Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:
Приказ Минздрава рф от 21 марта 2003 г. N 109 О совершенствовании противотуберкулезных мероприятий в Российской Федерации.doc
Скачиваний:
448
Добавлен:
24.03.2016
Размер:
2.34 Mб
Скачать

Никогда не вливайте воду в кислоту!

Хранить полученную смесь в герметически закрытой бутыли из темного стекла в холодильнике.

Раствор 3. Раствор сульфаниламида (0,2%).

Сульфаниламид 0,2 г

Дистиллированная вода 100 мл

Растворить сульфаниламид в дистиллированной воде. Хранить полученную смесь в герметически закрытой бутыли из темного стекла в холодильнике.

Раствор 4. Раствор N-нафтилэтилендиамина (0,1%).

N-нафтилэтилендиамин 0,1 г

Дистиллированная вода 100 мл

Растворить нафтилэтилендиамин в дистиллированной воде. Хранить полученную смесь в герметически закрытой бутыли из темного стекла в холодильнике.

Контроль реактивов

Перед выполнением теста необходимо проконтролировать пригодность реактивов:

отрицательный контроль - тест с экстрактом из пробирки с незасеянной средой;

положительный контроль - тест с экстрактом референс-штамма M.tuberculosis H37Rv.

Процедура выполнения классического теста

┌───────────────────────────────────────────────────────────────────────┐

│ Внести 0,2 мл стерильного изотонического раствора хлорида натрия в │

│ пробирку с завинчивающейся крышкой; │

└─────────────────────────────────┬─────────────────────────────────────┘

┌─────────────────────────────────┴─────────────────────────────────────┐

│ С помощью стерильной бактериологической петли или лопатки │

│ суспендировать в этом растворе четырехнедельную культуру │

│ микобактерий (использовать две лопатки биомассы бактерий); │

└─────────────────────────────────┬─────────────────────────────────────┘

┌─────────────────────────────────┴─────────────────────────────────────┐

│ Добавить 2 мл раствора 1 (раствор нитрата натрия в буфере); │

└─────────────────────────────────┬─────────────────────────────────────┘

┌─────────────────────────────────┴─────────────────────────────────────┐

│ Хорошо встряхнуть и оставить на 3 часа в водяной бане при │

│ температуре 37°С; │

└─────────────────────────────────┬─────────────────────────────────────┘

┌─────────────────────────────────┴─────────────────────────────────────┐

│ Добавить в следующем порядке: 1 каплю разведенной соляной кислоты │

│ (раствор 2), хорошо встряхнуть пробирку; 2 капли 0,2% раствора │

│ сульфаниламида (раствор 3); 2 капли 0,1% раствора │

│ N-нафтилэтилендиамина (раствор 4); │

└─────────────────────────────────┬─────────────────────────────────────┘

┌─────────────────────────────────┴─────────────────────────────────────┐

│ Немедленно проконтролировать появление розового или красного │

│ окрашивания, сравнив его интенсивность с цветовым стандартом. │

└───────────────────────────────────────────────────────────────────────┘