
- •Тетрадь
- •Занятие 1 Тема: микробиологическая лаборатория. Методы изучения микроорганизмов.
- •Формы бактерий
- •Этапы приготовления мазков-препаратов.
- •Демонстрационные препараты.
- •Занятие 2 Тема: структура бактериальной клетки и методы ее изучения.
- •Техника окраски по Граму.
- •Техника окраски спор по методу Ожешко.
- •Техника окраски по методу Циля-Нельсена.
- •Прижизненная (витальная) окраска.
- •Демонстрационные препараты.
- •Занятие № 4 Тема: систематика и классификация грибов и простейших. Общая характеристика и биология эукариотических микроорганизмов.
- •Занятие № 5 Тема: физиология микроорганизмов. Метаболизм и питание микробов. Питательные среды.
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Исследуемый материал
- •Изучение выросших колоний
- •Занятие № 6 Тема: физиология микроорганизмов. Ферменты бактерий. Антимикробное действие физических факторов. Методы стерилизации.
- •Основные методы стерилизации
- •Ряд гисса (короткий)
- •Занятие № 7 Тема: дыхание микроорганизмов. Выделение чистой культуры анаэробов. Рост и размножение микробов. Дезинфекция.
- •Методы культивирования анаэробов. Физические методы
- •Химические методы
- •Биологические методы
- •Методы выделения чистой культуры
- •Формы изменчивости
- •Генетическая изменчивость, наследственная
- •Опыт коньюгации:
- •Демонстрационные препараты
- •Имеет ген резистентности к стрептомицину Опыта по выявлению Col-плазмид.
- •Занятие № 10 Тема: бактериофаг. Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Практическое применение явления бактериофагии.
- •Титрование бактериофага на жидких средах (метод Аппельмана).
- •Определение специфичности бактериофага (метод Отто).
- •Титрование бактериофага на жидких средах (метод Аппельмана).
- •Седиментационный метод.
- •Определения микробного числа воды.
- •Метод мембранных фильтров.
- •Демонстрационный препарат
- •Метод титрования.
- •Санитарно-микробиологического состояния среды
- •Микробное число - 4
- •Возбудитель дифтерии
- •Определение коли-титра в молоке и других молочных продуктах (гост 9225-84)
- •Мазок микрофлоры рук
- •Занятие № 14 Тема: учение об инфекций (продолжение). Факторы патогености микроорганизмов. Определение факторов патогенности.
- •Занятие № 15 Тема: Микробиологические и молекулярно-биологические основы химиотерапий инфекционных заболеваний. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков.
- •Определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест - системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам.
Основные методы стерилизации
Метод стерилизации |
Аппарат |
Режим стерилизации (время, t°С, давление, кратность) |
Надежность (что остается) |
Стерилизуемые материалы |
Прокаливание на огне |
Спиртовка газ.горелка |
Однократно до покраснения |
Полная |
Предметное стекло, пинцет |
Лучевая стерилизация |
Бактерицидная лампа |
200-300мкм |
Бактерии |
Вакцина, сыворотки |
УЗ |
УЗ-й дезинтеграл |
20000Гц |
Полная |
Пищевые продукты и др.предметы |
Кипячение |
Стерилизатор |
30-45’+1%р-р соды t=100 |
Бактерии, Вирусы гепатита |
Инструменты, шприцы, иглы |
Сухим жаром |
Сухожаровой шкаф |
|
Неполная |
Стекло, вата, марля, чашки Петри |
Пастеризация |
Пастеризатор |
t=50-60 15-30’ t=70-80 10-15’ |
Споры |
Молоко, вина |
Фильтрование |
Фильтр |
Нагревание под давлением через поры |
Вирусы |
Сыворотка, лекарственные средства |
Паром |
|
|
|
|
1.под паром |
Автоклав |
t=100 15-20 p=1 Атм p=2 Атм t=138 |
Споры полная |
Инструменты, питательные среды
|
2.текуч.паром |
Аппарат Коха |
t=100 30-40’ |
Споры |
Питательные среды |
3.дробная стерилизация |
Водяная баня |
T=100 20-30’ 3дня |
Споры |
Желатин, молоко |
Ряд гисса (короткий)
Кишечная палочка
Возбудитель брюшной тифа
Возбудитель паратифа
А
Возбудитель паратифа
В
лактоза
глюкоза мальтоза манит сахароза
МПБ
расщепление расщепление расщепление
углеводов
углеводов
углеводов
отсутствует до кислоты до кислоты
и газа
Занятие № 7 Тема: дыхание микроорганизмов. Выделение чистой культуры анаэробов. Рост и размножение микробов. Дезинфекция.
Цель занятия: изучить морфологию анаэробов, освоить методы культивирования анаэробов и методы выделения чистой культуры анаэробов, продолжить выделение чистой культуры аэробов (3-й день).
Методы культивирования анаэробов. Физические методы
1. Кипячение питательной среды на водяной бане в течение 15-20 мин, с последующим охлаждением до 45-50°С.
После посева питательную среду заливают стерильным вазелиновым маслом или парафином.
2. Посев в высокий столбик плотной или полужидкой питательной среды.
3. Эвакуационно-заместительный метод заключается в удалении воздуха из (анаэростатов, анаэробных боксов) с помощью вакуумного насоса с последующей заменой его инертным газом (азот, аргон, гелий). Для поглощения водных паров на дно анаэростата помещают 5-6 г хлористого кальция, 10-12 г силикогеля или 20-30 г хлористого натрия.
Химические методы
1. Применение щелочных растворов пирогаллола для поглощения кислорода в замкнутой воздушной среде. Для поглощения кислорода из 220 мл воздуха применяют смесь, состоящую из 1 мл 20% раствора пирогаллола и 1 мл насыщенного раствора карбоната натрия (Na2CO3).
2. Для связывания остатков кислорода в предназначенных для роста анаэробов питательных средах используют вещества-редуценты, к которым относятся тиогликолевая кислота, тиогликолят натрия (0,01 – 0,02%), аскорбиновая кислота (0,1%), различные сахара (0,1 – 3%), цистин и цистеин (0,03 – 0,05%), муравьинокислый натрий (0,25 – 0,75%) и др.