Методические указания к самостоятельной работе

1. Вопросы по теме занятия 6 для самостоятельного изучения их студентами:

1. Какие микроорганизмы чаще всего вызывают пищевые токсикоинфекции?

2. Какие условия способствуют возникновению пищевых токсикоинфекций?

3. Какие сальмонеллы чаще всего оказываются возбудителями пищевых токсикоинфекций?

4. Каковы морфологические, тинкториальные, культуральные и биохимические свойства сальмонелл – возбудителей пищевых токсикоинфекций?

5. Какие микробиологические методы используются для диагностики пищевых токсикоинфекций?

6. На какие питательные среды следует сеять материал при пищевых токсикоинфекциях?

7. Как производится идентификация сальмонелл – возбудителей пищевых токсикоинфекций?

8. Как производится исследование пищевых продуктов на наличие условно-патогенных микробов кишечной группы?

9. Какие бывают типы вспышек внутрибольничного сальмонеллеза?

10.Каковы свойства сальмонелл – внутрибольничных сальмонеллезов?

2. Дома студенту необходимо письменно ответить на следующие вопросы (домашняя работа сдается преподавателю на занятии):

1. Род, виды (серовары) бактерий, наиболее часто вызывающие пищевые токсикоинфекции (ПТИ)

2. Источник заражения ПТИ

3. Факторы передачи возбудителей ПТИ

4. Методы лабораторной диагностики сальмонеллезов

5. Элективная среда для выделения сальмонелл из испражнений

6. Свойства, по которым идентифицируют выделенные сальмонеллы

7. Характеристика иммунитета у лиц, переболевших ПТИ

Справочные и теоретические материалы

Сальмонеллы вызывают острые кишечные заболевания у людей и животных. У людей заболевание протекает в виде энтеритической формы. Энтеритическая форма может быть вызвана сотнями сероваров. В России ежегодно регистрируется выделение 200–250 сероваров сальмонелл, в том числе около 20 обнаруживают впервые. Эти серовары относятся к разным родам, видам, но чаще всего причиной заболевания бывают представители серогрупп В, С, Д, Е: S. typhimurium, S. choleraesuis, S. enteritidis, S.anatum, S.heidelberg и др.

Биохимические свойства возбудителей сальмонеллезов близки к свойствам палочки Шотмюллера.

Сальмонеллез характеризуется эпидемиологическими особенностями. Первая особенность – это полипатогенность возбудителей, что обусловливает необычайное множество резервуаров и возможных источников инфекции. К ним относится крупный рогатый скот, те­лята, поросята, куры, цыплята, утки, гуси, грызуны – крысы, мыши. У животных сальмонеллы могут формировать бессимптомную или клинически выраженную инфекцию.

Вторая эпидемиологическая особенность – это множественность путей и факторов передачи. Основным путем заражения при сальмонеллезе является алиментарный, а факторами передачи – различные пищевые продукты животного происхождения (мясо кур, мясные продукты, яйца, яичные продукты, молоко и молочные продукты). В качестве прямого или опосредованного фактора может служить вода. Люди заражаются от больных животных при уходе за ними.

Третья особенность – изменился характер возникновения эпидемических вспышек сальмонеллеза, возникающих в результате поступления в торговую сеть обсемененных сальмонеллами различных пищевых продуктов, вследствие чего их эпидемиологическая расшифровка затруднена.

Следующая эпидемиологическая особенность – это полиэтиологичность. С каждым годом возрастает число серологических вариантов сальмонелл, выделяемых от людей и животных.

Сальмонеллы, вызывающие внутрибольничные инфекции. В условиях больничных стационаров сальмонеллы могут вызвать «госпитальные» вспышки, особенно у детей первых лет жизни в форме токсико-септического заболевания. Токсико-септическую форму сальмонеллеза у детей, как правило, вызывает S. typhimurium, но отмечены также случаи заболеваний, причиной которых были S. heidelberg, S. haifa, S. virchow и др. Сальмонеллы, вызывающие госпитальную инфекцию, обладают высокой инвазионной способностью, множественной антибиотикорезистентностью, низкой патогенностью для белых мышей, способностью кроме эндотоксина, выделять энтеротоксин.

Заболевание возникает на фоне ослабленного организма со сниженной функцией иммунной системы. Заболевают, в первую очередь дети раннего возраста. В детских лечебных учреждениях, палатах новорожденных возникают госпитальные вспышки этого сальмонеллеза. Источником инфекции при токсико-септической форме является, кроме животных и птиц, человек. Правда, роль человека меньше, чем животных, и реализуется она в необычных условиях (внутрибольничное зараже­ние, маленькие дети). Преобладает контактно-бытовой путь переда­чи (через руки ухаживающих за детьми, игрушки, предметы ухода за детьми, белье, оборудование). Возможен воздушно-пылевой и алиментарный пути передачи.

Диагноз сальмонеллеза может быть поставлен только при наличии характерных клинико-эпидемиологических данных и лабораторно­го подтверждения.

Основным методом лабораторного исследования является бактериологический метод, основанный на выделении возбудителя. Кроме не­го используется серологические метод, с помощью которого определяют антитела в сыворотке больных людей.

При постановке бактериологического диагноза материалом для исследования служат промывные воды желудка, рвотные массы, кровь, моча, испражнения и материал, полученный на вскрытии.

Пробы отбирают в стерильных условиях в стерильные банки с притертой пробкой, обертывают их плотной бумагой, обвязывают шпагатом и пломбируют. Собранный материал поставляют в лабора­торию как можно быстрее с сопроводительным документом и изучают его, независимо от количества и состояния. Кровь исследуют с пер­вого дня болезни, её берут асептично из локтевой вены в объеме 10–20 мл и тут же, у постели больного, засевают во флаконы с элективной средой (среда Рапопорт или 20% желчный бульон) в объеме 100–200 мл. При токсикоинфекциях период бактериемии ко­роткий, поэтому этот материал исследуют в первые дни болезни. Испражнения исследуют с первых дней болезни, для этого берут 3–5 г испражнений, помещают в пробирку с 30% глицериновой смесью и доставляют в лабораторию. Собранный материал встряхивают, эмульгируя его в консерванте, затем одну каплю эмульсии наносят на поверхность питательной среды и досуха втирают стеклянным шпателем на месте посева, а затем по всей поверхности.

Моча исследуется с первых дней заболевания. Мочу забирают стерильным катетером в стерильную посуду, сливают первую порцию, из оставшейся 20–30 мл наливают в центрифужные пробирки, центри­фугируют или отстаивают, осадок высевают на дифференциально-диагностические среды и одну из сред обогащения.

Рвотные массы и промывные воды желудка забирают в стериль­ную посуду. Они, как правило, имеют кислую реакцию, поэтому пе­ред посевом их нейтрализуют 5–10% раствором бикарбоната натрия, 2–3 капли из верхнего слоя засевают на дифференциально-диагностические среды и среды обогащения.

Материал вскрытия: кусочки печени, селезенки, почек, кост­ного мозга, тонкого кишечника, а также кровь и желчь набирают стерильной пастеровской пипеткой, место введения пипетки предва­рительно прожигают раскаленным скальпелем. Кусочки органов берут стерильными ножницами и пинцетами, затем их растирают в стериль­ной ступке и высевают на дифференциально-диагностические среды и среду обогащения.

Каждый случай пищевой токсикоинфекции или внутрибольничного сальмонеллеза требует обязательного расследования, поэтому кроме бактериологического обследования больного, исследуют остатки пищи полуфабрикаты и сырые продукта на обсемененность сальмонеллами. Пробы отбирают в стерильную посуду. Жидкие и полужидкие продукты тщательно размешивают, засевают по 2–3 капли на дифференциально-диагностические среды и среды обогащения. При исследовании твердых продуктов пробу берут из глубины в количестве 5–10 мл стерильным скальпелем или ножом, эмульгируют в изотоническом растворе хлорида натрия в соотношении 1:5 и засевают на дифференциально-диагностические среды и среды обогащения.

Дальнейшее исследование ведут в общей схеме исследования на сальмонеллез.

Серологический диагноз сальмонеллеза основан на выявлении специфических антител. Серологический диагноз может быть, приме­нён для подтверждения клинического диагноза при отрицательном результате бактериологического исследования, а также ретроспективной диагностики сальмонеллеза. Титр антител определяют в реак­ции агглютинации (по типу реакции Видаля), готовя разведения сыворотки больного oт 1:50 до 1:800. В качестве антигена используют или живые суточные культуры сальмонелл, включая аутоштаммы, или стандартные сальмонеллезные диагностикумы. Через 7–8 дней реакцию ставят повторно. Реакция считается положительной при разведении не менее 1:100 при условии нарастания титра антител при повторной постановке реакции.

Кроме реакции агглютинации, для серологической диагностики применяют реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА), которая явля­ется более чувствительной, позволяет выявить антитела в более ранние сроки (на 3–5 день болезни).

В результате самостоятельной работы студент должен знать:

1. Современную классификацию бактерий семейства Enterobacteriaceae и их роль в инфекционной патологии

2. Биологические свойства бактерий рода Salmonella

3. Эпидемиологию, патогенез, восприимчивостьherichia и иммунитет при ПТИ

4. Основные клинические проявления заболевания при ПТИ

5. Методы лабораторной диагностики ПТИ

6. Препараты для идентификации, лечения и профилактики заболеваний

Уметь:

1. Дифференцировать возбудителей сальмонеллезных инфекций по антигенным свойствам

2. Классифицировать бактериальные препараты в соответствии с их назначением

тику биологических свойств бактерий рода из гноя при острой гонор

ЗАНЯТИЕ 7

ТЕМА. Staphylococcus. Современная классификация. Морфология, биология, культуральные свойства стафилококков. Лабораторный диагноз стафилококковых инфекций. Профилактика

Методические указания к самостоятельной работе