Способы фиксации мазков из микробов и смешанного материала
Самым распространённым методом фиксации бактерий считается обработка жаром, что осуществляется путём трёхкратного проведения препарата мазком вверх над пламенем спиртовки или газовой горелки. Препарат находится в пламени спиртовки не более 3 сек. Для проверки надежности фиксации свободную от мазка поверхность предметного стекла прикладывают к тыльной стороне левой кисти. При правильном фиксировании стекло должно быть горячим, но не вызывать ощущений ожога. После чего препараты из бактерий окрашиваются разными способами. Метод применим при работе с чистой культурой микробов.
Фиксация химическими веществами используется для выявления и дифференциации структурных элементов: жгутиков, протоплазмы, нуклеоида, оболочки, при работе со смешанным материалом (кровь, отпечатки органов, соскобы со слизистых, гной, мокрота).
В качестве фиксаторов используют:
- метиловый спирт (фиксируют 5 минут),
- этиловый спирт 96% (фиксируют 10 - 20 минут),
- смесь Никифорова: равные объёмы спирта и эфира (фиксируют 10 - 20 минут),
- спирт - формол: смесь 5мл неразведённого формалина мл и 96 % этилового спирта – 95 мл (фиксируют 15 минут),
- жидкость Буэна (Bouin, 1898): неразбавленный формалин 10 мл, ледяная уксусная кислота 2 мл, насыщенный водный раствор пикриновой кислоты 30 мл (фиксируют 5 - 10 минут),
- ацетон (фиксируют 5 минут),
- жидкость Карнуа (Karnoy) - ледяная уксусная кислота 10 мл, хлороформ 30 мл и 96 % спирт 60 мл (фиксируют 10-15 минут). Жидкость Карнуа является прекрасным фиксатором, в особенности для изучения тонкого строения бактерий. Жидкость Карнуа нельзя применять для фиксации мазков крови и отпечатков внутренних органов, так как она вызывает полный гемолиз эритроцитов.
Существует два метода химической фиксации мазков:
-
Предметное стекло с высушенным мазком погружают в банку с фиксатором, высушивают на воздухе и микроскопируют.
-
На горизонтально установленные предметные стекла с мазками наносят по капле фиксатор и дают высохнуть.
Время фиксации зависит от применяемых в качестве фиксаторов веществ.