Ход занятия

• Контроль исходного уровня знаний

1. Правила работы на спектрофотометре, фотоэлектроколориметре и флуориметре.

2. Основные требования, предъявляемые к методам количественного определения токсических веществ в биологических жидкостях.

3. Применение физико-химических методов в химико-токсикологическом анализе.

• Лабораторная работа

Методика фотометрического определения папаверина (аминазина) в биожидкостях

В пенициллиновый флакон с анализируемой пробой прибавляют 10 мл воды очищенной, перемешивают. Фильтруют в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1 мл 0,1% раствора поливинилового спирта (ПВС), 1 мл 0,07% раствора эозина, 2 мл 0,01 М раствора серной кислоты и доводят водой до метки. Параллельно готовят раствор сравнения, содержащий все реактивы за исключением определяемых соединений.

Для приготовления раствора стандартного образца в мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 2 мл стандартного раствора папаверина (аминазина) - 10 мкг/мл, прибавляют вышеуказанные реактивы и доводят водой до метки. Измеряют оптическую плотность раствора на ФЭКе при длине волны 540 нм, в кювете с толщиной слоя 2 см относительно раствора сравнения. Концентрацию папаверина (аминазина) в мкг/мл рассчитывают по формуле:

где А_Х – оптическая плотность анализируемого раствора;

где А_СТ – оптическая плотность стандартного раствора.

Методика количественного определения хинина в биожидкостях

В пенициллиновый флакон с анализируемой пробой прибавляют 10 мл 0,01 М раствора серной кислоты, встряхивают 5 минут и фильтруют в пенициллиновый флакон. В качестве стандарта используют раствор хинина с концентрацией 1 мкг/мл. Измеряют интенсивность флуоресценции анализируемого и стандартного растворов. Концентрацию хинина в мкг/мл в анализируемой биожидкости рассчитывают по формуле:

где I_Х – интенсивность флуоресценции анализируемого раствора;

где I_СТ - интенсивность флуоресценции стандартного раствора.

Методика спектрофотометрического определения производных барбитуровой кислоты в биожидкостях

В пенициллиновый флакон с анализируемой пробой прибавляют 10 мл воды очищенной. Встряхивают 5 минут. Фильтруют в пенициллиновый флакон. В кювету спектрофотометра с толщиной слоя 1 см помещают фильтрат и добавляют 3 капли 0,2 М раствора серной кислоты. Перемешивают. Измеряют оптическую плотность раствора при 240 нм. В качестве раствора сравнения используют воду очищенную. Затем в кювету с анализируемым раствором прибавляют 3 капли 30% спиртового раствора NaOH, перемешивают и измеряют оптическую плотность. В качестве раствора сравнения используют воду очищенную. Аналогично измеряют оптическую плотность стандартного раствора барбитала с концентрацией 10 мкг/мл. Концентрацию барбитуратов (мкг/мл) в анализируемой биологической жидкости рассчитывают по формуле:

где и - оптические плотности анализируемого раствора в щелочной и кислой средах;

где и - оптические плотности стандартного раствора в щелочной и кислой средах;

Литература: [4].

ЗАНЯТИЕ №13. Изолирование, обнаружение, количественное определение и метаболизм пестицидов

Цель занятия: изучить методы химико-токсикологического анализа и основные пути метаболизма некоторых ядохимикатов.