- •Алгоритм выделения чистых культур анаэробных микроорганизмов
- •3 Этап
- •4 Этап
- •3) Лабораторные животные
- •Самостоятельная работа во внеурочное время
- •2) Дать классификацию микробов по типу дыхания.
- •3) Заполнить таблицу по основным знаниям физиологии микроорганизмов
- •Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
- •3) Биологические методы основаны на совместном выращивании анаэробов со строгими аэробами (метод Фортнера)
3) Лабораторные животные
Вывод:_______________________________________________________________________
Подпись преподавателя___________________________________________________
Самостоятельная работа во внеурочное время
Ответить на вопросы:
1) Что изображено на фотографии? Цель применения устройства? Какие дополнительные технические средства и среды нужно использовать?
2) Дать классификацию микробов по типу дыхания.
3) Заполнить таблицу по основным знаниям физиологии микроорганизмов
Микроорганизмы |
Тип питания, паразитизм |
Тип дыхания |
Пример питательной среды |
Клостридии |
|
|
|
Риккетсии |
|
|
|
Вирусы |
|
|
|
Подпись преподавателя___________________________________________________
Теоретическая справка
к работе № 2
Методы создания анаэробных условий
Физические методы. Методы основаны на выращивании микроорганизмов в среде без воздуха
• Посев в среды, содержащие редуцирующие и легко окисляемые вещества:
В качестве редуцирующих веществ обычно используют кусочки (около 0,5 г) животных или растительных тканей (печень, мозг, почки, селезенка, кровь, картофель, вата). Эти ткани связывают растворенный в среде кислород и адсорбируют бактерии. Чтобы уменьшить содержание кислорода в питательной среде, ее перед посевом кипятят 10-15 мин, а затем быстро охлаждают и заливают сверху небольшим количеством стерильного вазелинового масла. Высота слоя масла в пробирке около 1 см. В качестве легко окисляемых веществ используют глюкозу, лактозу и муравьино-кислый натрий.
Лучшей жидкой питательной средой с редуцирующим веществами является среда тиогликолевая, которая используется для накопления анаэробов при первичном посеве из исследуемого материала и для поддержания роста выращенной чистой культуры анаэробов.
• Посев микроорганизмов в глубину плотных питательных сред.
Посев уколом. Применяется для выращивания анаэробов или выявления характерного признака микроба, так как рост по уколу типичен для ряда бактерий и длительного хранения культур. При посеве уколом в пробирку с прямым агаром или столбиком желатины держат дном кверху, вынимают пробку и обжигают край пробирки. Материал, содержащий микробы, забирают простерилизованной на пламени длинной совершенно прямой платиновой иглой и прокалывают ею столбик питательной среды снизу вверх почти до самого дна пробирки. Вынимают иглу, обжигают край пробирки и пробки, закрывают пробирку, прожигают иглу, ставят ее в подставку, надписывают пробирку и помещают в штатив.
• Механическое удаление воздуха из сосудов, в которых выращиваются анаэробные микроорганизмы
Удаление воздуха производят путем его механического откачивания из специальных приборов - анаэростатов, в которые помещают чашку с посевом анаэробов. Переносной анаэростат представляет собой толстостенный металлический цилиндр с хорошо притертой крышкой (с резиновой прокладкой), снабженный отводящим краном и вакуумметром. После размещения засеянных чашек или пробирок воздух из анаэростата удаляют с помощью вакуумного насоса.
• Замена воздуха в сосуде каким-либо индифферентным газом
Замену воздуха индифферентным газом (азотом, водородом, аргоном) можно производить в тех же анаэростатах путем вытеснения его газом из баллона.
Химические методы основаны на поглощении кислорода воздуха в герметически закрытом сосуде (анаэростате, эксикаторе) такими веществами, как пирогаллол или гидросульфит натрия