- •1. Определить морфологию микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •2. Определить морфологические и тинкториальные свойства микроорганизмов (по готовым мазкам).
- •3. Приготовить мазок из агаровой культуры, окрасить по Граму. Определить морфологические и тинкториальные свойства.
- •4. Произвести бактериоскопическое исследование гноя и определить морфологию и тинкториальные свойства имеющихся микроорганизмов.
- •5. Сделать посев исследуемого материала петлей на жидкую и плотную питательные среды.
- •6. Выполнить 1 этап выделения чистой культуры, оценить культуральные свойства по готовым посевам.
- •7. Произвести посев на косой агар с целью выделения чистой культуры микроорганизмов.
- •8. Сделать посев исследуемого материала на чашку с мпа сплошным газоном.
- •9. Сделать посев для определения биохимических свойств выделенной культуры.
- •10. Выполнить 1 этап бактериологического исследования испражнений больного при подозрении на дизентерию.
- •11. Определить вид микроба по антигенным свойствам в реакции агглютинации с адсорбированной агглютинирующей сывороткой.
- •12. Поставить и оценить ориентировочную реакцию агглютинации для определения вида микроба.
- •13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
- •14. Поставить реакцию преципитации для определения антигена в ликворе больного.
- •15. Оценить рпга для определения наличия столбнячного токсина в фильтрате исследуемого материала (по демонстрационному материалу).
- •16. Поставить рга для индикации и титрования вируса. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •17. Поставить ртга для определения типа вируса в аллантоисной жидкости.
- •18. Оценить ртга в парных сыворотках больного с целью серодиагностики вирусных инфекций.
- •19. Поставить рпга для определения титра антител в сыворотке больного. Оценить реакцию по демонстрационному ряду.
- •20. Определить титр антител в ифа по демонстрационному материалу.
- •21. Поставить опыт по определению чувствительности культуры микроорганизмов к антибиотикам методом бумажных дисков. Оценить опыт по демонстрационным посевам.
- •22. Определение мпк (минимальной подавляющей концентрации) антибиотика методом серийных разведений в бульоне (по демонстрационному ряду).
- •23. Среда Эндо.
- •24. Среда Плоскирева.
- •25. Среда Гисса.
9. Сделать посев для определения биохимических свойств выделенной культуры.
Чистую культуру с косого агара засевают петлей в среды «пестрого» ряда (пептонная вода, 1% раствор глюкозы, лактозы, сахарозы, маннита, мальтозы, индикатор Андреде и поплавок для улавливания газа) и МПБ. Для этого стерилизуют бактериологическую петлю (до покраснения) в пламени спиртовки. В левой руке держат 2 пробирки (первая - косой агар с чистой культурой, вторая - с одной из питательных сред). Вынимают пробки из пробирок мизинцем и ладонной поверхностью кисти над пламенем горелки. Петлю опускают в пробирку с культурой, после ее остывания берут исследуемую культуру методом соскоба, извлекают из пробирки, вносят поочередно в среды «пестрого» ряда и МПБ. В среду с МПБ после посева культуры помещают индикаторные бумажки, смоченные щавелевой кислотой для выявления индола и раствором уксуснокислого свинца для выявления сероводорода, и закрепляют их у пробки.
10. Выполнить 1 этап бактериологического исследования испражнений больного при подозрении на дизентерию.
Произвести посев испражнений петлей в чашку Петри с питательной средой Плоскирева (технику посева и состав среды см. в вопросах №№6 и 24).
11. Определить вид микроба по антигенным свойствам в реакции агглютинации с адсорбированной агглютинирующей сывороткой.
Предметное стекло делят восковым карандашом пополам. На одну половину наносят каплю изотонического раствора хлорида натрия (контроль), а на другую – каплю сыворотки. Затем петлей в каждую каплю вносят небольшое количество бактериальной культуры и перемешивают круговыми движениями в каждой капле до получения равномерной взвеси. Реакция протекает быстро. Наблюдают за появлением зерен агглютинации в пробах. Учет производят через 3-5 мин.
12. Поставить и оценить ориентировочную реакцию агглютинации для определения вида микроба.
Берут предметное стекло, делят стеклографом на две части: опытную (о) и контрольную (к). На опытную часть пастеровской пипеткой наносят каплю агглютинирующей сыворотки в разведении 1:5, на контрольную – каплю физиологического раствора. Затем в каждой капле тщательно размешивают небольшое количество культуры бактерий до получения гомогенной взвеси. Бактерии вносят прокаленной и остуженной бактериальной петлей. Петля стерилизуется после каждой капли. Результат наблюдают через 1-2 мин. Контрольная капля остается равномерно мутной. В опытной капле в положительном случае наблюдается склеивание бактерий в виде мелких зернышек.
После учета реакции предметное стекло опускают в стакан с дезинфицирующим раствором.
13. Оценить результаты рск с целью определения антител в сыворотке больного по демонстрационному ряду.
Взять ряд пробирок с разведениями сыворотки больного: 1:10, 1:20, 1:40, 1:80, 1:160, 1:320, 1:640 и контролями гемолитической системы, антигена и комплемента.
Учет начать с контрольных пробирок. В пробирке контроля гемолитической системы выявить отсутствие гемолиза, в контролях антигена и комплемента – гемолиз. В опытных пробирках определить отсутствие или наличие гемолиза.
При отсутствие гемолиза РСК положительная. При наличии гемолиза РСК отрицательная. В положительном случае дать заключение о наличии в сыворотке больного специфических антител и определить их титр, т.е. наибольшее разведение сыворотки больного, при котором отсутствует гемолиз.