- •Исследования кала при дисбактериозе и кишечных инфекциях
- ••Организм человека густо заселен микробами. Больше всего микробов обитает в толстом кишечнике человека
- •Показатели нормальной микрофлоры
- •Биотоп
- •Нормальная микрофлора кишечника
- •Дисбактериоз
- •Причины, приводящие к
- •Стадии дисбактериоза
- •Показания к проведению микробиологического исследования кала
- ••У детей первого года жизни показаниями к проведению исследования кала на микробиоценоз дополнительно
- •Правила сбора кала на дисбактериоз
- •Уноворожденных:
- •Удетей и взрослых
- •Условия, соблюдение
- •методы диагностики дисбактериоза кишечника:
- •кишечника
- •Для подтверждения
- ••Лабораторная диагностика дисбактериоза чаще всего базируется на микробиологическом анализе кала. Микробиологическими критериями служат
- •При дисбактериозе нарушается нормальное соотношение между анаэробной и аэробной микрофлорой
- •Микробиологическе критерии дисбактериоза
- •Острые кишечные инфекции
- •Этиология ОКИ
- •Вирусные кишечные инфекции
- •Реовирусная ОКИ
- •Риновирус
- •Энтеровирус 69-71
- •Ротовирус
- •Норовирус
- ••Для выявления норовируса в кале больных широко используется метод ПЦР, обладающий высокой чувствительностью.
- ••Альтернативой ИФА являются
- •Принцип работы иммунохроматографического экспресс-теста.
- ••Схема работы иммунохроматографического экспресс-теста (на
- ••Положительный результат экспресс-теста RIDA Quick Verotoxin / О157 Combi
- •Острые бактериальные кишечные инфекции
- ••Семейство Enterobacteriaceae
- ••Представители семейства являются грамотрицательными палочками размером 1-5x0,4-0,8 мкм. Спор
- ••Дифференциация представителей семейства Enterobacteriaceae на среде Клиглера: 1 - среда до посева; 2
- •• Представители родов Escherichia, Salmonella, Shigella являются возбудителями острых кишечных инфекций, энтеропатогенные иерсинии
- •Эшерихии (род Escherichia)
- ••Микробиологическая диагностика
- •Клебсиеллы (род
- ••Микробиологическая диагностика.
- •Шигеллы (род Shigella)
- ••Микробиологическая диагностика. Основным методом является бактериологический, материалом для исследования служат испражнения.
- •Сальмонеллы (род
- ••Биохимические свойства. Обладают выраженной биохимической активностью. Основные биохимические свойства, необходимые для идентификации:
- ••Сальмонеллез - острая кишечная зоонозная инфекция, вызываемая различными сероварами S. enterica, за исключением
- •Протеи (род Proteus)
- ••Обладают выраженной биохимической активностью. Являются гнилостными микроорганизмами, способными окислять белки до α-кетокислот и
- ••Микробиологическая диагностика.
- •Иерсинии (род Yersinia)
- •Возбудитель холеры (Vibrio cholerae)
- ••Морфология. Холерный вибрион - грамотрицательная палочка в форме запятой, длиной 2-4 мкм, толщиной
- ••Биохимические свойства. Биохимически активен. Оксидазоположителен. Обладает протеолитическими и сахаролитическими свойствами: продуцирует индол, лизиндекарбоксилазу,
- ••Микробиологическая диагностика. Основу микробиологической диагностики составляют выделение и идентификация возбудителя. Материалом для исследования
- •Протозойные кишечные инфекции
- ••Микробиологическая диагностика.
- •Лямблии, или жиардии (род Lamblia, или Giardia)
- ••Giardia lamblia. Вегетативные формы: а - спереди; б - сбоку; в, г -
- ••Микробиологическая диагностика. В мазках из кала выявляют цисты (окраска раствором Люголя). При диарее
- •Балантидии (род Balantidium)
- ••Характеристика возбудителя. Паразит распространен широко, являясь обитателем кишечника свиней (основной источник инвазии), обезьян,
- ••Микробиологическая диагностика. Для микроскопии каплю свежего жидкого кала помещают в изотонический раствор хлорида
- •Спасибо за внимание!
Иерсинии (род Yersinia)
•Род Yersinia включает 11 видов, из которых в патологии человека основное значение имеют 3 вида: возбудитель чумы Y. pestis и энтеропатогенные иерсинии, возбудитель псевдотуберкулеза Y. pseudo- tuberculosis и возбудитель кишечного иерсиниоза Y. enterocolitica.
•Возбудители псевдотуберкулеза - Y. pseudotuberculosis и кишечного иерсиниоза - Y. enterocolotoca являются энтеропатогенными иерсиниями.
•Кишечный иерсиниоз - инфекционное заболевание с поражением тонкой и толстой кишки и развитием мезентериального лимфаденита.
•Возбудитель кишечного иерсиниоза - Yersinia enterocolitica - Обладает выраженной биохимической активностью. Внутри вида по спектру биохимической активности (индолообразование, утилизация эскулина, реакция Фогеса-Проскауэра) подразделяется на 5 хемоваров. В отличие от Y. pseudotuberculosis, ферментирует сахарозу, продуцирует ортнитиндекарбоксилазу, не ферментирует рамнозу.
•По строению О-антигена подразделяется более чем на 70 сероваров. Наиболее часто заболевание у человека вызывают серовары
•О3, О5, О9, О8.
•Кишечный иерсиниоз - инфекционное заболевание с поражением тонкой и толстой кишки и развитием мезентериального лимфаденита.
Возбудитель холеры (Vibrio cholerae)
•Холера - острая инфекционная болезнь, характеризующаяся поражением тонкой кишки, нарушением водно- солевого обмена и интоксикацией. Это особо опасная карантинная инфекция. Возбудителем холеры являются представители вида Vibrio cholerae серогрупп О1 и О139.
•Возбудители холеры относятся к роду
Vibrio, семейства Vibrionaceae.
•Морфология. Холерный вибрион - грамотрицательная палочка в форме запятой, длиной 2-4 мкм, толщиной 0,5 мкм. Не образует спор и капсулы, монотрих, чрезвычайно подвижен.
•Культуральные свойства. Является факультативным анаэробом, но предпочитает аэробные условия роста, поэтому на поверхности жидкой питательной среды образует пленку. Холерный вибрион неприхотлив в росте и может расти на простых средах. Оптимальная температура роста 37 ?С и рН 8,5-9,0. Для оптимального роста требует присутствия в среде 0,5% натрия хлорида. Средой накопления является 1% щелочная пептонная вода, на которой он образует пленку в течение 6-8 ч. Элективной средой является TCBS-среда (тиосульфат- цитратный сахарозо-желчесодержащий агар), на котором образует колонии желтого цвета. Щелочной агар и триптонсоевый агар (ТСА) используют субкультивирования.
•Биохимические свойства. Биохимически активен. Оксидазоположителен. Обладает протеолитическими и сахаролитическими свойствами: продуцирует индол, лизиндекарбоксилазу, разжижает в воронковидной форме желатин, сероводород не продуцирует. Ферментирует глюкозу, сахарозу, маннозу, крахмал, лактозу (мед- ленно). Не сбраживает рамнозу, арабинозу, дульцит, инозит, инулин. Обладает нитратредуктазной активностью.
•Холерные вибрионы различаются по чувствительности к бактериофагам. Классический холерный вибрион лизируется бактериофагами IV группы по Mukerjee, вибрион биовара Эль-Тор - бактериофагами V группы. Дифференциация среди биоваров возбудителей холеры проводится по биохимическим свойствам, а также по способности гемолизировать эритроциты барана, агглютинировать куриные эритроциты; чувствительности к полимиксину и чувствительности к бактериофагам. Биовар El-Tor резистентен к полимиксину, агглютинирует куриные эритроциты и гемолизирует эритроциты барана, дает положительный результат в реакции Фогеса-Проскауэра и гексаминовом тесте. V. diolerae О139 по фенотипическим признакам относится к биовару El- Tor.
•Микробиологическая диагностика. Основу микробиологической диагностики составляют выделение и идентификация возбудителя. Материалом для исследования служат испражнения, рвотные массы, пищевые продукты, вода, гидробионты, смывы с объектов окружающей среды. Материал засевается на элективную питательную среду, TCBS-агар с последующим субкультивированием на неселективных средах и идентификацией по антигенной структуре и биохимическим свойствам. Дополнительно факультативно можно сделать посев и на щелочную пептонную воду с последующим субкультивированием на TCBS-агаре. Для экспресс-диагностики используют РИФ и ПЦР.
Протозойные кишечные инфекции
•Возбудитель амебиаза (Entamoeba histolytica)
•Морфология. Различают три формы дизентерийной амебы: малую вегетативную, большую вегетативную и цистную (рис. 19.1). Малая вегетативная (просветная) форма Entamoeba histolytica forma minuta имеет размер 15-20 мкм, малоподвижна, обитает в просвете верхнего отдела толстой кишки как безвредный комменсал, питаясь бактериями и детритом. Большая вегетативная форма Entamoeba histolytica forma magna
(патогенная, тканевая форма размером около 30 мкм) образуется из малой вегетативной формы, имеет псевдоподии, обладает толчкообразным поступательным движением, может фагоцитировать эритроциты. Обнаруживается в свежих испражнениях при амебиазе. Цистная форма (покоящаяся стадия) представлена цистой диаметром 9-16 мкм. Зрелая циста содержит 4 ядра (у непатогенной Entamoeba coli циста содержит 8 ядер).
•Амебиаз - антропонозная болезнь, вызванная амебой Entamoeba histolytica, сопровождающаяся (в клинически выраженных случаях) язвенным поражением толстой кишки, частым жидким стулом, тенезмами и дегидратацией (амебная дизентерия), а также развитием абсцессов в различных органах.
•Микробиологическая диагностика.
Основным методом является микроскопическое исследование испражнений больного, а также содержимого абсцессов внутренних органов. Мазки окрашивают раствором Люголя или гематоксилином. E. histolytica дифференцируют по цистам и трофозоитам от других кишечных простей-
•ших типа E. coli, E. hartmanni, E. polecki, E. gingivalis, Endolimax nana, Iodamoeba buetschlii
и др. Антитела к возбудителю выявляют в РНГА, ИФА, непрямой РИФ, РСК и др. Наиболее высокий титр антител в сыворотке крови выявляют при внекишечном амебиазе. Молекулярно-биологический метод (ПЦР) позволяет определять в фекалиях маркерные участки ДНК Е. histolytica.
Лямблии, или жиардии (род Lamblia, или Giardia)
•Лямблиоз (жиардиоз) - болезнь, вызванная Lamblia intestinalis (Giardia lamblia), протекающая в латентной или манифестной форме в виде дисфункции кишечника с явлениями энтерита. Возбудитель открыт Д.Ф. Лямблем в 1859 г. В 1915 г. он отнесен к роду Giardia в честь Жиара.
•Характеристика возбудителя. Вегетативная клетка лямблий плоская грушевидной формы (5-10x9-20 мкм), содержит два ядра (рис. 19.4) и 4 пары жгутиков.
Лямблии размножаются путем продольного деления. Они прикрепляются к эпителиоцитам кишечника с помощью присасывательного диска и за счет адгезии микровыростов плазмолеммы трофозоита. Обитают лямблии в верхних отделах кишечника, а в менее благоприятных нижних отделах кишечника образуют овальные четырехядерные цисты (6-10x12- 14 мкм), окруженные толстой двухконтурной оболочкой.
•Giardia lamblia. Вегетативные формы: а - спереди; б - сбоку; в, г - цисты