Добавил:
ilirea@mail.ru Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Презентации (др) / Современные методы иммунодиагностики СПМБН.ppt
Скачиваний:
310
Добавлен:
23.08.2018
Размер:
16.7 Mб
Скачать

Современныеметоды иммунодиагностики

Профессор Бажукова Т.А.

зав.каф.микробиологии, вирусологии и иммунологии

Современные методы иммунодиагностики

В иммунологии применяется целый ряд экспериментальных методов из других

областей биологии. Выделение антигенов и антител производят с помощью биохимических методов фракционирования белков.

Гены иммунологически важных молекул секвенируют обычными молекулярно-

генетическими методами. В иммунологии разработаны и свои специальные методы исследования, основанные на взаимодействии антиген –

антитело.

В современной практике клинико- иммунологических исследований

основным объектом анализа является кровь – как ее клеточные компоненты, так и сыворотка.

В настоящее время в поле

вниманияиммунологов наряду с мононуклерной фракцией все чаще оказывается фракция

гранулоцитов.

Цитофлуориметрический

анализ

Современный цитометр -это сложнейший лазерный прибор,

управляемый компьютером,

позволяющий оценить распределения интересующих

нас молекул на мембране заданного типа клеток.

Результаты компьютерного анализа

выражаются в виде одно- и двухпараметрических

гистограмм, отражающих распределение клеток по интенсивности свечения одного или двух флуорохромов. Результаты выражают в процентах меченых клеток и средней интенсивностью свечения.

Трехмерная диаграмма

s-размеры; n-

количество; f- флюоресценция

При лабораторной оценке

нарушений естественного

иммунитета определяют

фагоцитарную активность или

генерацию метаболически

активных радикалов и оценивают состояние системы

комплемента.

Определение показателей фагоцитоза

фагоцитоз частиц латекса, меченных флуорохромом, дает возможность регистрировать результаты цитофлуориметрически

метод оценки активности фагоцитирующих клеток по восстановлению нитросинего тетразолия

люминесцентные методы регистрации образования метаболически активных форм кислорода и свободных радикалов методами регистрации хемилюминесценции, усиливаемой люминофорами (люминолом и люцигенином)

Выделение популяций лимфоцитов

Центрифугирование в градиенте

плотности.

Основано на том, что лимфоциты

имеют меньшую плотность, чем эритроциты и гранулоциты

Розеткообразование и пэннинг используют для выделения субпопуляций лимфоцитов