- •1. Определить морфологию микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •2. Определить морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •3. Приготовить мазок из агаровой культуры, окрасить по Граму. Определить морфологические и тинкториальные свойства.
- •4. Произвести бактериоскопическое исследование гноя и определить морфологию и тинкториальные свойства имеющихся микроорганизмов.
- •5. Сделать посев исследуемого материала петлей на жидкую и плотную питательные среды.
- •6. Выполнить 1 этап выделения чистой культуры, оценить культуральные свойства по готовым посевам.
- •7. Произвести посев на косой агар с целью выделения чистой культуры микроорганизмов.
- •8. Сделать посев исследуемого материала на чашку с мпа сплошным газоном.
- •9. Сделать посев для определения биохимических свойств выделенной культуры.
- •10. Выполнить 1 этап бактериологического исследования испражнений больного при подозрении на дизентерию.
- •11. Определить вид микроба по антигенным свойствам в реакции агглютинации с адсорбированной агглютинирующей сывороткой.
- •12. Поставить и оценить ориентировочную реакцию агглютинации для определения вида микроба.
- •13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
- •14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.
- •15. Оценить рпга для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).
- •16. Поставить рга для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •17. Поставить ртга для определения типа вируса в аллантоисной жидкости.
- •18. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
- •19. Поставить рпга для определения титра антител в сыворотке больного. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •20. Определить титр антител в ифа по демонстрационному материалу.
- •21. Поставить опыт по определению чувствительности культуры микроорганизмов к антибиотикам методом бумажных дисков. Оценить опыт по демонстрационным посевам.
- •22. Определение мпк (минимальной подавляющей концентрации) антибиотика методом серийных разведений в бульоне (по демонстрационному ряду).
- •23. Среда Эндо.
- •24. Среда Плоскирева.
- •25. Среда Гисса.
14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.
Взять пробирку и осторожно по стенке внести пастеровской пипеткой около 0,5 мл преципитирующей менингококковой сыворотки. Затем аккуратно наслоить на сыворотку такое же количество ликвора так, чтобы ликвор не смешивался с сывороткой, а образовал над ней верхний слой. Пробирку поставить в штатив. При положительном результате сразу на границе обеих жидкостей образуется мутное кольцо преципитации.
15. Оценить рпга для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).
Оценивают результаты РПГА по характеру осадка эритроцитов. Отрицательная реакция – осадок компактный в виде колечка с ровными краями, «пуговица», положительная – характерный кружевной осадок в виде зонтика. Титр токсина – предельное разведение фильтрата, дающее положительный результат.
16. Поставить рга для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
Постановка реакции гемагглютинации для индикации и титрования вируса.
Разведения |
1:5 |
1:10 |
1:20 |
1:40 |
1:80 |
1:160 |
К |
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
|
Физ.раствор |
0,8 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
Аллантоисная жидкость |
0,2 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
- |
Взвесь эритроцитов |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0.4 |
0,4 |
Результат |
|
|
|
|
|
|
|
Заключение: |
Максимальное разведение аллантоисной жидкости, еще дающее гемагглютинацию (осадок в форме зонтика), принимается за титр гемагглютинирующего вируса.
17. Поставить ртга для определения типа вируса в аллантоисной жидкости.
Реакцию ставят по следующей схеме:
Ингредиенты разведения
|
1:10 |
1:20 |
1:40 |
1:80 |
1:160 |
1:320 |
К |
|||||||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
||||||||
Физ. раствор |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
|||||||
Противогриппозная сыворотка А (Н3N2) 1:5 титр сыворотки 1:320 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
|
|||||||
Противогриппозная сыворотка А (H2N2) 1:5 титр сыворотки 1:320 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
|
|||||||
Аллантоисная жидкость 4ГАЕ |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
0,2 |
|||||||
Взвесь эритроцитов |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
0,4 |
|||||||
Термостат 37о С 2 часа |
||||||||||||||
Результат А (Н2N2) |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
Результат А (Н3N2) |
|
|
|
|
|
|
|
|||||||
Заключение: |
Если торможение гемагглютинации (осадок в форме пуговицы или кольца) пройдет до титра диагностической сыворотки или его половины, то вирус соответствует диагностической сыворотке.