Иммуноэлектрофорез и иммуноблоттинг

Иммуноэлектрофорез

Помогает идентифицировать антигены по

электрофоретической подвижности, особенно в

том случае, когда в образце присутствуют и

другие антигены. С помощью данного метода в

клинической иммунологии полуколичественно

определяют концентрацию иммуноглобулинов и

идентифицируют миеломные белки.

Встречный иммуноэлектрофорез Ракетный электрофорез

Иммуноблоттинг

После разделения сложной смеси белков методом электрофореза в полиакриламидном

или агарозном геле их можно перенести из геля на микропористую нитроцеллюлозную

мембрану. Далее неспецифически связанные с

мембраной антигены могут быть идентифицированы с помощью меченых антител. Данный метод получил широкое распространение. Например, он используется для идентификации компонентов нейрофиламентов, которые предварительно разделяют в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (ДСН).

Иммуногистохимия, иммуноцитохимия

Определение

ИГХ – комплекс методов, позволяющих

выявлять (визуализировать)

определенные антигены в составе естественного клеточного или

тканевого микроокружения в норме и при патологии.

ИГХ основана на твердофазном ИФА, который проводится in situ, т.е. на

гистологических срезах

(иммуногистохимия) или мазках, цитопрепаратах (иммуноцитохимия).

Образующийся нерастворимый окрашенный продукт локализуется в

История метода

1941 г. группа исследователей под

руководством Альберта Кунса впервые

получила меченные флюоресцеином антитела и применила их в диагностических целях.

1970 г. - Sternberger и соавторы разработали

пероксидаза-антипероксидазный метод.

1975 г. - G. Köhler и C. Milstein разработали гибридомную технологию

1984 г. - авторы были удостоены нобелевской премии «за открытие принципа синтеза моноклональных антител»