5. Распределительная хроматография, применение.

Распределительная хроматография — хроматографический метод, при котором неподвижная (стационарная) фаза химически связана с поверхностью неподвижного носителя. Подвижной фазой является жидкость (LLC — англ. liquid liquid chromatography), которая служит растворителем, или газ (газовая хроматография). Разделение происходит за счёт различия полярности разделяемых веществ.Частным случаем распределительной хроматографии является обращённо-фазная хроматография. Распределительная хроматография основана на различии в коэффициентах распределения разделяемых веществ между двумя несмешивающимися жидкими фазами— подвижным и неподвижным растворителями. Неподвижный растворитель прочно удерживается на поверхности инертного носителя, например окиси алюминия, фторопласта, бумаги и др.Бумагу можно представить как инертный носитель стационарной водной фазы. Когда растворитель проникает через участок бумаги, содержащий растворенное вещество, происходит распределение этого вещества между подвижной органической и стационарной водной фазами. Таким образом, некоторая часть вещества переходит в органическую фазу. Когда подвижная жидкость достигает участка бумаги, не содержащей растворенного вещества, снова происходит перераспределение. На этот раз вещество переходит из" органической фазы в водную, фиксированную на бумаге. Перемещение полосы (зоны) растворенного вещества описывается величиной .Значение Rf зависит от природы носителя, техники эксперимента, температуры и других факторов и не должно зависеть от концентрации определяемого вещества и присутствия других компонентов. Разновидностью распределительной хроматографии является хроматография на бумаге, широко используемая в биохимических лабораториях, в том числе клинических, для разделения пептидов, аминокислот и других веществ. В качестве стационарной фазы при этом служит вода, адсорбированная целлюлозными цепями фильтровальной бумаги. Образец помещают на одном конце бумажной полосы, этим же концом бумагу погружают в подходящую смесь органических растворителей (например, бутанол–уксусная кислота–вода в определенных соотношениях). При движении растворителя по бумаге благодаря силе капиллярности происходит разделение компонентов смеси. Проявленную хроматограмму высушивают, а местоположение каждого из разделяемых веществ определяют химическими или физико-химическими методами.

6. Бумажная и тонкослойная хроматография. Применение.

Бумажная хроматография — метод анализа состава исследуемого образца. Был открыт в 1944 году Констоном, Гордоном, Мартином и Сингом, которые использовали его для анализа смесей аминокислот. Мартин и Синг впоследствии были удостоены Нобелевской премии за открытие распределительной хроматографии. В последующие 10 лет этот метод получил огромное распространение, но с 1952 года бумажную хроматографию начал вытеснять новый метод тонкослойной хроматографии (являющийся по сути обобщением бумажной). Последний оказался эффективнее благодаря большей скорости эксперимента, пригодности для препаративных целей и более широким возможностям обнаружения. Поэтому сейчас бумажная хроматография уже практически не применяются, а методы её давно не совершенствуются.

Тонкослойная хроматография (ТСХ) является планарной разновидностью жидкостной хроматографии, в которой подвижная фаза (ПФ) движется в пористой среде слоя адсорбента.

Тонкослойная хроматография (ТСХ) - наиболее доступный и дешевый метод количественного и полуколичественного анализа всех классов низкомолекулярных органических соединений, неорганических веществ и высокополимеров, выполняемый с помощью специального оборудования на пластинах, покрытых слоем сорбента.

Оборудование, пластины и комплектные наборы этого оборудования предназначены для оснащения аналитических и токсикологических лабораторий центров контроля лекарственных средств, центров стандартизации и метрологии, госсанэпиднадзора, агрохимслужб, станций защиты растений, ветлабораторий, бюро судмедэкспертизы, наркологических диспансеров, предприятий и НИИ продовольственных отраслей промышленности и фармакологии, а также экспертно-криминалистических лабораторий МВД и таможенного комитета и других контрольных служб. В бумажной и тонкослойной хроматографии применяют все методы наблюдения, кроме изучения концентрации вытекающего рас-раствора. Бумажная и тонкослойная хроматография применяются главным образом для анализа веществ и особенно успешно для анализа смесей радиоактивных веществ. Разделение смесей таким путем возможно только для небольших количеств веществ.