Физа / Физа / Практика / Практические навыки

а) добавить в пробирку несколько капель крахмала и амилазы слюны; б) нажать кнопку «Старт» на термостате для нагревания содержимого пробирки до температуры оптимальной для действия амилолитических

ферментов (38°С);

в) добавить в пробирку несколько капель NaOH и CuSO4;

г) нажать кнопку «Нагреть образец». Содержимое пробирки закипит. Обратить внимание на цвет содержимого пробирки. Красный цвет указывает, что произошло расщепление углевода на мономеры (реакция Троммера);

д) нажать кнопку «Перезапуск эксперимента» и повторить эксперимент с сахарозой и целлюлозой.

Сделать вывод о субстратной специфичности амилазы слюны.

Лабораторная работа 17.3. Влияние уровня рН на действие пепсина

(Самостоятельная работа студентов) Виртуальный эксперимент

Цель работы: демонстрация влияния уровня рН на действие пепсина. Для работы необходима: компьютерная программа «Inter NICHE»,

раздел «Пищеварительная система».

Ход работы

Открыть в компьютере d:\ Inter NICHE (F) LUPRAFISIM. После появ-

ления заставки LuPraFi-Sim, войти в версию на русском или английском языке (для иностранных студентов). Через содержание открыть «Разделы». Открыть раздел «Пищеварительная система», выбрать эксперимент «Влияние уровня рН на действие пепсина» и выполнить в соответствии с программой:

1.Нажатием кнопки «Технология» ознакомиться с методикой выполнения виртуального эксперимента.

2.Нажать кнопку «Практическая часть» и выполнить эксперимент в соответствии с программой:

а) добавить в пробирку с яичным белком несколько капель пепсина и соляной кислоты;

б) нажать кнопку «Старт» на термостате для нагревания содержимого пробирки до температуры оптимальной для действия пепсина (38°С);

в) по истечению инкубационного периода (3 часа) обратить внимание на время необходимое для расщепления белка (кусочки яичного белка исчезают в пробирке);

г) нажать кнопку «Перезапуск эксперимента» и повторить эксперимент вначале без добавления соляной кислоты, а затем без добавления пепсина.

Сделать вывод о влияния уровня рН на действие пепсина.

51

ЗАНЯТИЕ 18. ПИЩЕВАРЕНИЕ В КИШЕЧНИКЕ

Лабораторная работа 18.1. Переваривание белка желудочным соком. Роль соляной кислоты

(Самостоятельная работа студентов с участием лаборанта)

В желудочном соке содержится несколько форм протеолитических ферментов, для которых характерен различный спектр рН их оптимального действия, что лежит в основе поддержания высокой протеолитической активности в желудке в широком диапазоне рН.

Цель работы: исследовать условия действия ферментов желудочного сока и роли в данном процессе соляной кислоты.

Для работы необходимы: желудочный сок, 0,5% раствор соляной кислоты, 10% раствор гидроокиси натрия, 0,1% раствор сернокислой меди, сода питьевая, пробирки, штатив, термостат, спиртовка, держалка.

Ход работы

Пронумеровать 4 пробирки, в 3 из которых налить по 2 мл желудочного сока, в 4-ю ― 2 мл соляной кислоты. Во 2-ю пробирку добавить питьевой соды до полной нейтрализации НСl (прекращение выделения пузырьков). Желудочный сок в 3-й пробирке медленно довести до кипения (инактивировать ферменты). Во все 4 пробирки внести по небольшому кусочку фибрина и поставить их в термостат при t = 38°С на 15 мин. После термостатирования пробирки охладить и проделать биуретовую реакцию (прилить в каждую пробирку 7 капель раствора гидроокиси натрия и 4 капли раствора сернокислой меди). Результаты работы занести в таблицу 10.

Таблица 10 ― Результаты влияния различных факторов на ферментативные свойства желудочного сока

Впробирках с нерасщепившимся белком содержимое окрашивается в сине-фиолетовый цвет, а с продуктами гидролиза белка пептонами ― в ро- зово-фиолетовый.

Ввыводе отметить оптимальные условия переваривания белков желудочным соком и роль HCI в данном процессе.

52

Лабораторная работа 18.2. Влияние желчи на жиры

(Самостоятельная работа студентов с участием лаборанта)

Желчь обладает способностью эмульгировать жиры, поступившие с пищей в желудочно-кишечный тракт, что способствует увеличению поверхности взаимодействия субстрата (жира) с ферментом (липазой), в результате чего ускоряется процесс гидролиза.

Цель работы: изучить эмульгирующее действие желчи на жиры. Для работы необходимы: свежая желчь, растительное масло, вода,

пипетки, предметное стекло, стеклянная палочка, лупа или микроскоп.

Ход работы

Нанести на чистое предметное стекло пипеткой каплю желчи и рядом каплю воды. К каждой капле добавить растительное масло в небольшом количестве, тщательно перемешать стеклянной палочкой, рассмотреть содержимое капельсразуичерез10−15 минприпомощилупыилимикроскопа.

Описать полученное распределение жира, объяснить различные результаты в каплях желчи и воды.

Лабораторная работа 18.3. Роль желчи в активности липазы поджелудочной железы

(Самостоятельная работа студентов) Виртуальный эксперимент

Цель работы: демонстрация роли желчи в обеспечении оптимального режима активности липазы поджелудочной железы.

Для работы необходима: компьютерная программа «Inter NICHE», раздел «Пищеварительная система».

Ход работы

Открыть в компьютере d:\ Inter NICHE (F) LUPRAFISIM. После появ-

ления заставки LuPraFi-Sim, войти в версию на русском или английском языке (для иностранных студентов). Через содержание открыть «Разделы». Открыть раздел «Пищеварительная система», выбрать эксперимент «Демонстрация действие липазы поджелудочной железы в зависимости от наличия или отсутствия желчи» и выполнить в соответствии с программой:

1.Нажатием кнопки «Технология» ознакомиться с методикой выполнения виртуального эксперимента.

2.Нажать кнопку «Практическая часть» и выполнить эксперимент в соответствии с программой:

а) добавить в пробирку несколько капель растительного масла, желчи

илипазы поджелудочной железы;

53

б) нажать кнопку «Старт» на термостате для нагревания содержимого пробирки до температуры оптимальной для действия липазы (38°С);

в) по истечению инкубационного периода добавить в пробирку несколько капель фенолфталеина и обратить внимание на цвет содержимого пробирки. Желтый цвет указывает, что произошло расщепление липидов и среда является кислой за счет наличия жирных кислот;

г) нажать кнопку «Перезапуск эксперимента» и повторить эксперимент без добавления желчи. Красный цвет пробы после добавления фенолфталеина свидетельствует о том, что не произошло расщепление липидов и среда остается щелочной.

Сделать вывод о роли желчи в обеспечении активности липазы поджелудочной железы.

54

О Б М Е Н В Е Щ Е С Т В И Э Н Е Р Г И И

ЗАНЯТИЕ 19. ОБМЕН ВЕЩЕСТВ И ЭНЕРГИИ. ТЕРМОРЕГУЛЯЦИЯ

Лабораторная работа 19.1. Расчет основного обмена по таблицам Гарриса-Бенедикта

Расход энергии в состоянии мышечного покоя, натощак и при температуре 18°С (зона температурного комфорта) соответствует основному обмену. Он отражает минимальный уровень расхода энергии для поддержания жизнедеятельности всех систем организма. Величина основного обмена зависит от возраста, пола, массы и длины тела. С учетом указанных факторов уровень основного обмена рассчитывается по специальным таблицам.

Цель работы: освоить методику определения основного обмена по таблицам и определить его величину у испытуемого.

Для работы необходимы: ростомер, весы, таблицы для определения основного обмена. Объект исследования ― человек.

Ход работы

С помощью весов определяют массу тела испытуемого и при помощи ростомера измерить его длину. Для расчета основного обмена используют таблицы Гарриса-Бенедикта (таблицы 11, 12) с учетом пола испытуемого, в связи с тем, что уровень основного обмена у мужчин в среднем на 10% выше, чем у женщин.

Например, испытуемый мужчина в возрасте 27 лет, длиной тела 160 см, массой 74 кг.

Таблицы состоят из двух частей ― А и Б. В части А необходимо найти массу испытуемого и рядом число 1084. В таблице Б по горизонтали найти возраст (27 лет), а по вертикали длину тела (160 см). На пересечении граф возраста и длины тела находится цифра 618. Суммируя оба найденных числа, получают 1084 + 618 =1702 ккал. Используя коэффициент перерасчета, выражают результат в килоджоулях

(1702×4,1868 = 7125,93 кДж).

В выводе отметить найденную по таблицам величину «должного» основного обмена испытуемого.

55

Таблица11 ―Расчетосновногообменаумужчинсучетоммассытела(частьА)

Таблица11 ―Расчетосновногообменаумужчинсучетомвозрастаироста(частьБ)

56

Таблица12 ―Расчетосновногообменауженщинсучетоммассытела(частьА)

Таблица12 ―Расчетосновногообменауженщинсучетомвозрастаироста(частьБ)

57

Лабораторная работа 19.2. Расчет отклонения величины основного обмена по формуле Рида и номограмме

На основании взаимосвязи между частотой сердечных сокращений, величиной артериального давления и образованием в организме тепла представляется возможным вычислить процент отклонения значений основного обмена от«должного». ДанныйрасчетпроизводитсяприпомощиформулыРида.

Цель работы: освоить методику определения отклонения величины основногообменаот«должной» иопределитьданныйпоказательуиспытуемого.

Для работы необходимы: сфигмоманометр, фонендоскоп, секундомер. Объект исследования ― человек.

Ход работы

Определить у испытуемого частоту пульса, артериальное давление (по Короткову) не менее 3 раз с промежутками 1−2 минуты по возможности соблюдая условия, необходимыедляопределенияосновногообмена(через12 часовпосле приемапищи, лежаврасслабленномсостоянии, притемпературе18°С.

Процент отклонения (ПО) от нормы определяется по формуле Рида:

ПО = 0,75×(ЧП + ПД ×0,74) −72 ,

где: ПО ― процент отклонения основного обмена от нормы; частота пульса; ПД ― пульсовое давление (разность величины систолического и диастолического

давления в мм рт.ст.).

Вформулу подставить среднее арифметическое из 3-х измерений частоты пульса и артериального давления.

Определение отклонения величины основного обмена упрощается при использовании специальной номограммы (рисунок 12). Цифры на месте пересечения линии, проведенной через показатели частоты пульса

ипульсового давления со средней линией, отражает процент отклонения основного обмена от нормы.

Допустимое отклонение величины основного обмена от «должной» составляет 10%.

Ввыводе отметить величину отклонения основного обмена от нормы.

Лабораторная работа 19.3. Измерение температуры тела человека

Физиологические механизмы терморегуляции постоянно поддерживают температуру тела человека на оптимальном уровне. Изменение температуры является важным показателем состояния здоровья человека.

Измерять ее можно в подмышечной впадине, полости рта и ректально при помощи ртутного медицинского термометра или электротермометра. При этом необходимо выдержать определенное время экспозиции термометра в точке измерения.

58

Рисунок 13 ― Зависимость показателей термометра от времени его экспозиции

Лабораторнаяработа19.4. Влияниенекоторыхбиологически активныхвеществнаметаболизм

(Самостоятельная работа студентов) Виртуальный эксперимент

Цель работы: продемонстрировать влияние тироксина, тиреотропина и пропилтиурацила на метаболизм.

Для работы необходима: компьютерная программа «Inter NICHE», раздел «Мышечная система».

Ход работы

Открыть в компьютере d:\ Inter NICHE (F) LUPRAFISIM. После появ-

ления заставки LuPraFi-Sim, войти в версию на русском или английском языке (для иностранных студентов). Через содержание открыть «Разделы». Открыть раздел «Эндокринная система», выбрать эксперимент «Влияние тироксина, тиреотропина и пропилтиурацила на метаболизм» и выполнить

всоответствии с программой:

1.Нажать кнопку «Калориметрия» ознакомиться с методами определения энергозатрат организма.

2.Нажать кнопку «Экспериментальное оборудование» и ознакомиться с устройством оборудования и выполнить эксперимент в соответствии с методикой:

а) поместить нормальную крысу в камеру и нажать кнопку старт. В течении 60 секунд наблюдать за тем как уменьшается уровень жидкости в левой части манометра по мере того как в дыхательной камере поглощается кислород;

б) по истечении 60 секунд добавить в камеру кислород до тех пор, пока уровень жидкости в манометре с обеих сторон не станет одинаковым;

в) определить коэффициент обмена веществ по формуле:

Коэффициент = О2(мл) × 60 × 1000/масса тела.

60