза слюны (фермент 1) способна специфически расщеплять крахмал (субстрат1) до декстринов, которые ращепляются затем до мальтозы и глюкозы (продукт 1). Сахараза (фермент 2) расщепляет дисахарид сахарозу (субстрат 2) на глюкозу и фруктозу (продукт 2).
Материальное обеспечение: пробирки, 1% раствор крахмала, 1% раствора сахарозы (тростниковый сахар), р-в Люголя, 10% раствор едкого натра (NaOH), 1% раствор сульфата меди (CuSO4), амилаза, сахараза
Ход выполнения работы:
Для исследования специфичности амилазы (фермент 1) берут слюну, разведенную в 10 раз. Для изучения действия сахаразы (фермент 2) используют профильтрованную вытяжку из дрожжей.
В четыре пронумерованные пробирки согласно таблице последовательно добавляют:
№ про-бирки |
Фермент 1 мл |
Субстрат 1 мл |
Качественная реакция на крахмал с реактивом Люголя |
Качественная реакция на глюкозу - реакция Троммера |
1 |
Амилаза (в разведен- ной слюне) |
1% р-р крахмала |
|
|
2 |
Амилаза (в разведен- ной слюне) |
1% р-р сахарозы (тростниковый сахар) |
|
|
3 |
Сахараза (вытяжка из дрожжей) |
1% р-р крахмала |
|
|
4 |
Сахараза (вытяжка из дрожжей) |
1% р-р сахарозы (тростниковый сахар) |
|
|
Пробирки оставляют на 15-20 мин при 38°С. Затем в 1-й и 3-й проводят качественную реакцию на крахмал, а во 2-й и 4-й - качественную реакцию на глюкозу. Описание качественных реакций см. в работе1. Результаты опытов записывают в таблицу.
ВЫВОДЫ:
Подпись преподавателя:
Приложение 1