- •Лабораторная диагностика сифилиса Микроскопическое исследование на бледную трепонему
- •Неспецифическая серологическая диагностика сифилиса Микрореакция преципитации с кардиолипиновым антигеном (рмп)
- •Диагностические подтверждающие серологические реакции
- •Иммуноферментный анализ для серо- и ликвородиагностики сифилиса
- •Реакция иммунофлюоресценции для специфической серо- и ликвородиагностики сифилиса
- •Исследование спинномозговой жидкости
- •Реакция связывания комплемента (реакция Вассермана)
- •Метод иммуноблотинга
- •Полимеразная цепная реакция (пцр)
- •Лечение сифилиса
- •Альтернативные препараты
Реакция иммунофлюоресценции для специфической серо- и ликвородиагностики сифилиса
Принцип: специфический комплекс антиген-антитело + иммунная анти- видовая сыворотка, меченная флюорохромом, и выявление с помощью люминесцентного микроскопа.
В качестве антигена используют взвесь патогенных бледных трепонем штамма Никольса из 7-суточного орхита кролика. Здоровых кроликов - самцов заражают интратестикулярно и при возникновении орхита извлекают из яичек Т. pallidum.
С одним и тем же антигеном реакция может ставиться в течение 2-4 месяцев.
В настоящее время применяется РИФ-абс, РИФ-200 (испытуемые сыворотки крови разводят в 200 раз фосфатным буфером).
В связи с возможностью получения отрицательных результатов при наличии флюоресцирующих антител не следует исследовать кровь и сыворотку крови в РИФ-абс и РИФ-200 во время лечения больных пенициллином.
Ложноположительные результаты отмечали у беременных, алкоголиков, больных ревматоидным артритом, системной и дискоидной красной волчанкой, склеродермией, циррозом печени.
Принцип: сыворотка крови, содержащая специфические антитела + эритроциты, сенсибилизированные соответствующим антигеном = характерная агглютинация.
Общее мнение исследователей заключается в том, что РПГА является ценным диагностическим тестом при всех формах сифилиса, но особенно чувствительна она при поздних формах заболевания. Реакция становится положительной на 3 неделе после заражения и остается таковой спустя много лет после выздоровления.
Результаты РПГА учитывают через 1,5-2 ч при микрометоде или на следующий день при макрометоде. Неподвижно стоящие пластины даже при высыхании их содержимого сохраняют полученную картину:
"4+" - положительная РПГА. Эритроциты равномерно выстилают всю поверхность лунки (в виде зонтика).
"3+" - положительная РПГА. Эритроциты выстилают всю поверхность лунки, но часть их соскальзывает к центру.
"2+" - слабоположительная РПГА. Эритроциты образуют пленку на небольшом участке нижней части лунки.
"1+" - отрицательный результат РПГА. На дне лунки эритроциты образуют рыхлый осадок.
отрицательная РПГА. Эритроциты ровным плотным "колечком" или "пуговкой" лежат на самом дне лунки (без окружающего зернистого осаждения).
Ложноположительные результаты могут быть получены при исследовании сывороток крови пациентов с невенерическими трепонематозами, за счет ревматоидного фактора и перекрестно реагирующих с трепонемным антигеном антител, образующихся при различных системных или индуцированных лекарствами и наркотиками нарушениях обмена, из-за аномального уровня иммуноглобулинов;у новорожденных детей - за счет образования в организме плода или ребенка IgM-антител к IgG матери, что осложняет трактовку результатов и диагностику врожденного сифилиса.
Ложноотрицательные результаты реакции могут быть обусловлены конкуренцией между IgM- и IgG-антителами.
Исследование спинномозговой жидкости
Ликвородиагностика важна для постановки диагноза нейросифилис и для определения излеченности больного сифилисом. Для определения специфических сифилитических изменений спинномозговой жидкости рекомендуются следующие тесты:
определение общего содержания белка,
подсчет форменных элементов,
глобулиновые реакции, -ИФА
коллоидная реакция с хлорным золотом (реакция Ланге),
-РИФ.
По своей диагностической эффективности при ликвородиагностике сифилиса ИФА близок к РИФ-ц, самой чувствительной и специфичной реакции при диагностике нейросифилиса.