Лекция№2 [только чтение] [Режим совместимости]

Получениеовулировавшейикры

Методподрезанияяйцеводаспоследующим отцеживаниемикрыявляетсяосновнымметодом прижизненногополученияовулировавшейикры. Данныйподходявляетсянаименеетравматичнымс наименьшимстрессовымвоздействиемнарыб. Сцеживаниедолжнопродолжатьсядотехпор,покаикра свободновытекаетизполоститела.Еслипервое сцеживаниеосуществляетсяпрофессионально,то второесцеживаниеможетнепотребоваться.

Применениеанестезииприсцеживанииикрызанимает от2до20мин.;использованиеанестетиков,вчастности, рекомендуетсядлябольшихсамок(более30кг),которые безэтоготрудноудерживать.Дляболеекрупныхрыб (более150кг)целесообразноиспользоватьметод лапаротомииспоследующимналожениемшвови применениемсоответствующихадаптационных процедур.

Получениеспермыиоценкаее

качества

Заготовказрелых самцовдолжна проводиться сминимальным стрессом длярыб.

Генитальноеотверстие самцов должно аккуратнопротираться перед каждымполучением спермы.

Сперму следует отбиратьвчистые сухиеемкости. Приэтом эякулятсявными сгусткамиидругими инородными включениями должен бытьотбракован.

Отборспермы следует производить спомощью катетера, соединенного сошприцомЖанеили(какальтернативный вариант)непосредственно вмензурки, сгибая самцов.

Послеотборанеобходимого количества спермы, необходимо надлежащимобразомоценить еекачество.

Кратковременное хранениеспермы следует проводить при температуре,котораянепревышает температуру, при которой содержатсясамцы.В случаеболее продолжительного хранения(порядка нескольких дней), следует использовать гипотермическийметод.

Осеменениеикры

Осеменениеследует проводитьсиспользованием полусухого (“русского”)метода.Полусухойметодосеменения позволяет снизить вероятностьполиспермии,обусловленной возможнымосеменением черезмногочисленные микропиле, чтотипично дляикрыосетровых.

Осеменениеикрыпроводят,добавляя внеерастворспермывводев концентрации1:200.Указанноесоотношениеможетбытьнемного измененовзависимостиотколичества овариальной жидкостив икре.Последобавления оплодотворяющегораствора,икру интенсивноперемешиваютвтечение 2мин,поскольку ужечерез 2 минактивнымиостаютсятолько 10-20%сперматозоидов.

Фактором,ограничивающимэффективностьосеменения является потеряикройоплодотворяющейспособностипоследобавления в нееводы.Дополнительным негативнымфактором,влияющим на осеменениеявляется присутствиеполостной жидкости.Для исключениясвязанных сэтимнегативныхпоследствий рекомендуетсяпроводитьосеменение вдваэтапа,заменяячерез 1 минпослеосеменения весьоплодотворяющийраствориземкостис икройновымрастворомспермывчистойводедлязавершения осеменения.

Обесклеивание икры

Вкачествеобесклеивающего веществатрадиционноприменяют минеральныйил, “голубую”глину, тальк, молокоитанин.

Втомслучае, если вкачествеобесклеивающего вещества применяетсяречной ил,необходимо перед использованием провестиего стерилизациюдляснижения рисказаражения. Продолжительностьпроцедурыобесклеивания одинакова длявсех видовосетровыхи зависитотиспользуемого обесклеивающего вещества.

Дляпредотвращениягибели икры(эмбрионов)необходимо в процессеобесклеивания добавлятьваппаратысвежую, аэрированнуюводуи контролироватьподачувнихвоздуха.По окончании обесклеивания икрунеобходимо промытьводойдо полногоудаления остатковобесклеивающего вещества.

Используемаядляпромывкиводадолжнасоответствовать нормативнымзначениям гидрохимическихпоказателей, свысоким содержаниемкислородаитемпературу,соответствующие экологическимтребованиям (дляосеменения, оплодотворенияи инкубацииикры).

Инкубацияикры

Инкубационные аппараты, большей частью, используются втечениеотдельныхсезонов, анекруглыйгод.Передиспользованием аппарата после перерыва, настоятельно рекомендуетсяпроверятьвсе егокомпоненты,включая стенки,окна (оснащенные защитнымисеткамиот комаровдляисключения попадания насекомых винкубационную камеру),полы иуглыцеха (помещения). Практическивсе помещение(цех) должно быть продезинфицированопередначалом работы.

Передзакладкойикрыследует такжепроверитьсистемуподачиисброса водыв аппаратах, ихкомплектность,работоспособность (клапаны ит.д.), атакжесостояние инкубационных секций.Водоподающую системупромывают; после промывкиаппараты дезинфицируютивновь промывают чистойводой.Расход водывинкубационных аппаратах устанавливают взависимости отихтипа.Использование поверхностных вод должнобытьисключено, насколькоэтовозможно. Желательно использовать подземную воду,поскольку внейотсутствуют бактерии,чтопозволяет ссамого начала обойтисьбез использования антимикробныхсредств.

Длянебольшого количества икры(например, стерляди) весьма эффективнымявляется использование аппарата МакДональда.Также,дляоценкикачества инкубации икрыи болееточногомониторингасамок, скоторыхначинается массовая инкубация, подобные инкубационные системымогутобеспечить хорошийконтрольстандартныхусловий. Терморегуляцию водынеобходимосовмещать сеедегазацией дляисключения перенасыщения(удаления избыткаазота) истерилизациейУФ лучамив инкубационном аппарате.

Уровеньосвещенностиинкубационных аппаратовдолжен соответствоватьвидовымтребованиям(севрюга–20-100лк,русский осетришип–10-20лк.Прибольшей освещенностиувеличивается числоаномалий развитияи снижаетсявыживаемостьэмбрионов.

Учетколичества инкубируемой икрыосуществляютпризакладкев аппаратыобъемнымили весовымметодомна основе ориентировочныхвидовыхпотребностей вкислороденаразличных онтогенетических стадияхв отношениикобъему водоподачи (рассчитываетсяпроизводительность каждогоинкубационного аппарата).Можно оценитьмассуиобщее количество икры(после овуляции)приотборепутемвзвешиванияобразцовсизвестным числомикринок(или определяяколичество икринокв1-5гикры). Крометого,всоответствиисметодиками,принятымина морских рыбоводныххозяйствах свыпускоммиллионов икринокодной самкой,можнопровестиэкспрессоценкунеповреждаяикры, измеряяобъемикрыпослеоплодотворения.

Впроцессеинкубации необходимо обеспечить круглосуточное наблюдениезарегулярностью подачиводы.Подобнаяпроцедура являетсянеобходимой только длятрадиционныхрыбоводных заводов,накоторыхещенебыли установлены современные средствамониторингаиэлектронногоконтроляитревожное оборудование.

Удалениепогибшей икрыследует проводитьрегулярно, промежутоквременимежду проверкамиустанавливается ежедневно, взависимости отзафиксированных суточных уровнейсмертности(приповышении уровня смертностиследует увеличитьчастоту проверок).

ПроведенияУФ бактерициднойстерилизацииилитерморегуляцииможет оказаться недостаточно; приэтомикраможет оказаться низкогокачества, поэтомунеобходимо проводитьпрофилактическую обработку соответствующими препаратами (более эффективнымявляется методнепрерывнойобработки малыми концентрациями фиолетового“К”втечениепрактическивсего периодаинкубации). Вслучае, когда повторноеприменениеУФ дезинфекцииоказывается недостаточным, необходимо выявитьнедостаткиконструкциисистемыиосуществитьпереоценкуУФблока иего мощностиикакможно быстрееотрегулировать ее.

Вслучае еслиподземныеводынедоступны вдостаточномколичестве ииспользуется водоподачаизповерхностных источников(полностью иличастично), необходимо осуществлятьпредварительную водоподготовку сиспользованием приемлемых методологий,такихкакмеханическая фильтрация(например, отстойники,двигающиеся экраныдляудаления крупныхвзвесей, атакжефильтрыобратнойпромывки).

Продолжительностьпериодаинкубацииикрызависит от температурногорежимаив среднемдлявсех видов осетровых рыбсоставляет 1000-1500 градусо-часов. Необходимо поддерживатьвидоспецифичный температурныйрежиминкубации впределахсредних значений.

Формаиконструкцияиспользуемых инкубационных аппаратов должны обеспечивать легкийсбор отходов(мертвая икра,пустыеоболочки икры,мусор ивзвеси) иихудаление безущерба икревтечениеинкубации, атакжевылупившимся личинкам.

Выклевпредличинок

Продолжительность периода инкубации зависит от температурныхусловий, которыерекомендуется поддерживать науровнесредних температур, характерных дляданноговида.Отдельные эмбриона вылупляютсяраньше других; потом,практически одновременно, происходит выклевосновной массыэмбрионов, закоторымследует выклевнескольких запоздавших эмбрионов. Инкубацияикры притемпературахблизкихкверхнему пределу может отрицательносказатьсянаэмбриональном развитии и привести кувеличению числа аномалийиколичества личинок снизким содержанием желтка.Притемпературахблизкихк нижнему пределу наблюдаетсязадержкаинкубациии, как следствие, требуетсяпроведение большого объема профилактических мероприятий. Продолжительность выклеваэмбрионов изикры всреднем длится24-48часов, однако,длямаксимального сокращения продолжительности выклеваиполучения эмбрионов одинакового размера необходимаоптимизация условий инкубации.

Выдерживаниепредличинокв периодэндогенногопитания

Нарыбоводномзаводедолженбытьреализованподходящийпроектцеха содержания(пред)личинок.Приэтомдолжнобытьобеспеченосвоевременное удалениепогибшихличинок.Необходимотакжеподдерживатьпостоянную температуруводы,обеспечитьдегазациюинизкийуровеньводообмена,атакже небольшуюглубинубассейна(20см).

Выдерживаниепредличинокиподращиваниеличинок,обычнопроводятв бетонныхилипластмассовыхкруглыхбассейнахилилоткахсплощадью поверхности1-4кв.м. иглубиной17-20см.Плотностьпосадкипередначалом активногопитанияможетбытьотносительновысокимисоставлятьдо20тыс. особейна1кв.метр.

Передзарыблениембассейнов,следуетпроверитьипромытьсистемыподачии отводаводы;дноистенкибассейнадолжныбытьпродезинфицированыипромыты чистойводой.

Вслучаеприменениятрадиционнойтехнологии,минимальныйуровень водоподачи(1-3л/мин)долженподдерживатьсявтечение24часоввыдерживания предличинок(одинразвтричаса).Послеэтогоуровеньводоподачидолженбыть увеличендо8-14л/мин(сзаменойводынеменеедвухразвтечениечаса).

Впериодэндогенногопитания,когдапигментацияпредличинокещенеразвита, необходимоподдерживатьприинкубацииикрынизкийуровеньосвещенности, обеспечиваятакимобразомдифференцированныйподходквыращиванию различныхвидовосетровых.