Микра / Частная микра / ОРТОМИКСОВИРУСЫ
.doc
7 |
ПИКОРНАВИРУСЫ (ЭНТЕРОВИРУСЫ) |
Таксономия |
Picornaviridae Род Enterovirus (также Rhinovirus, Aphtovirus, Cardiovirus, Hepatavirus) Всего род энтеровирусов человека включает 68 серотипов, в том числе: - полиовирусы (3 серотипа); - Коксаки А (23 серотипа); - Коксаки В (6 серотипов); - ECHO (32 серотипа); - энтеровирусы человека: 68-71 (4 серотипа). |
Морфология и основные антигены |
Pазмер 22-30 нм (самые мелкие РНК-содержащие вирусы). Геном - однонитевая нефрагментированная позитивная РНК; отсутствие суперкапсида. Тип симметрии - кубический, количество капсомеров – 60. Устойчивость к эфиру (нет липидов); устойчивость к желчи, а также к кислотам и щелочам (в диапазоне рН от 3,0 до 10,0); устойчивость во внешней среде. Вирус полиомиелита сферической формы. Капсид состоит из четырех белков: - VP1, VP2, VP3 - образуют внешнюю поверхность капсида, - VP4 – внутренний капсидный белок, специфический рецептор вируса. Гемагглютинирующими свойствами вирион не обладает. По антигенным признакам вирусы полиомиелита подразделяются на три типа: I, II, III. Наибольшей патогенностью для человека обладает полиовирус I типа – он причина эпидемий. Полиовирус III типа вызывает спорадические случаи, редко - эпидемии. Полиовирусы II типа чаще вызывают инаппарантные формы инфекции. Важнейшим свойством полиовирусов является их тропизм к нервной ткани, они поражают двигательные клетки серого вещества спинного мозга, разрушая их. |
Эпидемиоло-гия |
Эпидемиологические особенности вызываемых энтеровирусами болезней: 1) выраженная сезонность заболеваний (лето-осень); 2) фекально-оральный механизм распространения; 3) обнаружение вирусов в сточных водах; 4) выделение вируса из кишечника, носоглотки, ликвора и крови; 5) преимущественное поражение детей в возрасте до 12 лет; 6) широкое носительство среди здоровых людей. Источником полиомиелита является только человек. Основной механизм передачи - фекально-оральный. Воздушно-капельный способ заражения играет роль при эпидемических вспышках. Входные ворота при полиомиелите - слизистая оболочка полости рта и глотки. Основное место размножения -- эпителиальные клетки кишечника. |
Клиника и иммунитет |
Полиомиелит – воспаление серого вещества мозга. В течении болезни выделяют:
Различают 4 основные клинические формы полиомиелита: 1) инаппарантная (скрытая); 2) абортивная (малая болезнь); 3) непаралитическая (менингеальная), проявляющаяся серозным менингитом; 4) паралитический полиомиелит. Паралитическую форму в зависимости от локализации очага поражения разделяют на спинальную, бульбарную, понтинную (варолиев мост) и другие формы. Иммунитет стойкий. |
Лабораторная диагностика |
1. Вирусологический метод. Материал – фекалии, носоглоточные смывы, кровь. НЕ культивируют в эмбрионах или экспериментальных животных! Используют первичные или перевиваемые культуры клеток различных тканей человека и обезьян. Индикация – ЦПД (мелкозернистая дегенерация или феномен бляшкообразования. Идентификация – РН ЦПД в культуре ткани (для видимого эффекта используют ПРОБУ СОЛКА). Для установления типовых различий между штаммами используют методы молекулярной гибридизации, ПЦР, реакции с поликлональными и моноклональными сыворотками, секвенирование вирусного генома. 2. Серодиагностика. Используют РН в культуре ткани с парными сыворотками, полученными в острой стадии болезни и стадии реконвалесценции (РСК, ИФА). |
Профи- лактика |
1. Инактивированная вакцина Солка. Вакцина вводится внутримышечно и вызывает выработку антител классов IgM и IgG. Предупреждает развитие паралитических форм болезни. 2. Живая вакцина из аттенуированных Себином штаммов полиовирусов 3 типов На пероральное введение живой вакцины вырабатываются иммуноглобулины трех классов – IgM, IgG и IgA, которые защищают слизистые от инфицирования «дикими» штаммами вируса, вытесняя их тем самым из циркуляции. |
8 |
ПИКОРНАВИРУСЫ (Коксаки и ЭКХО) |
Таксономия (см. Энтеровирусы) |
Вирусы Коксаки по характеру патогенного действия на мышат-сосунков разделены на две группы:
Группа ECHO насчитывает 32 типа вирусов. Отличаются от вирусов полиомиелита отсутствием патогенности для обезьян, а от вирусов Коксаки – отсутствием патогенности для новорожденных мышей. Все они размножаются в культуре клеток почек обезьян и перевиваемых клетках амниона человека. |
Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи- лактика |
Единственным хозяином вируса в природе является человек. Основной механизм передачи – фекально-оральный, вирус может распространяться и воздушно-капельным путем. Вирусы могут длительно выживать в канализационных водах, на предметах обихода, в пищевых продуктах. Иммунитет типоспецифический. Вакцин нет. |
Клиника и иммунитет |
Патогенез заболеваний, вызываемых вирусами Коксаки и ECHO, сходен с патогенезом полиомиелита. Входные ворота -- слизистая оболочка носа, глотки, тонкого кишечника, где в эпителиальных клетках, в лимфоидной ткани происходит размножение этих вирусов. Сродство к лимфоидной ткани - характерная особенность этих вирусов. Вирусы Коксаки А и В и вирусы ECHO могут вызывать у человека : - Полиомиелитоподобные заболевания, - Асептический менингит, миелиты (вирусы Коксаки А и В; ECHO) - Эпидемическая миалгия - Борнхольмская болезнь (вирусы Коксаки А и В; ECHO) - Герпангина (Коксаки А и Коксаки В) - Энцефаломиокардиты новорожденных ( Коксаки В ).Летальность при этой форме инфекции – 60-80%. Кроме того Коксаки и ЕСНО вызывают: малую болезнь или летний грипп, гастроэнтериты, кореподобные и краснухоподобные экзантемы, острые респираторные заболевания, миокардиты. |
Лабораторная диагностика |
1. Вирусологический метод. Материал для исследования: фекалии, смывы и мазки из носоглотки, кровь, при асептических менингитах – цереброспинальная жидкость, в случае смерти больного исследуют кусочки ткани из разных органов. Заражают культуры клеток (полиовирусы, ECHO, Коксаки В и некоторые серовары Коксаки А), а также новорожденных мышей (Коксаки А). Идентификация вирусов – РИФ, РН, РТГА для гемагглютинирующих вирусов. 2. Серологическая диагностика Используют РН, РТГА, РСК, реакции преципитации в парных сыворотках от каждого больного. |
9 |
ВИРУСЫ ГЕПАТИТОВ А И Е |
Таксономия |
Род Hepatavirus из семейства Пикорнавирусов |
Морфология и основные антигены |
Вирион безоболочечный с кубическим нуклеокапсидом. Геном представлен однонитевой +РНК. Капсид имеет 32 капсомера, он образован тремя полипептидами (VP1-VP3). Капсидные белки объединяются в понятие «антиген вируса гепатита A». Четвертый структурный белок – VPg тесно связан с РНК. Вирус относительно устойчив к высокой температуре, к кислотам, жирорастворителям (отсутствуют липиды), дезинфицирующим средствам, хорошо переносит низкую температуру. Длительно сохраняется во внешней среде. При комнатной температуре он выживает несколько недель. |
Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи- лактика |
Источником инфекции является только человек. Механизм заражения - фекально-оральный (главными путями являются водный, а также бытовой и пищевой). |
Клиника и иммунитет |
Вирусные гепатиты – группа заболеваний с обязательным поражением гепатоцитов. Патогенез: Вирус с пищей и водой попадает в ЖКТ, где размножается в слизистой оболочке и мезентериальных лимфоузлах, затем проникает в кровь. Основная мишень действия – клетки печени, где в цитоплазме происходит репродукция вируса. Гепатоциты могут поражаться натуральными киллерами NK, которые в активированном состоянии взаимодействуют с гепатоцитами, вызывая их разрушение. Активация NK происходит под действием интерферона. Поражение гепатоцитов приводит к нарушению белкового, углеводного и пигментного обмена и сопровождается желтухой. Далее вирус с желчью попадает в просвет кишечника и выделяется с фекалиями за 12-14 дней до появления клинических симптомов и желтухи! Гепатит А считается преимущественно «детской инфекцией» (болеют дети до 14 лет). В этом возрасте инфекция часто протекает бессимптомно или в лёгкой клинической форме. Основная форма – острая (желтушная), но в очагах инфекции много безжелтушных и бессимптомных форм. Возможность хронического течения не показана. Иммунитет пожизненный. Вакцина против гепатита А – инактивированная. Для лечения – гаммаглобулин. |
Лабораторная диагностика |
Материал для исследования: кровь, фекалии. Фекалии для определения антигена вируса получают как можно раньше от начала острого периода. 1. Экспресс-диагностика. - Обнаружение вируса - метод ИЭМ - Метод гибридизации НК 2. Серодиагностика. Антитела к вирусу класса М (антиHAV-IgM) определяют методом ИФА или РИА (указывают на острую инфекцию). Выявляются у 100% больных. Сохраняются в течение 6-12 месяцев. Антитела к вирусу класса G сохраняются пожизненно, обеспечивая приобретенный иммунитет. Их выявление указывает на перенесённую в прошлом инфекцию. 3. Вирусологический метод в лабдиагностике не используют. Вирус хорошо размножается в организме обезьян. Недавно удалось получить культуру клеток для вируса – линия клеток почек зелёных мартышек, однако ЦПД выражено слабо.
|
ГЕПАТИТ Е |
►Возбудитель –вирус гепатита Е (HEV) – безоболочечный, с кубическим типом симметрии, сферической формы с шипами. Геном представлен однонитевой нефрагментироваиной позитивной РНК. ►На сегодняшний день – этот вирус входит в группу гепатит-Е-подобных вирусов. ► Источником инфекции является только человек. Механизм заражения - фекально-оральный (основной путь водный). Эндемичен для территорий с плохим уровнем водоснабжения (Юго-Восточная Азия, Северная Африка). ►95% гепатита Е протекает в лёгкой форме, персистенции вируса и хронизации, как и при гепатите А, не бывает! Тяжёлая форма болезни часто наблюдается у беременных. ►Лабораторная диагностика. Обнаружение антител класса IgM к антигенам HEV (ИФА) Ретроспективная диагностика - определение антител к вирусу гепатита Е в парных сыворотках крови методом ИФА Как и при гепатите А, в раннюю фазу болезни в крови примерно 75% больных можно выявить РНК HEV при помощи ПЦР. |
9 |
ВИРУСЫ ГЕПАТИТА В, С, D |
Таксономия |
Hepadnoviridae Род Hepadnovirus. |
Морфология и основные антигены |
Вирус гепатита В имеет сферическую форму и диаметр 42 нм. Суперкапсид вириона состоит из трех белков: главного (основного) S-белка (92%), большого (длинного) L-белка (1%) и среднего М-белка (4%). В составе вириона есть три основных антигена. 1. HBsAg - поверхностный (superficial) антиген. 2. HBcAg - сердцевинный антиген (соrе-антиген). 3. HBeAg – антиген присутствует в составе вириона и циркулирует в крови в свободном виде или в виде комплекса с антителом анти-HBe. Он выделяется в кровь из гепатоцитов при активной репликации HBV. Поверхностный антиген - HBsAg - существует в виде трех морфологически различных вариантов: представляет суперкапсид цельного вириона; в большом количестве встречается в виде частиц диаметром 20 нм, имеющих сферическую форму; в виде нитей длиной 230 нм. 2-х-нитевая кольцевая молекула ДНК («+»-нить на 50—80% короче «−»-нити) Вирус гепатита В обладает высокой устойчивостью:
Вирус инактивируется при кипячении в течение 30 мин., сухим жаром при 180 °С в течение 60 мин., при автоклавировании (120 °С). Вирус погибает при обработке Н2О2, хлорамином, формалином, фенолом |
Эпидемиоло-гия, иммунитет и профи- лактика |
Источник заражения вирусом гепатита В -- только человек. Вирус обнаруживается в различных секретах и экскретах: в слюне, носоглоточных выделениях, испражнениях, слезной жидкости, в сперме, менструальной крови и прочих. Заражение вирусом гепатита В практически возможно разными способами. Присутствие вируса в значимых концентрациях практически во всех биологических жидкостях, что и определяет множество естественных и искусственных путей передачи возбудителя. Основной механизм – парентеральный (через медицинские манипуляции, трансплацентарно, при половых контактах и др.). Иммунитет пожизненный. Два типа вакцин:
Курс состоит из 3 инъекций: 1 – сразу после рождения, 2 – через несколько месяцев, 3 – до конца 1 года жизни. Гамма-глобулин применяют для экстренной пассивной профилактики. |
Клиника и иммунитет |
Гепатит В - инфекционное вирусное заболевание человека с парентеральным механизмом передачи, характеризующееся поражением печени с развитием острого и хронического гепатита. Это наиболее опасная форма среди всех известных форм вирусных гепатитов Инкубационный период длится от 45 до 180 дней, в среднем составляет 60-90 дней. Клиническое течение гепатита В разнообразно. Болезнь может протекать: - в латентной форме, выявляемой лишь лабораторными методами, - транзиторной субклинической форме (около 65% случаев) - в типичной желтушной форме (10-15%) - в злокачественной форме, заканчивающейся летально. Выражена тенденция к переходу в хроническую форму (у 15% взрослых больных и у 90% новорожденных от больных матерей). Хронический В-гепатит является фактором риска развития цирроза и гепатоцеллюлярной гепатомы. |
Лабораторная диагностика (см. таб) |
Материал для исследования: кровь, биоптаты печени. 1. Экспресс-диагностика. - определение антигенов в крови (HBs-Ag – основной маркер острой или хронической формы, а также вирусоносительства; HBe-Ag – маркер острой формы гепатита при кратковременном выявлении или хронической при длительном выявлении; ДНК вируса – показатель инфицирования гепатитом В вирусом, свидетельствует о репликации вируса, выявляется в ПЦР) 2. Серодиагностика. - определение антител (antiHBc-IgM – главный маркер острой формы заболевания; тотальные антитела ко всем трём Аг – маркеры завершения острой формы, указывающие на формирование иммунитета, наличие только antiHBs IgG может быть результатом вакцинации или ранее перенесённой инфекции) Вирусологический метод не применяется! |
Гепатит С (особенности) |
►Flaviviridae, род Hepacаvirus. ►Мелкий оболочечный вирус. Геном представлен одноцепочечной плюс-РНК. HCV-белки - три структурных С, E1 и E2 и четыре неструктурных (участвуют во внутриклеточной репликации вируса). ◘ Выделяют 6 генотипов вируса, которые также подразделяются на субтипы. Вирус гепатита С отличается высокой склонностью к мутациям, что определяет возможность одновременного инфицирования несколькими близкородственными вирусами. ►Источником инфекции является только человек. Распространение вируса происходит парентеральным механизмом: трансфузионно при переливании крови и ее препаратов; инструментальным путем в результате занесения зараженной вирусом крови в организм здоровых людей, от матери плоду. ►Клиническая картина сходна с таковой при гепатите В, однако протекает легче и характеризуется относительно быстрым выздоровлением, желтуха только у 25%. Однако 50% форм инфекции приводят к формированию хронического гепатита, пятая часть случаев которого заканчивается циррозом и раком. ►Материал для исследования: кровь, биоптаты печени. Уровень вирионных частиц и вирусных антигенов ниже порога чувствительности современных иммунохимических реакций . «Золотым стандартом» служит обнаружение вирусоспецифических РНК при помощи ПЦР. Главный диагностический критерий – определение антител в крови. Скрининговые тесты – определение Анти-HCV в ИФА с использованием тест-систем третьего поколения. Подтверждающие тесты. Для подтверждения наличия антител к вирусу гепатита С в образцах сыворотки с первично положительным результатом ИФА проводятся : ◘постановка ИФА с раздельным определением антител к различным белкам вируса, ◘постановка иммуноблоттинга с использованием рекомбинантных антигенов |
Гепатит D (особенности) |
►Неклассифицируемый вирус, относящийся к группе сателлит-подобных (напоминает вироиды) вирусных агентов ►Дефектный вирус (дельта-агент), мелкий (36 нм), геном - кольцевая однонитевая РНК. Суперкапсид дельта-вируса состоит из поверхностного антигена гепатита В (HBs-Ag), поэтому является вирусом-хелпером (помощником) HBV. Данный вирус является дефектным, так не способен размножаться самостоятельно в отсутствие вируса гепатита В. В составе HDV имеется два белка, обладающих антигенной специфичностью: ◘поверхностный - HBsAg, кодируемый геномом HBV, ◘ внутренний белок HDAg, кодируемый геномом HDV. ►Источник инфекции – человек. Передача происходит парентерально и от матери к плоду. ►Присоединение дельта-инфекции к гепатиту В приводит к развитию тяжёлых злокачественных форм болезни, развитию хронических форм болезни, раннему формированию цирроза печени. Формы заражения: 1) ко-инфекция (одномоментное инфицирование HVB и HVD; 2) суперинфекция (заражение HVD носителем вируса гепатита В) ►Лабораторная диагностика. Материал для исследования: кровь инфицированных вирусом гепатита В, носителей HBsAg. 1. Экспресс-диагностика - Определение антигена HDV (обнаруживается при острой форме и персистирует при хронической) - Выявление генома HDV – ПЦР 2. Серодиагностика. - анти-HDV-IgM с помощью ИФА в течение нескольких недель при остром гепатите, затем они исчезают. Персистенция характерна для хронического. - анти-HDV-IgG сохраняются в течение длительного времени. Этот маркер определяют у носителей HBsAg с целью выявления уровня распространения HDV. ►Профилактика, как при гепатите В. |
Гепатит G |
Относится к неклассифицируемым вирусам. Сложный РНК-содержащий вирус. Источник – человек. Возможны острые и хронические формы. Механизм передачи – парентеральный (через медицинские манипуляции и при половых контактах). От матери к плоду не передаётся! Случаи моноинфекции наблюдаются редко. Клиника мало изучена (не доказана роль при карциноме, не вызывает аутоиммунный гепатит). Реплицируется не в клетках печени, а в мононуклеарных клетках крови! Лабораторная диагностика: выделение РНК. |
ТТ-вирус |
Circinoviridae (TTV-transfusion-transmitted virus) Мелкий, простой, ДНК-однонитевой вирус. Вызывает посттрансфузионный гепатит. Место репликации – печень, обнаруживается также в слюне, слёзной и семенной жидкости, в вагинальном секрете, в желчи и фекалиях. Передаётся парентерально и фекально-орально! Клиника сходна с гепатитом G. Не вызывает острый и хронический гепатит, карциному, однако патогенетическую роль некоторых генотипов ТТ-вируса в определённых условиях не могут исключить. Основной метод диагностики – обнаружение ДНК вируса, а также антител класс М. Распространённость TTV-инфекции достигает почти 100% в некоторых регионах! |
СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ МАРКЕРЫ ГЕПАТИТА В ПРИ РАЗЛИЧНЫХ КЛИНИЧЕСКИХ СИТУАЦИЯХ
Клиническая СИТУАЦИЯ |
Геном (определяется в ПЦР при экспресс-диагностике) |
Антигены (определяются в крови при экспресс-диагностике в РИФ, РИА, ИФА, РНГА, РП и др.) |
Антитела (определяются в сыворотке при серодиагностике в РИФ, РИА, ИФА, РНГА и др.) |
Острый Гепатит (маркеры репликации) |
ДНК |
HBs-Ag HBe-Ag |
antiHBc-IgM |
Хронизация Процесса (предрасположенность - ранний детский возраст, наличие иммунодефицитов и др.) |
ДНК (высокий уровень на начальной стадии инфекции) |
HBs-Ag HBe-Ag (высокие уровни на начальной стадии инфекции, а также длительная персистенция HBs-Ag более 6 месяцев, HBe-Ag более 10 недель) |
antiHBc-IgM (длительная персистенция при отсутствии antiHBs)
|
Ранняя Фаза Разрешения Гепатита В |
- |
- |
antiHBc-IgG |
Стадия Реконвалесценции После Гепатита В |
- |
- |
antiHBc-IgG antiHBs antiHBe |
Здоровое Носительство |
- |
HBs-Ag |
antiHBc-IgG antiHBs (+\-)
|
После Вакцинопрофилактики |
- |
- |
antiHBs
|
Острый Гепатит, Вызванный Негативным Мутантом HBe-Ag |
ДНК |
HBs-Ag
|
antiHBc-IgM antiHBc-IgG antiHBs
|