- •Активность ферментов: влияние факторов, регуляция.
- •Факторы, влияющие на активность ферментов
- •Влияние [E]
- •Влияние [S]
- •Значение Km
- •Использование степени сродства [ES]
- •Значение Km
- •Значение Km
- •Определение Km
- •Влияние температуры
- •Влияние рН
- •Фермент
- •Влияние низкомолекулярных продуктов
- •2.1. Ионы металлов – стабилизаторы молекулы субстрата: E – S - Me
- •2.3. Ионы металлов - стабилизаторы третичной и четвертичной
- •Ингибиторы
- •Необратимое ингибирование – наблюдается в случае образования ковалентных стабильных связей между молекулой ингибитора
- •Конкурентный тип ингибирования
- •Торможение активности СДГ малоновой кислотой
- •Влияние конкурентного ингибитора на скорость ферментативной реакции в зависимости от концентрации субстрата
- •Неконкурентное ингибирование – ингибитор взаимодействует с ферментом в участке, не входящим в состав
- •График зависимости V от [S] в присутствии неконкурентного ингибитора
- •Регуляция активности ферментов
- •Аллостерическое модифицирование
- •Аллостерическая регуляция
- •Необратимое ковалентное изменение
- •Фосфорилирование и дефосфорилирования
- •Активация ферментов фосфорилированием
- •Активация ферментов дефосфорилированием
- •Классы ферментов
- •Б. Оксидазы
- •2. Трансферазы
- •4. Лиазы
- •5. Изомеразы
Активность ферментов: влияние факторов, регуляция.
Факторы, влияющие на активность ферментов
1.Концентрация фермента (энзима) [E]
2.Концентрация субстрата [S]
3.Температура
4.Концентрация ионов Н (рН)
5.Низкомолекулярные продукты
Влияние [E]
[V]
[S]
[S] - const
Влияние [S]
Уравнение Михаэлиса - Ментен
VMAX . [ s ]
V= Кm + [ s ]
[S] 0
V= |
Vmax |
. |
[ S ] |
V = [S] |
|
Кm |
+ |
[ S ] |
|||
[V] |
|
||||
|
|
|
|
[S]
[S] ∞
V= |
Vmax |
. |
[ S ] |
V = Vmax |
|
Кm |
+ |
[ S ] |
|||
[V] |
|
||||
|
|
|
|
Vmax
[S]
|
|
Если |
|
v = ½ |
vmax |
|
|
|
Vmax |
|
|
Vmax |
[ s ] |
|
|
2 |
= Km + |
[ s ] |
||
2 |
= |
s |
[ s ] |
|
|
Km + [ s ] = 2 [ s ] |
Km + |
|
|
||||
1 |
|
|
|
|
или |
|
Km = [ s ]
v 
12 vmax 






















Km [ s ] Для многих ферментов Km = 10-1 – 10-6 M
Значение Km
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ЛАКТАТ |
ЛДГ1 |
Пируват |
||
1. Показывает сродство [E] и [S] |
|
|
|
|
|
|
ЛДГ5 |
|||||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Vmax |
|
|
|
|
|
|
|
ЛДГ 1 |
|
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
ЛДГ 5 |
|
|
Vmax
2
ЛДГ1 Km ‘Km ЛДГ5 |
[ЛАКТАТ] |
Использование степени сродства [ES]
|
|
Этанол |
Этиленгликоль |
|||
|
|
СН2 |
ОН |
СН2 |
|
ОН |
|
|
СН3 |
|
СН2 |
|
ОН |
|
НАД |
|
|
|
НАД |
|
|
Алкогольдегидрогеназа |
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
НАДНН+ |
|
|
НАДНН+ |
|||
|
|
|
|
|||
Уксусный |
|
О |
С |
О |
|
|
СН3 |
С |
Н |
|
|||
альдегид |
|
|
Диглиоксаль |
|||
|
|
|
Н |
С |
О |
|
|
|
|
|
Н |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
О |
СООН |
СН3 |
|
|
|
|
С |
~ |
|
Токсикант |
|
|
|
СоА |
СООН |
|
|
|
|
Ацетил-СоА |
Щавелевая |
|
кислота |
||
|
V
Vmax
Km Этанол |
Km Этиленгликоль |
[S] |
|
|
