23Реакция гемагглютинации (прямая, непрямая), реакция торможения гемагглютинации, их диагностическое значение при инфекциях.

Реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации (РНГА, РПГА) основана на использова¬нии эритроцитов (или латекса) с адсорбиро¬ванными на их поверхности антигенами или антителами, взаимодействие которых с соот¬ветствующими антителами или антигенами сыворотки крови больных вызывает склеива¬ние и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка.

Компоненты. Для постанов¬ки РНГА могут быть использованы эритроциты барана, лошади, кролика, курицы, мыши, человека и другие, которые заготавли¬вают впрок, обрабатывая формалином или глютаральдегидом. Ад¬сорбционная емкость эритроцитов увеличивается при обработке их растворами танина или хлорида хрома.

Антигенами в РНГА могут служить полисахаридные АГ микро¬организмов, экстракты бактериальных вакцин, АГ вирусов и риккетсий, а также другие вещества.

Эритроциты, сенсибилизированные АГ, называются эритроцитарными диагностикумами. Для приготовления эритроцитарного диагностикума чаще всего используют эритроциты барана, обла-дающие высокой адсорбирующей активностью.

Применение. РНГА применяют для диагностики инфекционных болезней, определения гонадотропного гор¬мона в моче при установлении беременности, для выявления повышенной чувствительнос¬ти к лекарственным препаратам, гормонам и в некоторых других случаях.

Механизм. Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА) отличается значительно более высокой чувствительностью и специфич¬ностью, чем реакция агглютинации. Ее используют для иденти-фикации возбудителя по его антигенной структуре или для индикации и идентификации бактериальных продуктов — токси¬нов в исследуемом патологическом материале. Соответственно используют стандартные (коммерческие) эритроцитарные анти¬тельные диагностикумы, полученные путем адсорбции специфи¬ческих антител на поверхности танизированных (обработанных танином) эритроцитов. В лунках пластмассовых пластин готовят последовательные разведения исследуемого материала. Затем в каждую лунку вносят одинаковый объем 3 % суспензии на¬груженных антителами эритроцитов. При необходимости реакцию ставят параллельно в нескольких рядах лунок с эритроцитами, нагруженными антителами разной групповой специфичности.

Через 2 ч инкубации при 37 °С учитывают результаты, оценивая внешний вид осадка эритроцитов (без встряхивания): при отри¬цательной реакции появляется осадок в виде компактного.диска или кольца на дне лунки, при положительной реакции — харак¬терный кружевной осадок эритроцитов, тонкая пленка с неров¬ными краями

24 Реакция гемадсорбции и реакция торможения гемадсорбции, их диагностическое значение при вирусных инфекциях.

Гемадсорбция - процесс адсорбции эритроцитов на поверхности инфицированных вирусами клеток. Наблюдается в основном у вирусов, вирионы к-рых после образования выходят из клетки путем почкования, напр., у орто- и парамиксовирусов. Проводят для индикации вируса на чувствительной к нему к-ре клеток. Наблюдаются различия в типе адсорбции (диффузный, очаговый), виде сорбируемых эритроцитов (человека, обезьян, морской свинки и др.), температуре, при к-рой протекает реакция (37°С , 0°С), наличии элюции (есть, нет). Г. может быть заторможена предварительной инкубацией инфицированной вирусом к-ры клеток со специфической к вирусу антисывороткой. Реакцию торможения Г. используют для идентификации вирусов.