Микра / Частная микра / ОРТОМИКСОВИРУСЫ

1

ОРТОМИКСОВИРУСЫ

Таксономия

Семейство Orthomyxoviridae

Роды Influenzavirus A, B и Influenzavirus C, различающиеся между собой по нуклеопротеидным антигенам:

• вирус типа А

• вирус типа В

• вирус типа С

►Вирус типа С выделен в отдельный род, так как 7 фрагментов РНК, нет нейраминидазы, нет антигенной изменчивости (дрейфа и шифта), для адсорбции на клетке используется другой тип рецепторов

Жизненный цикл начинается в цитоплазме, геном синтезируется в ядре.

Морфология

и основные антигены

Вирион имеет сферическую форму, диаметр 80-120 нм, вирус сложный (суперкапсид), тип симметрии - спиральный. Генома состоит из 8 фрагментов РНК и 4 капсидных белков:

1. Нуклеопротеид (NP), типоспецифичен, выполняет структурную и регуляторную роль

2. Транскриптаза (РНК-полимераза)

3. Эндонуклеаза

4. Репликаза

Суперкапсид имеет два гликопротеина, которые входят в состав поверхностных шипов:

1. Гемагглютинин

2. Нейраминидаза

Основные функции гемагглютинина вируса гриппа:

1) распознавание чувствительных клеток (клетки верхнего ДТ, покрытые сиаловой кислотой);

2) слияние с мембраной клетки,

3) пандемичность вируса (смена гемагглютинина - причина пандемий, его изменчивость – причина эпидемий гриппа);

4) формирование иммунитета.

У вирусов гриппа А человека, млекопитающих и птиц обнаружено 13 антигенных типов гемагглютинина (H1-Н13).

Функции нейраминидазы:

1) диссеминация вирионов;

2) пандемические и эпидемические свойства вируса.

У вируса гриппа А обнаружено 10 различных вариантов нейраминидазы (N1-N10)

►Таким образом, характерной особенностью вирусов гриппа типа А является высокая изменчивость антигенов Н и N. Из всех типов в состав вируса гриппа человека типа А входят 3 Н и 2 N. В зависимости от их сочетания выделяют три подтипа Н1N1, Н2N2, Н3N2. Изменчивость обусловлена двумя генетическими процессами.

Дрейф – небольшие изменения гликопротеинов, не выводящие штамм вируса за пределы данного подтипа (благодаря точечным мутациям генов). Шифт (скачок) – определяет полную замену антигенов в результате чего появляется новый подтип вируса (замена генов в связи с рекомбинациями между вирусами человека, животных и птиц). Типы С – стабильный. Тип В – дрейф выражен слабее, шифта нет.

Биологичес-кие свойства

Вирус гриппа чувствителен к нагреванию (при 65°С погибает в течение 5-10 мин.), высушиванию, действию солнечных лучей, при комнатной температуре погибает за несколько часов, легко обезвреживается дезинфицирующими веществами

Эпидемиоло-гия

Вирус типа А вызывает грипп у человека, млекопитающих и птиц, а вирусы типа В и типа С - только у человека. Вирус типа А вызывает пандемии и эпидемии, вирус типа В – эпидемии и локальные вспышки, вирус типа С – только спорадические случаи

Источник инфекции - только человек, больной или носитель.

Путь заражения - воздушно-капельный.

Инкубационный период очень короток – от нескольких часов до 2 дней.

►Основным регулятором эпидемий гриппа является иммунитет

Лабораторная диагностика

Материалом для исследования служит:

Отделяемое носоглотки (получают либо путем смыва, либо с помощью ватно-марлевых тампонов), мазки-отпечатки слизистой носовых ходов, кровь и секционный материал.

1. Экспресс-диагностика:

◘Прямой РИФ или ИФА (обнаружить вирусный антиген в мазках-отпечатках или в смывах из носоглотки больных).

2. Вирусологический:

◘Заражение 10-11-дневных куриных эмбрионов (лучше в амниотическую полость).

Вирус обнаруживают (индикация) в содержимом амниотической полости с помощью РГА, используют эритроциты кур, морских свинок и 0-группы крови. Идентифицируют вирус с помощью РТГА, применяя специфические сыворотки.

3. Серологический метод:

◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА.

Вирус гриппа типа B можно культивировать в культурах тканей.

Иммунопро-филактика

1) живая из аттенуированного вируса

2) убитая цельновирионная

3) субвирионная вакцина (из расщепленных вирионов)

4) субъединичная вакцина, содержащая только гемагглютинин и нейраминидазу. Детей от 6 мес. до 12 лет, по рекомендации ВОЗ, следует прививать только субъединичной вакциной как наименее реактогенной и токсичной («Гриппол»).

2

ПАРАМИКСОВИРУСЫ

Таксономия

Семейство Paramyxoviridae

Род Paramyxovirus -- входят вирусы парагриппа 1 и 3 серотипов;

Род Rubulavirus - входят вирус эпидемического паротита, вирусы парагриппа 2 и 4 серотипов;

Род Morbillivirus - вирус кори;

Род Pneumovirus – вирус респираторно-синцитиальный (RS).

Их жизненный цикл протекает в цитоплазме клетки.

Морфология

и основные антигены

Крупные вирусы сферической формы диаметром 150-300нм, сложные суперкапсидные. Геном - однонитевая нефрагментированная -РНК.

С РНК связаны белок NP. Нуклеокапсид со спиральным типом симметрии. Нуклеокапсид окружен оболочкой из матриксного белка М.

Суперкапсид состоит из липидного бислоя с вмонтированными белками HN и F (от англ. fusion - слияние) в виде шипов. Белок HN обладает гемагглютинирующей и нейраминидазной активностью, ответствен за связывание вируса с клеточными рецепторами (прикрепительный белок).

Белок F опосредует три вида активности:

1. слияние с мембраной клетки

2. слияние клеток, которое обеспечивает возможность вирусу распространяться от клетки к клетке при помощи образующегося синцития (многоядерные клетки),

3. гемолиз эритроцитов.

КЛИНИКА

Вирусы парагриппа 1-го типа вызывают симптом ложного крупа, бронхиолиты, пневмонии у детей, у взрослых – насморк, легкие ОРЗ; 2 тип – круп-ассоциированный вирус; 3 тип (наиболее распространен) -- у детей первого года жизни - в 60-70% вызывают заболевания нижних отделов дыхательных путей (бронхиолиты, бронхиты со стенозом гортани, пневмонии); 4 тип – ОРЗ с интоксикацией, напоминающей грипп.

Эпидемиоло-гия и профи-

лактика

Вирусы парагриппа вызывают в основном локальные вспышки. Источник – только человек. Путь заражения – воздушно-капельный. Иммунитет – непродолжительный, типоспецифический. Методы профилактики не разработаны.

Лабораторная диагностика

Материалом для исследования служит:

Отделяемое носоглотки, мазки-отпечатки слизистой носовых ходов, кровь и секционный материал.

1. Экспресс-диагностика:

◘Прямой РИФ или ИФА (обнаружить вирусный антиген в мазках-отпечатках).

2. Вирусологический:

◘Смыв с носоглотки вносят в культуру клеток. Индикацию проводят по ЦПД (СИМПЛАСТЫ!), РГА с культуральной жидкостью, реакции гемадсорбции. Идентификация – РТГА или реакции торможения гемадсорбции.

3. Серологический метод:

◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА, РН, РИФ

ВИРУС ЭПИДПАРОТИТА (СВИНКИ) (особенности)

►Вирус эпидемического паротита («свинки») имеет типичную для парамиксовирусов морфологию. Белок HN и белок F обладают теми же функциями.

►Заражение воздушно-капельным путем. Источник инфекции – больной.

Репродукция вируса происходит в cтеноновом протоке, сопровождается местным поражением тканей околоушных желез. Затем вирус поступает в кровь, попадает в железистые ткани и в мозг.

►Существует только один антигенный тип вируса. Перенесенная инфекция оставляет стойкий иммунитет. У 20% мальчиков в подростковом возрасте развивается орхит, который может привести к стерильности. Также поражаются внутренние органы и железы (панкреатит, тиреоидит, менингит).

►Лабораторная диагностика:

Материал – слюна, отделяемое носоглотки, моча (начало заболевания), ликвор.

1. Вирусологический метод: используют куриные эмбрионы и культуры клеток. Индикация в культуре клеток по ЦПД (гигантские многоядерные клетки и симпласты с цитоплазматическими включениями, позже наблюдается разрушение клеточного монослоя). На эмбрионах – РГА. Идентификацию проводят с помощью РТГА, РИФ, ИФА, РСК, реакции торможения гемадсорбции.

2. Серологический метод:

◘Специфические антитела и возрастание их титра в 4 раза минимум (в парных сыворотках) выявляют с помощью РТГА, РСК, ИФА

►Специфическая профилактика – живая комбинированная вакцина тримовакс против кори, паротита и краснухи (вакцинируют в 12 месяцев, однократно). Также вакцинируют моновакциной подростков и взрослых, не болевших ранее паротитом.

ВИРУС КОРИ (особенности)

►Вирус кори имеет типичную для парамиксовирусов морфологию.

►У него отсутствует нейраминидаза, таким образом вирус кори обладает гемагглютинирующей, гемолитической и симпластообразующей активностью

►Корь – острое вирусное заболевание преимущественно детского возраста, характеризующееся общей интоксикацией, поражением слизистых оболочек дыхательных путей (в полости рта обнаруживаются пятна Коплика - Филатова — везикулы, результат некроза эндотелиальных клеток слизистой оболочки полости рта) и макуло-папулёзной сыпью.

►Вирус нестоек, очень чувствителен к солнечному свету и во внешней среде быстро погибает

►Осложнением кори является пневмония, в раннем периоде заболевания -- отек гортани, круп. Редким осложнением является энцефаломиелит, который обычно возникает у детей старше 8—10 лет.

►Постинфекционный иммунитет прочный, пожизненный. Профилактика, как при эпидемическом паротите.

►Лабораторная диагностика:

1. Быстрая диагностика кори -- РИФ специфического антигена в клетках эпидермиса кожи при взятии соскоба из участка сыпи, в многоядерных клетках из отделяемом носоглотки.

2. Серодиагностика - Обнаружение антител класса IgM в ИФА.

3. Вирусологический метод - Выделение вируса из смывов носоглотки и крови возможно в продромальном периоде и в течение первых суток после появления сыпи. Используют культуры клеток ПЭЧ, Vero. Индикация по ЦПД – это гигантские многоядерные клетки и симпласты с цитоплазматическими включениями, позже появляются внутриядерные включения. Кроме того, наблюдается круглоклеточная дегенерация и образование веретеновидных клеток с цитоплазматическими и внутриядерными включениями. Идентификация – РИФ, РН, РТГА.

В куриных эмбрионах размножается плохо.

3

АДЕНОВИРУСЫ

Таксономия

Adenoviridae

Род Mastadenovirus (вирусы млекопитающих) – около 80 сероваров, 41 – патогенны для человека.

Род Aviadenovirus (вирусы птиц)

Морфология

и основные антигены

Простые вирусы, форма – икосаэдра (252 капсомера), диаметр 70 – 90 нм; от 12 вершин икосаэдра отходят фибры (нити).

Двухцепочечная линейная ДНК, связываясь с протеинами, формирует плотную серцевину вируса – характерную структуру, видимую при электронной микроскопии.

Антигены:

1. Нуклеокапсид – группоспецифический

2. Гликопротеиновые нити (гемагглютинин) – типоспецифические

Эпидемиоло-гия и профи-

лактика

Источник инфекции - больной человек, в том числе со скрытой ее формой.

Заражение происходит воздушно-капельным, контактно-бытовым путем, через воду в плавательных бассейнах. Возможен и фекально-оральный механизм передачи.

Болеют в основном дети младшего возраста.

Против некоторых серотипов получены иммуногенные вакцины, но широкого применения не получили.

Клиника и иммунитет

Тропизм к лимфоидной ткани -- свойство аденовирусов. Инкубационный период 6-9 дней.

Для заболеваний характерно преобладание респираторного (пневмонии, бронхиолиты, другие ОРВИ – серовары 1-7), кишечного (гастроэнтериты – серовары 40,41) или конъюнктивального синдрома (фагингоконъюнктивиты). Также геморрагические циститы (11,21), менингоэнцефалиты (2,6), генерализованные инфекции (34,35,39).

По типу поражений чувствительных клеток выделяют:

1. Продуктивная инфекция

2. Персистентная инфекция (хроническая или латентная/бессимптомная) - инфекцию с длительным персистированием в лимфоидных тканях (хронические ангины, гаймориты, тонзиллиты)

3. Трансформирующая инфекция (при заражении новорожденных грызунов вирусы вызывают опухоли, для человека данный факт не установлен)

Постинфекционный иммунитет стойкий, длительный, но типоспецифический.

Лабораторная диагностика

Материал для исследования: отделяемое носоглотки и конъюнктивы, кровь, испражнения.

1. Экспресс-диагностика - Выявление вирусных Аг в пораженных тканях в ИФА и РИФ.

2. Вирусологический метод: Для изоляции вируса лучше всего использовать диплоидные клетки эмбриона человека. Вирусы обнаруживают по их цитопатическому эффекту. Аденовирусы хорошо размножаются в культурах клеток различного происхождения, вызывая два типа цитопатических изменений:

- округление клеток и образование из них гроздевидных скоплений, которые вскоре отслаиваются от стекла;

- мелкоточечную дегенерацию, с образованием мелких круглых клеток, диффузно располагающихся по всему монослою.

Идентификацию проводят с помощью РТГА и РН в культуре клеток с типоспецифическими Ат.

3. Серодиагностика - Выявление нарастания титра антител в парных сыворотках больного с помощью РСК, РТГА или РН в культуре клеток.

4

РЕОВИРУСЫ (ОРВИ)

Таксономия

Reoviridae

Род Rotavirus – вирусные гастроэнтериты у детей 6-24 месяцев

Род Reovirus - ОРВИ

Род Orbivirus – арбовирус! вызывает природно-трансмиссивное заболевание Колорадская клещевая лихорадка

Морфология

и основные антигены

Вирус простой, состоит из двухнитчатой РНК, покрытой двумя капсидными белковыми оболочками – внутренней и наружной.

Геном вируса состоит из 10 фрагментов двухнитчатой РНК. Восемь полипептидов являются структурными белками (белок μ1С обеспечивает проникновение вируса в клетку и его распространение в организме).

Известны три серотипа реовирусов человека.

Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи-

лактика

Основной путь передачи – воздушно-капельный, однако возможен и фекально-оральный путь заражения. Реовирусы -- причина эпидемических вспышек в детских коллективах. В циркуляции вируса важную роль играет бессимптомное вирусоносительство.

Иммунитет: К 25-30 годам жизни большинство населения имеют антитела ко всем трем типам вируса, что свидетельствует о его широкой циркуляции.

Вакцинация не проводится.

Клиника и иммунитет

Вирус размножается в эпителии слизистой оболочки носоглотки и кишечника. У взрослых заболевание часто протекает бессимптомно. У детей инфекция характеризуется появлением лихорадки, ринитами, фарингитами, конъюнктивитом, реже наблюдаются пневмония, герпангина, миакардит. Известны смертельные случаи заболевания среди детей раннего возраста и новорожденных.

Лабораторная диагностика

Материал - смывы носоглотки и фекалии больных. В летальных случаях используется кровь, ткань легкого, печени, мозга, почек погибших.

1. Вирусологический метод: Вирус выделяют в культурах клеток. Культивируют в первичных и перививаемых культурах клеток, а также организме новорожденных мышей. ЦПД в виде дегенерации клеток может выявляться через 2-3 недели после заражения. Идентификацию вируса проводят в РН, РТГА с типоспецифическими сыворотками.

2. Серодиагностика. ИФА. Можно определять нарастание титра антител в парных сыворотках в РТГА.

5

РЕОВИРУСЫ (РОТАВИРУСЫ)

Таксономия

Reoviridae

Морфология

и основные антигены

Вирион имеет сферическую форму, нуклеокапсид состоит из двух слоев. Имеют вид колёс. Тип симметрии – кубический. Суперкапсид отсутствует. Геном вириона, представлен двунитевой фрагментированной РНК (11 фрагментов). Каждый фрагмент уникален и кодирует индивидуальный белок.

В составе вириона имеется 8 белков (VP1-VP8).

- VP7 является типоспецифическим протективным антигеном

- VРЗ обладает гемагглютинирующим свойством, отвечает за проникновение вируса в клетку и его вирулентность.

По белкам VP3 и VP7 ротавирусы делят на 4 серотипа.

Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи-

лактика

Источником заражения является человек.

Путь заражения – контактно-бытовой (фекально-оральный механизм). Не исключен и воздушно-пылевой путь передачи инфекции. Болеют главным образом дети от 6 мес. до двух лет.

Заболевание имеет сезонность – январь, февраль, встречаются случаи на протяжении всего года.

Вакцин против ротавирусной инфекции нет.

Клиника и иммунитет

Инкубационный период -- от 15 часов до 3-5 дней, но обычно менее 2-х суток.

Основным ранним симптомом является рвота, которая продолжается от 2 до 6 дней.

Испражнения обильные, водянистые, пенистые ярко-желтые, иногда мутно-белого цвета. Частота позывов до 20 раз в день. Дегидратация.

Лабораторная диагностика

Материал: испражнения.

1. Экспресс-диагностика:

а) РПГА с применением антительного ротавирусного диагностикума;

б) реакция коагглютинации;

в) тест-системы для обнаружения антигена с помощью ИФА.

г) обнаружение вируса в ИЭМ.

2. Серодиагностика:

Для обнаружения специфических АТ в парных сыворотках используют ИФА, РСК, РТГА, РН в культуре клеток .

Не культивируется в курином эмбрионе или экспериментальных животных, в клеточных культурах (клетки почек зелёных мартышек) полностью не реплицируется.

6

ГЕРПЕСВИРУСЫ

Таксономия

HERPESVIRIDAE семейство

1. Alphaherpesvirinae подсемейство (короткий цикл репродукции, быстрый рост, вирусы размножаются в эпителиальных клетках, вызывая цитолитическую продуктивную инфекцию, а в нейронах – персистирующую (хроническую или латентную инфекции)

►Вирус простого герпеса 1 типа (ГВЧ-1): лабиальный герпес, острый гингивостоматит, герпес кожи и слизистых, офтальмогерпес, фарингит, герпетическая экзема, герпетический энцефалит, пневмонии, возможно, генитальный герпес также. Особенность – персистируют длительное время в задних рогах спинного мозга и узлах тройничного нерва и периодически при ослаблении иммунитета вызывают рецидивы.

►Вирус простого герпеса 2 типа (ГВЧ-2): генитальный герпес, неонатальный герпес, диссеминированный герпес, играет роль в этиологии рака шейки матки. Особенность – персистируют длительное время в ганглиях крестцового отдела спинного мозга.

►Вирус ветряной оспы – опоясывающего герпеса (Varicella-Zoster virus VZV) или ГВЧ-3: ветряная оспа, опоясывающий лишай (рецидив на фоне иммунодефицита).

2. Betaherpesvirinae подсемейство (медленная репродукция в клетках эпителия, почек, слюнных желез, гландах, персистенция в лимфоцитах и макрофагах)

►Цитомегаловирус ЦМВ (ГВЧ-5): цитомегаловирусная инфекция или цитомегалия (у взрослого здорового человека протекает бессимптомно, на фоне иммунодефицита или после трансплантации органов возникают генерализованные инфекции с поражением почек, мозга, печени, лёгких, также является); может приводить к врождённым аномалиям.

3. Gammaherpesvirinae подсемейство (репродукция в лимфобластоидных клетках, оказывают лимфопролиферативное действие, вызывают латентную инфекцию)

►Вирус Эпштейна-Барра ВЭБ или ВГЧ-4 (инфекционный мононуклеоз, лимфома Беркитта, назофарингеальная карцинома)

►Герпесвирусы человека тип 6 и 7 (синдром хронической усталости, эритема новорождённых)

►Герпесвирус человека тип 8 (Саркома Капоши, ассоциированная с ВИЧ-инфекцией и СПИДом)

Морфология

и основные антигены

Крупные и сложные оболочечные вирусы сферической формы. Геном представлен линейной двухнитевой ДНК. Типоспецифическими антигенами являются гликопротеины наружной оболочки.

Репродукция вируса происходит в ядре клетки (приводит к фрагментации хроматина и даже полному разрушению ядра). Индуцируют образование синцития.

По типу поражений чувствительных клеток выделяют:

1. Продуктивная инфекция

2. Персистентная инфекция (хроническая или латентная/бессимптомная) - инфекцию с длительным персистированием в лимфоидных тканях и нервной системе

3. Трансформирующая инфекция (онкогенная трансформация заражённых клеток, особенно ВГЧ-2, ЭБВ, ВГЧ-8)

Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи-

лактика

Единственный хозяин – человек.

Пути передачи: ВГЧ-1 (воздушно-капельный и контактный), ВГЧ-2 (половой), ветряная оспа (воздушно-капельный и реже контактный), цитомегалия (воздушно-капельный путь, или в младенчестве от матери, или со слюной, через кровь).

Существует живая ослабленная вакцина для профилактики ветряной оспы. Существуют инактивированные вакцины, многократное введение которых уменьшает частоту рецидивов герпетической инфекции. Вакцин при цитомегалии нет.

Лабораторная диагностика

Диагностика инфекций простого герпеса

А) РАННЯЯ ДИАГНОСТИКА

1. Цитологический метод (соскоб из эпителия окрашивают по Романовскому-Гимзе и обнаруживают гигантские многоядерные клетки с внутриядерными включениями).

2. Экспресс-метод: РИФ для выявления антигенов.

3. Вирусологический метод: для выделения вируса используют

- куриные эмбрионы (заражают на хорион-аллантоисную оболочку, на которой появляются «оспины»)

- различные культуры клеток (типичное ЦПД – многоядерные клетки с внутриядерными включениями и круглоклеточная дегенерация)

- мышата-сосунки в мозг (гибель животных) или кролики в роговицу (кератит).

Идентификацию проводят в РН или РИФ.

Б) ПОЗДНЯЯ ИЛИ РЕТРОСПЕКТИВНАЯ ДИАГНОСТИКА

4. Серодиагностика (ИФА или РСК в парных сыворотках). Серодиагностика (РН, РСК, ИФА) ввиду значительной инфицированности популяции не представляет существенной диагностической ценности.

Вирусологическая диагностика ветряной оспы и опоясывающего лишая

1. Выделение вируса в культуре клеток с последующей идентификацией в РСК.

2. Серодиагностика – РСК (парные сыворотки).

3. Вирусоскопия обрботанных по Морозову мазков из содержимого везикул (тельца Арагана).

Вирусологическая диагностика цитомегаловирусной инфекции

1. Обнаружение крупных «цитомегаловирусных» клеток в моче и слюне.

2. Выделение вируса из мочи, слюны, крови и ликвора (культура клеток с последующей идентификацией в РСК и РН).

3. Серодиагностика (РСК, РН).