Значение Km
2. Km – важная количественная характеристика фермента, определяет с каким [S] будет наиболее эффективно он связываться
[V] Vmax
1 Vmax
2
Km
[V]
Vmax
1 Vmax
2
Km
ЛДГ1
[ЛАКТАТ]
ЛДГ1
[ПИРУВАТ]
Значение Km
3.Позволяет определить вид ингибирования фермента
4.Показывает сродство апофермента и кофактора
[V]
12 vmax
Km |
[Ko] |
Определение Km
1 v
1
vmax
1 |
|
1 |
|
|
[s] |
||
Km |
|||
График Лайнувера – Берка. |
|||
|
|
||
Влияние температуры
V |
Максимальная |
Оптимум t [E] |
|||
каталитическая |
|||||
Мкмоль/мин |
|
||||
активность |
|
||||
|
|
||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
0 |
10 |
20 |
30 |
40 |
50 |
60 |
t, С |
|
Влияние рН
V
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
pH |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
||
1 |
2 |
3 |
4 |
5 |
6 |
7 |
8 |
9 |
10 |
11 |
12 |
||||||||||||||
|
|||||||||||||||||||||||||
|
|
Пепсин |
|
|
|
|
|
|
|
Трипсин |
|
|
Щелочная фосфатаза |
|
|||||||||||
Фермент |
Оптимальное значение pH |
Пепсин |
1,5 – 2 |
Пируваткарбоксилаза |
4,8 |
Каталаза |
6,8 – 7 |
Фумараза |
6,5 |
Уреаза |
6,8 – 7,2 |
Карбоксипептидаза |
7,5 |
Трипсин |
6,5 – 7,5 |
Аргиназа |
9,5 – 9,9 |
Влияние низкомолекулярных продуктов
Активаторы |
Ингибиторы |
Активаторы
1.Небелковая часть ферментов
2.Ионы металлов
2.1. Ионы металлов – стабилизаторы молекулы субстрата: E – S - Me
Глюкоза Гексокиназа Глюкоза-6-фосфат
2+ |
АДФ |
Mg -АТФ |
|
2.2. Ионы металлов–стабилизаторы активного центра фермента: E – Me - S
Такие функции выполняют:
Mg2+, Mn2+, Zn2+ , Mo2+ , Co 2+
2.3. Ионы металлов - стабилизаторы третичной и четвертичной
структуры апофермента |
Zn 2+ |
|
Zn2+ |
|
36 Кд |
36 Кд |
|
||
|
|
|
||
|
|
+4Zn |
|
|
|
|
+4Zn |
|
|
36 Кд |
36 Кд |
Zn 2+ |
151кДж |
Zn 2+ |
Фермент неактивен |
Алкогольдегидрогеназа |
|||
|
|
Фермент активен |
||
2.4. Ионы металлов - участники ферментативного катализа
Ингибиторы
Ингибирование ферментативной активности – снижение каталитической активности в присутствии определенных низкомолекулярных соединений - ингибиторов
Ингибирование по степени прочности связывания фермента и ингибитора
Обратимое |
Необратимое |
по механизму действия |
|
Конкурентное Неконкурентное