
ГФ 11-1
.pdfРасположение растворов стандарта и испытуемого образца
при трехдозном варианте метода диффузии в агар
------ |
T-------------------------- |
|
|
|
|
T----- |
|
T-------------------------- |
|
|
|
|
|
|
¬ |
|
|
¦Номер ¦Порядок внесения растворов |
¦Номер ¦Порядок внесения растворов |
¦ |
|
||||||||||||||
¦чашек ¦ |
|
в цилиндры |
|
¦чашек ¦ |
|
|
в цилиндры |
|
|
¦ |
|
||||||
¦ |
+--- |
T---T---T |
----T |
----T |
----+----- |
|
+---- |
|
T---- |
T--- |
T---T--- |
T---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ 1 |
¦ 2 |
¦ 3 |
¦ 4 |
¦ 5 |
¦ 6 ¦ |
|
¦ 1 |
¦ 2 |
¦ 3 |
¦ 4 ¦ 5 ¦ |
6 ¦ |
|||||
+----- |
+---+---+---+---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ S¦ U ¦ |
||||||
¦1 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ D1 |
¦ D2 |
¦ |
17 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D1 ¦ D3¦ |
D2 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ S ¦ U¦ U ¦ |
||||||
¦2 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D1 |
¦ D3 |
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ |
18 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D2 ¦ D3¦ |
D1 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ S ¦ U¦ U ¦ |
||||||
¦3 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ D1 |
¦ |
19 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D2 ¦ D1¦ |
D3 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ U¦ S ¦ |
||||||
¦4 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D1 |
¦ D3 |
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ |
20 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D3 ¦ D1¦ |
D2 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ U¦ S ¦ |
||||||
¦5 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ D3 |
¦ |
21 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D1 |
¦D3 ¦ D3¦ |
D2 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ U¦ S ¦ |
||||||
¦6 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D3 |
¦ D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ |
22 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D2 ¦ D1¦ |
D3 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ U¦ S ¦ |
||||||
¦7 |
¦D1 |
¦D3 |
¦ D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ |
23 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D1 |
¦D2 ¦ D3¦ |
D3 |
¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
|
|
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ U¦ S ¦ |
||||||
¦8 |
¦D1 |
¦D3 |
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ D1 |
¦ D2 |
¦ |
24 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D3 |
¦ |
D1¦ |
D2 |
¦ |
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
+----- |
+---+---+---+ |
---- |
+ |
----+ |
----+ |
----- |
+ |
---- |
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
|
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ U¦ S ¦ |
||||
¦9 |
¦D1 |
¦D3 |
¦ D2 |
¦ D3 |
|
¦ D2 |
¦ D1 |
¦ |
25 |
¦ |
D1 |
¦D2 |
¦D3 |
¦D1 ¦ D3¦ D2 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ U |
|
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ S¦ U ¦ |
||||
¦10 |
¦D1 |
¦D3 |
¦ D2 |
¦ D1 |
|
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ |
26 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D1 |
¦D2 ¦ D3¦ D2 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
|
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ S ¦ U¦ U ¦ |
||||
¦11 |
¦D1 |
¦D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
|
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ |
27 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D2 |
¦D3 ¦ D2¦ D1 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
|
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ S ¦ U¦ U ¦ |
||||
¦12 |
¦D1 |
¦D1 |
¦ D3 |
¦ D2 |
|
¦ D3 |
¦ D3 |
¦ |
28 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D3 |
¦D2 ¦ D1¦ D2 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ S |
|
¦ U |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ U¦ S ¦ |
||||
¦13 |
¦D1 |
¦D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
|
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ |
29 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D1 |
¦D3 ¦ D2¦ D2 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
|
¦ U |
¦ S ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ U¦ S ¦ |
||||
¦14 |
¦D1 |
¦D1 |
¦ D3 |
¦ D2 |
|
¦ D3 |
¦ D2 |
¦ |
30 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D3 |
¦D2 ¦ D1¦ D2 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U |
|
¦ U |
¦ S ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ S |
¦ U ¦ U¦ S ¦ |
||||
¦15 |
¦D1 |
¦D1 |
¦ D2 |
¦ D3 |
|
¦ D2 |
¦ D3 |
¦ |
31 |
¦ |
D2 |
¦D3 |
¦D2 |
¦D1 ¦ D2¦ D3 ¦ |
||
+----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+--- |
+--- |
+--- |
+---- |
+ |
||
¦ |
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S |
|
¦ S |
¦ U ¦ |
|
¦ S |
¦ U |
¦ U |
¦ S ¦ S¦ U ¦ |
||||
¦16 |
¦D1 |
¦D2 |
¦ D3 |
¦ D2 |
|
¦ D3 |
¦ D1 |
¦ |
32 |
¦ |
D1 |
¦D3 |
¦D1 |
¦D2 ¦ D3¦ D2 ¦ |
||
L----- |
+---+--- ---+ +---- |
|
+---- |
+---- |
+----- |
|
+---- |
|
+---- |
+---+---+--- |
+----- |
|
Если дисперсионный анализ дал нужный результат (т.е. выполняются указанные выше условия), то вычисляется логарифм отношения активностей испытуемого образца и стандарта по формуле:
А |
|
|
|
U |
4 |
U - S |
|
M = lg ---- = --- I |
---------, |
(II.5.7) |
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
|
|
|
A |
|
3 |
|
L |
+ L |
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
|
U |
|
S |
|
|
|
где A |
и A |
- активности, соответствующие рабочим растворам, а I - |
||||||||||
U |
S |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
логарифм знаменателя |
прогрессии |
разведения (в данном случае I = |
||||||||||
lg 2 = 0,301). Тогда отношение активностей равно: |
|
|
||||||||||
|
|
|
|
|
R = antilg M |
|
|
|
(II.5.8) |
|||
Чтобы |
|
найти |
отношение |
активностей |
основных |
растворов |
||||||
а /а , |
надо |
умножить |
|
величину |
R |
на |
коэффициент, учитывающий |
|||||
U S |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
соответствующие |
(например, |
максимальные) |
степени |
разведения |
||||||||
основных растворов стандарта |
и |
образца ("гамма " |
и |
"гамма "). |
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
U |
Тогда имеем: |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
"гамма " |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
U |
|
|
|
|
|
|
|
|
а |
= а R --------. |
|
|
|
(II.5.9) |
|||
|
|
|
|
U |
S |
"гамма " |
|
|
|
|
||
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
|
|
|
Границы 95%-ного |
доверительного |
интервала |
для |
логарифма |
||||||||
отношения активностей вычисляются по формуле: |
|
|
|
|||||||||
|
|
|
|
|
-------------------- |
|
|
|
||||
|
|
|
|
|
/ |
|
2 |
8 |
2 |
|
|
|
|
M |
= CM +/- \/(С - 1)(CM |
+ --- I ), |
|
|
(II.5.10) |
||||||
|
H, B |
|
|
|
|
|
|
3 |
|
|
|
|
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
где |
|
|
|
|
2 |
2 |
|
C = L |
/ (L - t Sост ), |
(II.5.11) |
|
2 |
|
|
|
причем L и Sост берутся |
из табл. |
II.5.2, |
а t - есть значение |
критерия Стьюдента для |
Р = 95% |
и fост |
числа степеней свободы |
2 |
|
|
|
величины Sост. Границы доверительного интервала для отношения
активностей (R и R |
) будут антилогарифмами величин М |
и |
M, а для |
||||||||
|
|
|
H |
B |
|
|
|
|
H |
B |
|
доверительных границ активности образца надо |
вводить |
коэффициент |
|||||||||
"гамма " / "гамма " в соответствии с формулой II.5.9. |
|
|
|
||||||||
|
U |
|
S |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
Пример. II.8. Активность стандарта - 950 ЕД/мг. Основной |
||||||||||
раствор стандарта готовят из расчета 1 мг/мл, так |
что |
a = |
950 |
||||||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
|
ЕД/мл. |
Учитывая, |
что |
контрольная |
концентрация |
для |
данного |
|||||
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
S |
антибиотика равна 1 ЕД/мл, готовят рабочие растворы стандарта D1, |
|||||||||||
S |
S |
|
|
|
|
|
|
|
|
|
|
D2 и D3 путем разведения основного раствора в |
500, |
1000 |
и |
2000 |
|||||||
раз. |
|
Полагая, |
что |
активность |
испытуемого образца |
близка к |
|||||
активности стандарта, |
и учитывая, |
что рабочие |
концентрации |
для |
|||||||
|
|
U |
U |
U |
|
|
|
|
|
|
|
образца |
D1, |
D2, |
D3, должны быть близки к рабочим концентрациям |
||||||||
|
|
S |
S |
S |
|
|
|
|
|
|
|
стандарта D1, |
D2, |
D3, основной раствор образца разводят также в |
|||||||||
500, 1000 и 2000 раз. Количество чашек n = 6. |
|
|
|
|
|
||||||
|
Результаты опыта записаны в табл. II.5.3. |
Там |
же |
записаны |
значения Si, Ui, Tj и у, вычисленные по формулам II.5.1 - II.5.3.
По этим значениям, пользуясь формулами II.5.4 - II.5.6, получаем:
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.
S = 3310; |
L |
= 325; |
Q |
= - 5; |
|
|
|
S |
|
S |
|
U = 3325: |
L |
= 345; |
Q |
= -5. |
|
|
|
U |
|
U |
|
Дисперсионный анализ |
|
результатов |
|
опыта |
представлен |
втабл.II.5.4, из которой видно, что условия незначимости вариаций
встроках 2, 3 и 4 и значимости вариации в строке 1 выполняются,
что позволяет перейти к дальнейшим расчетам.
Прежде всего следует пересчитать остаточную вариацию с включением в нее незначимых вариаций. Поскольку в данном случае вариации незначимы не только в строках 2, 3 и 4, но и в строке 5,
последнюю тоже следует включить в остаточную вариацию. Тогда
получаем |
новое значение SUMост = 200,70 |
+ |
16,66 + 1,39 + 0 + |
6,25 |
|
+ 225,00 |
при |
числе степеней свободы fост |
= |
25 + 4 = 29, так |
что |
2 |
|
|
|
|
|
Sост = 225,00/29 = 7,759. Новые результаты дисперсионного анализа |
|||||
представлены |
в табл. II.5.5. |
|
|
|
Таблица II.5.2
Дисперсионный анализ результатов опыта
------ |
T---------------------- |
|
|
|
T-------- |
T |
----------------------- |
T |
------ |
|
------ |
T------------ |
|
|
T------------- |
|
¬ |
|
|
|
|
¦Номер ¦ |
|
|
|
|
¦ Число |
¦ |
|
¦ |
||
Дисперсия |
¦ |
Отношение |
¦ Табличные |
¦ |
|
|
|
|||
¦стро- ¦ |
Источник вариаций |
¦степеней ¦ |
Сумма квадратов SUM |
¦ |
2 |
|||||
SUM |
¦ дисперсий |
¦ |
значения |
¦ |
|
|
|
|
||
¦ки |
¦ |
|
|
|
|
¦свободы |
¦ |
|
¦ |
s = |
--- |
¦ |
2 |
2 |
¦F(95%,f,fост) ¦ |
|
|
|
|
||
¦ |
¦ |
|
|
|
|
¦ |
|
¦ |
|
|
¦ |
|
f |
¦F = s / Sост ¦ |
|
|
¦ |
|
|
||
+----- |
+---------------------- |
|
|
|
+-------- |
+----------------------- |
|
+------ |
|
|
Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей
Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.