Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

ГФ 11-1

.pdf
Скачиваний:
1255
Добавлен:
21.05.2015
Размер:
3.83 Mб
Скачать

Расположение растворов стандарта и испытуемого образца

при трехдозном варианте метода диффузии в агар

------

T--------------------------

 

 

 

 

T-----

 

T--------------------------

 

 

 

 

 

 

¬

 

 

¦Номер ¦Порядок внесения растворов

¦Номер ¦Порядок внесения растворов

¦

 

¦чашек ¦

 

в цилиндры

 

¦чашек ¦

 

 

в цилиндры

 

 

¦

 

¦

+---

T---T---T

----T

----T

----+-----

 

+----

 

T----

T---

T---T---

T----

+

 

 

¦

¦ 1

¦ 2

¦ 3

¦ 4

¦ 5

¦ 6 ¦

 

¦ 1

¦ 2

¦ 3

¦ 4 ¦ 5 ¦

6 ¦

+-----

+---+---+---+----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ S¦ U ¦

¦1

¦D1

¦D2

¦ D2

¦ D3

¦ D1

¦ D2

¦

17

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D1 ¦ D3¦

D2

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ S ¦ U¦ U ¦

¦2

¦D1

¦D2

¦ D1

¦ D3

¦ D3

¦ D2

¦

18

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D2 ¦ D3¦

D1

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ S ¦ U¦ U ¦

¦3

¦D1

¦D2

¦ D3

¦ D2

¦ D3

¦ D1

¦

19

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D2 ¦ D1¦

D3

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ U¦ S ¦

¦4

¦D1

¦D2

¦ D1

¦ D3

¦ D3

¦ D2

¦

20

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D3 ¦ D1¦

D2

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ U¦ S ¦

¦5

¦D1

¦D2

¦ D1

¦ D2

¦ D3

¦ D3

¦

21

¦

D1

¦D2

¦D1

¦D3 ¦ D3¦

D2

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ U¦ S ¦

¦6

¦D1

¦D2

¦ D3

¦ D1

¦ D2

¦ D3

¦

22

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D2 ¦ D1¦

D3

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ U¦ S ¦

¦7

¦D1

¦D3

¦ D1

¦ D2

¦ D3

¦ D2

¦

23

¦

D1

¦D2

¦D1

¦D2 ¦ D3¦

D3

¦

+-----

+---+--- ---+ +----

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

 

 

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U ¦ U¦ S ¦

¦8

¦D1

¦D3

¦ D3

¦ D2

¦ D1

¦ D2

¦

24

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D3

¦

D1¦

D2

¦

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

+-----

+---+---+---+

----

+

----+

----+

-----

+

----

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ S

¦ U

¦ U

 

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U ¦ U¦ S ¦

¦9

¦D1

¦D3

¦ D2

¦ D3

 

¦ D2

¦ D1

¦

25

¦

D1

¦D2

¦D3

¦D1 ¦ D3¦ D2 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ U

¦ U

 

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ S¦ U ¦

¦10

¦D1

¦D3

¦ D2

¦ D1

 

¦ D2

¦ D3

¦

26

¦

D1

¦D3

¦D1

¦D2 ¦ D3¦ D2 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

 

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ S ¦ U¦ U ¦

¦11

¦D1

¦D1

¦ D2

¦ D3

 

¦ D2

¦ D3

¦

27

¦

D1

¦D3

¦D2

¦D3 ¦ D2¦ D1 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

 

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ S ¦ U¦ U ¦

¦12

¦D1

¦D1

¦ D3

¦ D2

 

¦ D3

¦ D3

¦

28

¦

D1

¦D3

¦D3

¦D2 ¦ D1¦ D2 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ S

¦ S

 

¦ U

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ U¦ S ¦

¦13

¦D1

¦D1

¦ D2

¦ D3

 

¦ D2

¦ D3

¦

29

¦

D1

¦D3

¦D1

¦D3 ¦ D2¦ D2 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

 

¦ U

¦ S ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U ¦ U¦ S ¦

¦14

¦D1

¦D1

¦ D3

¦ D2

 

¦ D3

¦ D2

¦

30

¦

D1

¦D3

¦D3

¦D2 ¦ D1¦ D2 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U

 

¦ U

¦ S ¦

 

¦ S

¦ U

¦ S

¦ U ¦ U¦ S ¦

¦15

¦D1

¦D1

¦ D2

¦ D3

 

¦ D2

¦ D3

¦

31

¦

D2

¦D3

¦D2

¦D1 ¦ D2¦ D3 ¦

+-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---

+---

+---

+----

+

¦

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S

 

¦ S

¦ U ¦

 

¦ S

¦ U

¦ U

¦ S ¦ S¦ U ¦

¦16

¦D1

¦D2

¦ D3

¦ D2

 

¦ D3

¦ D1

¦

32

¦

D1

¦D3

¦D1

¦D2 ¦ D3¦ D2 ¦

L-----

+---+--- ---+ +----

 

+----

+----

+-----

 

+----

 

+----

+---+---+---

+-----

 

Если дисперсионный анализ дал нужный результат (т.е. выполняются указанные выше условия), то вычисляется логарифм отношения активностей испытуемого образца и стандарта по формуле:

А

 

 

 

U

4

U - S

 

M = lg ---- = --- I

---------,

(II.5.7)

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

 

 

 

A

 

3

 

L

+ L

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

U

 

S

 

 

 

где A

и A

- активности, соответствующие рабочим растворам, а I -

U

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

логарифм знаменателя

прогрессии

разведения (в данном случае I =

lg 2 = 0,301). Тогда отношение активностей равно:

 

 

 

 

 

 

 

R = antilg M

 

 

 

(II.5.8)

Чтобы

 

найти

отношение

активностей

основных

растворов

а /а ,

надо

умножить

 

величину

R

на

коэффициент, учитывающий

U S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

соответствующие

(например,

максимальные)

степени

разведения

основных растворов стандарта

и

образца ("гамма "

и

"гамма ").

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

U

Тогда имеем:

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

"гамма "

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

U

 

 

 

 

 

 

 

 

а

= а R --------.

 

 

 

(II.5.9)

 

 

 

 

U

S

"гамма "

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

 

 

 

Границы 95%-ного

доверительного

интервала

для

логарифма

отношения активностей вычисляются по формуле:

 

 

 

 

 

 

 

 

--------------------

 

 

 

 

 

 

 

 

/

 

2

8

2

 

 

 

 

M

= CM +/- \/(С - 1)(CM

+ --- I ),

 

 

(II.5.10)

 

H, B

 

 

 

 

 

 

3

 

 

 

 

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

где

 

 

 

 

2

2

 

C = L

/ (L - t Sост ),

(II.5.11)

2

 

 

 

причем L и Sост берутся

из табл.

II.5.2,

а t - есть значение

критерия Стьюдента для

Р = 95%

и fост

числа степеней свободы

2

 

 

 

величины Sост. Границы доверительного интервала для отношения

активностей (R и R

) будут антилогарифмами величин М

и

M, а для

 

 

 

H

B

 

 

 

 

H

B

 

доверительных границ активности образца надо

вводить

коэффициент

"гамма " / "гамма " в соответствии с формулой II.5.9.

 

 

 

 

U

 

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

Пример. II.8. Активность стандарта - 950 ЕД/мг. Основной

раствор стандарта готовят из расчета 1 мг/мл, так

что

a =

950

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

 

ЕД/мл.

Учитывая,

что

контрольная

концентрация

для

данного

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

S

антибиотика равна 1 ЕД/мл, готовят рабочие растворы стандарта D1,

S

S

 

 

 

 

 

 

 

 

 

 

D2 и D3 путем разведения основного раствора в

500,

1000

и

2000

раз.

 

Полагая,

что

активность

испытуемого образца

близка к

активности стандарта,

и учитывая,

что рабочие

концентрации

для

 

 

U

U

U

 

 

 

 

 

 

 

образца

D1,

D2,

D3, должны быть близки к рабочим концентрациям

 

 

S

S

S

 

 

 

 

 

 

 

стандарта D1,

D2,

D3, основной раствор образца разводят также в

500, 1000 и 2000 раз. Количество чашек n = 6.

 

 

 

 

 

 

Результаты опыта записаны в табл. II.5.3.

Там

же

записаны

значения Si, Ui, Tj и у, вычисленные по формулам II.5.1 - II.5.3.

По этим значениям, пользуясь формулами II.5.4 - II.5.6, получаем:

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.

S = 3310;

L

= 325;

Q

= - 5;

 

 

 

S

 

S

 

U = 3325:

L

= 345;

Q

= -5.

 

 

 

U

 

U

 

Дисперсионный анализ

 

результатов

 

опыта

представлен

втабл.II.5.4, из которой видно, что условия незначимости вариаций

встроках 2, 3 и 4 и значимости вариации в строке 1 выполняются,

что позволяет перейти к дальнейшим расчетам.

Прежде всего следует пересчитать остаточную вариацию с включением в нее незначимых вариаций. Поскольку в данном случае вариации незначимы не только в строках 2, 3 и 4, но и в строке 5,

последнюю тоже следует включить в остаточную вариацию. Тогда

получаем

новое значение SUMост = 200,70

+

16,66 + 1,39 + 0 +

6,25

+ 225,00

при

числе степеней свободы fост

=

25 + 4 = 29, так

что

2

 

 

 

 

 

Sост = 225,00/29 = 7,759. Новые результаты дисперсионного анализа

представлены

в табл. II.5.5.

 

 

 

Таблица II.5.2

Дисперсионный анализ результатов опыта

------

T----------------------

 

 

 

T--------

T

-----------------------

T

------

 

------

T------------

 

 

T-------------

 

¬

 

 

 

 

¦Номер ¦

 

 

 

 

¦ Число

¦

 

¦

Дисперсия

¦

Отношение

¦ Табличные

¦

 

 

 

¦стро- ¦

Источник вариаций

¦степеней ¦

Сумма квадратов SUM

¦

2

SUM

¦ дисперсий

¦

значения

¦

 

 

 

 

¦ки

¦

 

 

 

 

¦свободы

¦

 

¦

s =

---

¦

2

2

¦F(95%,f,fост) ¦

 

 

 

 

¦

¦

 

 

 

 

¦

 

¦

 

 

¦

 

f

¦F = s / Sост ¦

 

 

¦

 

 

+-----

+----------------------

 

 

 

+--------

+-----------------------

 

+------

 

 

Не является официальной версией, бесплатно предоставляется членам Ассоциации лесопользователей

Приладожья, Поморья и Прионежья – www.alppp.ru. Постоянно действующий третейский суд.