- •Тетрадь
- •Занятие 1 Тема: микробиологическая лаборатория. Методы изучения микроорганизмов.
- •Формы бактерий
- •Этапы приготовления мазков-препаратов.
- •Демонстрационные препараты.
- •Занятие 2 Тема: структура бактериальной клетки и методы ее изучения.
- •Техника окраски по Граму.
- •Техника окраски спор по методу Ожешко.
- •Прижизненная (витальная) окраска.
- •Техника окраски по методу Циля-Нельсена.
- •Демонстрационные препараты.
- •Занятие № 4 Тема: систематика и классификация грибов и простейших. Общая характеристика и биология эукариотических микроорганизмов.
- •Занятие № 5 Тема: физиология микроорганизмов. Метаболизм и питание микробов. Питательные среды.
- •Этапы приготовления питательных сред
- •Исследуемый материал
- •Изучение выросших колоний
- •Занятие № 6 Тема: физиология микроорганизмов. Ферменты бактерий. Антимикробное действие физических факторов. Методы стерилизации.
- •Основные методы стерилизации
- •Ряд гисса (короткий)
- •Занятие № 7 Тема: дыхание микроорганизмов. Выделение чистой культуры анаэробов. Рост и размножение микробов. Дезинфекция.
- •Методы культивирования анаэробов. Физические методы
- •Химические методы
- •Биологические методы
- •Методы выделения чистой культуры
- •Формы изменчивости
- •Генетическая изменчивость, наследственная
- •Опыт коньюгации:
- •Демонстрационные препараты
- •Имеет ген резистентности к стрептомицину Опыта по выявлению Col-плазмид.
- •Занятие № 10 Тема: бактериофаг. Фазы взаимодействия фага с бактериальной клеткой. Практическое применение явления бактериофагии.
- •Титрование бактериофага на жидких средах (метод Аппельмана).
- •Определение специфичности бактериофага (метод Отто).
- •Титрование бактериофага на жидких средах (метод Аппельмана).
- •Седиментационный метод.
- •Определения микробного числа воды.
- •Метод мембранных фильтров.
- •Демонстрационный препарат
- •Метод титрования.
- •Санитарно-микробиологического состояния среды
- •Микробное число - 4
- •Возбудитель дифтерии
- •Определение коли-титра в молоке и других молочных продуктах (гост 9225-84)
- •Мазок микрофлоры рук
- •Занятие № 14 Тема: учение об инфекций (продолжение). Факторы патогености микроорганизмов. Определение факторов патогенности.
- •Занятие № 15 Тема: Микробиологические и молекулярно-биологические основы химиотерапий инфекционных заболеваний. Определение чувствительности бактерий к антибиотикам методом дисков.
- •Определение чувствительности бактерий к антимикробным препаратам методом серийных разведений.
- •Микротест - системы для определения чувствительности к антимикробным препаратам.
Формы бактерий
1.Шаровидные
-микрококки (располагаются одиночно и беспорядочно)
-диплококки (имеют бобовидную форму, располагаются в виде цепочки)
-стафилококки образующиеся клетки располагаются в виде грозди винограда
-тетракокки
2.Палочковидные
- монобактерий (располагаются одиночно и беспорядочно)
- диплобактерий (располагаются попарно
-стрептобактерии - располагаются цепочкой
3.Извитые бактерий
-вибрионы, спириллы, спирохеты
Этапы приготовления мазков-препаратов.
- нагревают до покраснения бактериальную петлю в пламени горелки;
- берут пробирку с исследуемой культурой в левую руку так, чтобы видеть поверхность среды; вращательным движением вынимают пробку из пробирки, прижимая ее мизинцем и безымянным пальцами правой руки к ладони;
- обжигают край пробирки, осторожно вводят петлю и берут исследуемый материал;
- вынимают петлю, обжигают край пробирки и закрывают пробкой.
- взятый материал осторожно распределяют по предметному стеклу тонким слоем, после чего бактериальную петлю стерилизуют в пламени спиртовки;
- если препарат готовят из бактериальной культуры, выращенной на плотной среде, то на предметное стекло предварительно наносят каплю стерильного физиологического раствора
- мазки высушивают на воздухе при комнатной температуре или в токе теплого воздуха, держа предметное стекло высоко над пламенем горелки. Нельзя допускать закипания материала, т.к. при этом может нарушиться структура микроорганизмов.
- фиксация препарата: высушенные мазки подвергают термической (предметное стекло (мазком вверх) проводят несколько раз через пламя горелки) или химической (фиксирующие растворы: формалин, спирты, глутаральдегид, жидкость Карнау, ацетон, пары осмиевой кислоты) обработке, в результате которой бактерии погибают и плотно прикрепляются к поверхности стекла.
Демонстрационные препараты.



Кишечная палочка Стафилококки
Окраска: фуксин-водный Окраска: метил.синий
Занятие 2 Тема: структура бактериальной клетки и методы ее изучения.
Цель занятия: изучить структурные особенности прокариотических микроорганизмов, овладеть сложными методами окраски для выявления структурных компонентов бактериальной клетки.
Техника окраски по Граму.
- окрасить мазок генциан-виолетом (2 мин, через фильтровальную бумагу);
- бумагу удалить, оставшуюся краску слить;
- окрасить мазок раствором Люголя (1 мин);
- раствор Люголя слить и нанести несколько капель чистого 96% спирта (на 30-40 с осторожно покачивая стеклом);
- тщательно смыть спирт водой;
- окрасить водным фуксином 2 мин);
- промыть водой и высушить при помощи фильтровальной бумаги.
Мазок поместить на предметный столик микроскопа, нанести в центр каплю иммерсионного масла, промикроскопировать. Зарисовать грамположительные и грамотрицательные микроорганизмы.
Техника окраски спор по методу Ожешко.
- нанести несколько капель 0,5% раствора соляной кислоты на нефиксированный мазок и нагреть до появления паров (2-3 мин);
- слить кислоту, промыть водой, высушить;
- зафиксировать в пламени;
- окрасить по методу Циля-Нельсена (при этом споры окрашиваются красный цвет, а вегетативные формы – в синий).
