
- •Технічна мікробіологія методичні вказівки
- •6.051701 «Харчові технології та інженерія»
- •Технічна мікробіологія методичні вказівки
- •Передмова
- •1 Зміст дисципліни
- •Лекційні теми, їх зміст, обєм в годинах.
- •Лабораторні заняття, назва, зміст, обєм
- •1.3 Схема організації процесу і система контролю роботи студентів денної форми навчання
- •Структура залікового кредиту навчальної дисципліни «Технічна мікробіологія»
- •Структура модулів дисципліни «Технічна мікробіологія»
- •Склад модулів дисципліни «Технічна мікробіологія», розподіл часу на їх засвоєння, термін контролю
- •1.7 Система критеріїв оцінювання знань відповідно до кожного модуля дисципліни
- •2 Тематичний план дисципліни для студентів заочної форми навчання та кількість годин за формами навчального процесу
- •2.1 Контрольна робота (заочна форма навчання)
- •2.2 Вимоги до оформлення контрольної роботи
- •Питання для виконання контрольних робіт
- •3 Запитання для підготовки до модульного контролю та іспиту
- •Загальні правила роботи в мікробіологічній лабораторії. Мікробіологічна лабораторія та її обладнання
- •Основні теоретичні положення
- •Мікроскоп та техніка мікроскопіювання
- •Основні теоретичні положення
- •Методи стерилізації. Принципи приготування середовищ для культивування мікроорганізмів
- •Основні теоретичні положення
- •Реактиви, сировина, матеріали
- •Контрольні запитання
- •Методи роботи з мікроорганізмами
- •Основні теоретичні положення
- •Реактиви, сировина, матеріали
- •Контрольні запитання
- •Дослідження морфології бактерій. Форма клітин
- •Основні теоретичні положення
- •Реактиви, сировина, матеріали
- •Контрольні запитання
- •Дослідження морфології та способів розмноження цвільових грибів Основні теоретичні положення
- •Завдання на виконання
- •Реактиви, сировина, матеріали
- •Контрольні запитання
- •Мікробіологія навколишнього зовнішнього середовища
- •Основні теоретичні положення
- •Хід виконання роботи
- •Хід виконання роботи
- •Хід виконання роботи
- •Контрольні запитання
- •Література
- •Про лабораторні роботи з дисципліни «Технічна мікробіологія»
Хід виконання роботи
Контроль апаратів і устаткування. Тампони можна закріпити на дерев'яних чи металевих стрижнях, кожний окремо опустити в пробірки з 10 см3 води й простерилізувати при 0,1 МПа протягом 20-30 хв. Змиви з великого устаткування й апаратів беруть за допомогою нержавіючих металевих трафаретів з вирізаною серединою (площа вирізу 10, 25 або 100 см2) чи рамки шаблона, виготовленого з дроту.
Перед узяттям проби трафарет змочують спиртом, обпалюють і накладають на досліджувану поверхню. Обмежену площу промивають змоченим тампоном, після чого тампон опускають у ту ж пробірку, занурюють у воду, що залишилася, або фізіологічний розчин і добре перемішують.
Висівають 0,1 см3 змиву на м'ясопептоновий агар. Визначають загальну кількість мікроорганізмів після термостатування при 30 ºС впродовж 48 год. Змив можна використати для визначення слизоутворювальних бактерій (лейконостока) висівом на спеціальні середовища. Залишок змив ної рідини разом з тампонам засівають у пробірки з поплавцями й 5 см3 середовища Кесслер, витримують у термостаті при 37 ºС впродовж 18-24 год. При наявності бродіння пересівають на агаризоване середовище Ендо для ідентифікації кишкової палички. Отримані результати заносять у табл. 7.
Таблиця 7 - Санітарно-мікробіологічний стан предметів навколишнього середовища
Предмети навколишнього середовища |
Бродіння на середовищі Кесслера |
Ріст на середовищі Ендо |
Висновок |
Поверхня робочих столів |
|
|
|
Поверхня стін |
|
|
|
Змив з рук |
|
|
|
Змиви з посуду, інвентарю |
|
|
|
У змивах стерильного устаткування й апаратів мікроорганізми відсутні. У добре вимитих апаратах загальна кількість мікроорганізмів і титр кишкової палички не мають перевищувати їхнього вмісту в чистій воді, що надходить на мийку. Кількість слизоутворювальних бактерій не повинна бути більше 0-5 в 1 см3. Виявлення бактерій групи кишкової палички в змивах - показник незадовільного санітарного стану об'єкта дослідження.
Висновок щодо загальної обнасіненості дають на підставі розрахунків за формулою:
М = n × 10/S
де М - загальна бактеріальна обнасіненість; n - кількість колоній в 1 см3 вихідного розбавлення змиву; 10 - кількість змочуваної рідини, см3; S - площа, з якої зроблений змив, см2.
Контроль чистоти рук і одягу. Чистоту рук перевіряють перед початком виробничого процесу в робітників, що мають безпосередній контакт із продукцією або чистим устаткуванням. Контроль роблять без попередження.
Закріплений на дерев'яному стрижні стерильний тампон змочують стерильною водою (або фізіологічним розчином) і протирають ним долоні, тильну поверхню рук, під нігтями й між пальцями обох рук. Тампон занурюють у ту саму пробірку, у який робили змочування, добре збовтують відбирають 1 см3 і підготовляють розбавлення (1:10 і 1:100).
Для визначення загальної кількості мікроорганізмів в 1 см3 змиву роблять посів розбавлень на мясопептоний агар з наступним термостатуванням при 30 ºС впродовж 48 год. Залишок змиву разом з тампоном висівають у пробірки з 5 см3 середовища Кесслера і вирощують 24 год при температурі 37 ºС. Далі визначають наявність кишкових паличок за методом бродильних проб.
Можна застосувати й такий метод: у складені долонями разом кисті рук нали вають 100 см3 стерильної води так, щоб вода добре промила пальці. Стерильним тампоном протирають долоні й нігті. Воду збирають у стерильну склянку й туди ж кидають тампон. Змивну воду перемішують і роблять аналогічні висіви. Чистоту рук оцінюють за кількістю мікроорганізмів в 1 см3 змиву в разі відсутності кишкових паличок:
Кількість мікроорганізмів в 1 см3 змиву з рук Оцінка чистоти
1000 Відмінно
1000 – 5000 Добре
5000 – 10 000 Задовільно
Понад 100000 Погано
Для взяття змивів з спецодягу протирають тампоном чотири площі по 25 см2 з нижньої частини кожного рукава і передньої частини поверхні спецодягу. Халати, куртки, фартухи, рукавички із тканини періодично досліджують на присутність кишкових паличок посівом 1 см3 змивної води в середовище Кесслера. Кишкові палички на чистому спецодязі відсутні.
Реактиви, сировина, матеріали
Стерильні чашки Петрі з поживним середовищем;
Термостат;
Стерильні ватяні або марлеві тампони;
Пробірки з 10 см3 стерильної води (або фізіологічного розчину);
Стерильні пінцети;
Стерильні піпетки;
Поживні середовища;
Спиртівка або газовий пальник;
Прилад для підрахунку колоній.