Добавил:
Upload Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз: Предмет: Файл:

osn_san_mikr

.pdf
Скачиваний:
117
Добавлен:
25.03.2015
Размер:
1.49 Mб
Скачать

163

Глава 12

12.1.Отходы лечебно-профилактических учреждений

12.1.1.Правила сбора и хранения отходов лечебно-профилактических

учреждений

Настоящие правила (СанПиН 2.1.7.728-99) предназначены для всех лечебно-профилактических учреждений (ЛПУ), организаций, занимающихся сбором, хранением, транспортировкой отходов органов здравоохранения, а также проектированием и эксплуатацией установок переработки, обезвреживания и полигонов захоронения твердых отходов.

Под отходами ЛПУ понимают все виды отходов, образующихся в больницах, поликлиниках, диспансерах, станциях скорой медицинской помощи, станциях переливания крови, научно-исследовательских институтах и учебных заведениях медицинского профиля, ветеринарных лечебницах, аптеках, фармацевтических производствах, оздоровительных учреждениях, санитарно-профилактических учреждениях, медицинских лабораториях.

Классификация медицинских отходов.

Все отходы здравоохранения разделяются по степени их эпидемиологической, токсикологической и радиационной опасности.

Класс А – неопасные отходы ЛПУ.

Класс Б – опасные (рискованные) отходы ЛПУ. Класс В – чрезвычайно опасные отходы ЛПУ.

Класс Г – отходы ЛПУ, по составу близкие к промышленным. Класс Д – радиоактивные отходы ЛПУ.

Морфологический состав соответствующего класса отходов может быть охарактеризован следующим образом.

Вотходы класса А включаются неопасные отходы, не имеющие контакта

сбиологическими жидкостями пациентов, инфекционными больными; нетоксичные отходы; пищевые отходы всех подразделений ЛПУ, кроме инфекционных; мебель, инвентарь, неисправное диагностическое оборудование, не содержащее токсичных элементов; неинфицированная бумага, строительный мусор.

Вотходы класса Б включаются потенциально инфицированные отходы; материал и инструменты, загрязненные выделениями, в т. ч. кровью; выделения пациентов; патолого-анатомические отходы (органы, ткани); все отходы из операционных отделений; отходы из микробиологических лабораторий, работающих с микроорганизмами III-IV группы патогенности (согласно СанПиНу 1.2.036-95 «Порядок учета, хранения, передачи и транспортировки микроорганизмов I-IV группы патогенности»); биологические отходы вивариев.

Вотходы класса В включаются материалы, контактирующие с больными особо-опасными инфекциями; отходы из лабораторий, работающих с

164

микроорганизмами I-IV-ой группы патогенности; отходы фтизиатрических, микологических больниц; отходы от пациентов с анаэробной инфекцией.

Вотходы класса Г включаются просроченные лекарственные средства, отходы от лекарственных и диагностических препаратов, лекарства, не подлежащие использованию; цитостатики и другие химиопрепараты; ртутьсодержащие предметы, приборы и оборудование.

Вотходы класса Д включаются все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты.

Порядок проведения дезинфекции, хранения и удаления отходов.

1.Отходы класса Б и В обязательно дезинфицируют погружением в дезраствор, а затем помещают в одноразовую упаковку непосредственно на местах первичного сбора.

2.Дезинфекция отходов класса А производится ежедневно силами ЛПУ.

3.Дезинфекцию контейнеров для сбора отходов класса Б и В производят один раз в неделю.

4.Хранение и транспортировка отходов классов А, Б, В по территории лечебно-профилактических учреждений допускается только в герметичных многоразовых контейнерах. Отходы классов А, Б, В допускается хранить не

более 1-х суток в естественных условиях. Пищевые отходы всех классов необходимо хранить в холодильниках при температуре не выше + 50С. Вывоз отходов этих классов должен производиться ежедневно.

5.Транспортировка отходов классов А, Б, В вне территории ЛПУ допускается только в закрытых кузовах специально применяемых автомашин.

6.Хранение отходов класса Г производится в специально отведенных для этой цели вспомогательных помещениях.

7.Отходы класса А могут быть захоронены на обычных полигонах по захоронению твердых бытовых отходов. Отходы классов Б и В необходимо уничтожать на специальных установках по обезвреживанию отходов ЛПУ термическими методами.

165

12.2. Тесты для самоконтроля

(один ответ правильный)

1.Правила сбора, хранения и удаления отходов лечебно-профилактических учреждений изложены в:

а) СанПиНе 2.1.7.728-99 б) МУКе 4.2.1018-01 в) СанПиНе 2.1.4.1074-01

2.Все отходы ЛПУ по степени их эпидемической, токсикологической и радиационной безопасности делятся на пять классов опасности:

а) Класс В. Неопасные отходы. б) Класс Б. Опасные отходы ЛПУ.

в) Класс Г. Радиоактивные отходы.

3.Отходы класса А –

а) все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты б) отходы от пациентов с анаэробной инфекцией

в) пищевые отходы всех подразделений ЛПУ, кроме инфекционных

4. Отходы класса образуются:

а) в операционных, реанимационных б) диагностических подразделениях

в) центральных пищеблоках, буфетных отделениях

5.Какие группы отходов должны быть подвергнуты обязательному термическому обеззараживанию:

а) группа А, группа С б) группа Б, группа В в) группа А, группу С

6.Хранение отходов класса Г проводят в:

а) контейнерах б) специальных бутылях

в) специально отведенных вспомогательных помещениях

7. Отходы класса В дезинфицируют: а) в сухожаровом шкафу

б) погружают в дезраствор, а затем помещают в одноразовую упаковку непосредственно на местах первичного сбора

в) в автоклаве.

166

8.Отходы класса В уничтожают, используя: а) химические методы б) фильтрование

в) термическую обработку

9.Отходы класса Д –

а) неопасные отходы.

б) потенциально инфицированные отходы.

в) все виды отходов, содержащие радиоактивные компоненты.

10. Отходы из лабораторий, работающих с микроорганизмами 1-4 группы патогенности, относятся к классу:

а) Б б) В в) Г

167

Глава 13. Приложения

13.1. Схемы начальных этапов санитарно-микробиологического исследования

Таблица 25 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования проб воды

 

 

 

 

Споры

 

ОМЧ

БГКП

сульфитредуцирующих

Колифаги

 

 

 

 

клостридий

 

Исследуемую

 

 

 

 

 

пробу воды

 

 

 

 

100,0 мл разливают

(300,0мл)

 

 

 

 

 

 

 

 

по 20,0мл в чашки

разбивают на

 

Пробы объемом 20,0мл

 

Петри с МПА и с

3 объема по

При анализе

прогревают на водяной бане

культурой E.сoli.

100,0мл и

засевают 3-4

и фильтруют, фильтры

Чашки с застывшим

фильтруют.

десятикратных

помещают в чашки Петри с

агаром помещают

Фильтры

объема (3,0;

 

 

тонким слоем

 

 

дном вверх в

помещают на

30,0; 300,0мл)

железосульфитного агара.

термостат и

мясопептонный

на среду Эндо

Посевы культивируют при

инкубируют

агар. Чашки

 

44

0

С в течение 16-18 часов

 

 

при 370С в течение

инкубируют

 

 

 

 

18-24 часов

при 370С в течение

 

 

 

 

24 часов

 

 

 

 

 

 

 

Таблица 26

Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования воздуха

ОМЧ

Staphylococcus aureus

Дрожжи, грибы

Проводят забор 1,0м3

3

3

воздуха и засевают на 2%

Проводят забор 1,0м

Проводят забор 1,0м воздуха

воздуха и засевают на

и засевают на среду Сабуро.

питательный

желточно-солевой агар.

Посевы инкубируют

мясопептонный агар.

Посевы инкубируют

при 370С

Посевы инкубируют

0

в течение 120 часов

при 370С в течение

при 37 С

24 часов

в течение 24-48 часов

(5 дней)

 

 

Таблица 27 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования проб почвы

Показатель

Алгоритм исследования

 

Из пробы готовят суспензию почвы, берут по 1,0мл 2-х различных

ОМЧ

разведений и засевают в чашки Петри с МПА.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов

 

Из первого разведения почвенной суспензии (1:10) берут 10,0мл и

БГКП

засевают во флаконы с 50,0мл лактозного бульона или среды Кесслера-

 

Свенертона. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

Энтерококки

В чашки Петри вносят по 0,01мл разведений почвенной суспензии на среду

 

Калины. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

168

Таблица 28 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования

пищевых продуктов

Показатель

Алгоритм исследования

 

Для их определения выбирают разведения, при посевах которых на

 

чашках вырастает не менее 30 и не более 300 колоний. Из каждой пробы

КМАФАнМ

делают посев на 2-3 чашки из различных разведений в количестве 1,0см3 в

 

одну чашку с МПА.

 

Посевы инкубируют при 300С в течение 72 часов.

БГКП

Посев проводят в среду Кесслера с лактозой и поплавком с соблюдением

 

соотношения 1:10.

 

Посевы инкубируют при 300С в течение 24 часов.

 

Навеску продукта помещают в фосфатный буфер, учитывая соотношение

Патогенные, в

1:10 (среды для обогащения), добавляют 0,1% раствор бриллиантового

том числе

зеленого и перемешивают, затем инкубируют при 370С в течение

Salmonella

24-26 часов, после чего 10,0см3 переносят в пробирку с 10,0см3 магниевой

 

среды.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

Навеску исследуемого продукта массой 25,0г или объемом 25,0см3 вносят

Listeria

в 225,0см3 среды для обогащения (соотношение 1:10). Посевы инкубируют

monocytogenes

при 370С в течение 24-26 часов, после чего 1,0г обогащенной навески

 

засевают в бульон Фразера с эскулином в соотношении 1:9.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 48 часов.

 

0,5мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду

Proteus spp.

свежескошенного МПА.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

10,0г продукта разводят в фосфатном буфере для обогащения и

Staphylococcus

инкубируют при 370С в течение 18-24 часов, после чего 1,0см3 из

aureus

пробирки переносят в солевой бульон.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

Clostridium

Навеску продукта массой 20,0-25,0г засевают в пробирку с высоким

botulinum

столбиком среды (анаэробные условия) агара для анаэробов.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24-48 часов.

Pseudomonas

100,0см3 исследуемого материала из разведений 1:10 вносят в стеклянный

aeruginosa

флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3 МПБ с глюкозой.

 

Первичный посев инкубируют при 370С в течение 24-48 часов.

 

10,0г продукта растворяют в колбе с 90,0см3 разбавленного фосфатного

Escherichia coli

буфера для обогащения и выдерживают в термостате при 370С в течение

 

24 часов, после чего 1,0см3 из колбы засевают в 9,0см3 среды Кесслера с

 

лактозой (посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов).

169

Таблица 29 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования

продуктов детского питания

Показатель

Алгоритм исследования

 

По 1,0см3 каждого соответствующего разведения пробы продукта вносят

КМАФАнМ

в 2 чашки Петри с МПА.

 

Выбирают те разведения, при которых вырастает не менее 30 и не более

 

300 колоний.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

10,0г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0см3

БГКП

фосфатного буфера для обогащения. На следующий день 1,0см3

 

засеивают в колбу с 9,0см3 среды Кесслера с поплавком.

 

Посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов.

 

Из каждой пробы продукта делают посев по 1,0см3 продукции или 1,0см3

Плесневые

разведений 1:10 и 1:100 на 2 чашки Петри на среду Сабуро.

грибы, дрожжи

Посевы инкубируют при температуре 240С в течение 120 часов (5 суток)

 

10,0г сухого продукта детского питания растворяют в колбе в 90,0см3

 

фосфатного буфера для обогащения. Навеску выдерживают в термостате

E.coli

при 370С в течение 24 часов, после чего по 1,0см3 из колб засевают в

 

9,0см3 среды Кесслера с лактозой.

 

Посевы инкубируют при 440С в течение 24 часов.

 

10,0г или 1,0г продукта помещают в колбы с 90,0см3 или 9,0см3

 

фосфатного буфера для обогащения и инкубируют при 370С в течение 24

S.aureus

часов, после чего по 1,0см3 смеси переносят в пробирку с солевым

 

бульоном.

 

Посевы инкубируют при 370 в течение 24 часов.

 

При посеве продукта соблюдают соотношение массы продукта и

Патогенные, в

буферного раствора 1:10. Смесь помещают в термостат при 370С до 24

том числе

часов. Затем 1,0см3 выдержанной в термостате смеси переносят в

Salmonella

пробирку с 10,0см3 магниевой среды или среды Мюллера и инкубируют

 

при 370С в течение 24 часов.

 

0,1см3 сухого продукта детского питания из разведения 1:10 засевают на

B.cereus

поверхность питательной среды Донована.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24-26 часов.

170

Таблица 30 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования

парфюмерно-косметической продукции

Показатель

Алгоритм исследования

 

1,0см3 исследуемого материала из средней пробы (15,0см3) высевают

 

параллельно в 2 чашки Петри из 2-х разведений.

КМАФАнМ

1-ым разведением считается то, в посеве из которого вырастает не

 

более 15 колоний, а 2-ым – то, в посеве из которого вырастает не

 

более 300 колоний. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов

 

1,0см3 исследуемого материала из средней пробы (15,0см3) высевают

 

параллельно в 2 чашки Петри из 2-х разведений. Первое разведение

Дрожжи и плесневые

подбирают так, чтобы в посеве из него выросло не более 15 колоний,

грибы

второе – чтобы в посеве из него выросло не более 30 колоний.

 

Посевы инкубируют при 320С в течение 120 часов.

 

10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы

Семейство

вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3

Enterobacteriaceae

питательной среды. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов

 

10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы

Pseudomonas

вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3

aeruginosa

питательной среды. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 средней пробы

Staphylococcus aureus

вносят в стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий 100,0см3

 

солевого бульона (или из него производят засев ЖСА).

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

0,5мл анализируемой взвеси вносят в конденсационную воду свеже-

Proteus

скошенного МПА. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

Таблица 31 Начальные этапы санитарно-микробиологического исследования

аптечного оборудования и лекарств

Показатель

Алгоритм исследования

 

Проводят забор 1,0м3 воздуха и засевают на чашку с 2% питательным

ОМЧ

агаром. Посевы инкубируют при 370С в течение 24 часов.

 

Делают ряд разведений навески и 10,0см3 исследуемого материала из

БГКП

разведения 10-1 засевают на среду Эндо. Посевы инкубируют при

 

370С в течение 24 часов.

 

По 0,1см3 навески или по 1,0см3 разведений 1:10 и 1:100 высевают на

Дрожжи, грибы

2 чашки Петри со средой Сабуро с добавлением антибиотиков.

 

Посевы инкубируют при 240С в течение 5 суток.

 

10,0см3 исследуемого материала из разведения 10-1 вносят в

Семейство

стеклянный флакон, содержащий 100,0см3 среды Эндо или среды

Enterobacteriaceae

обогащения для семейства Enterobacteriaceae.

 

Смесь инкубируют при 370С в течение 24-48 часов.

 

10,0г или 1,0г продукта помещают в колбу с 90,0см3 или 9,0см3

Staphylococcus aureus

фосфатного буфера и инкубируют при 370С в течение 18-24 часов,

 

после чего переносят 1,0см3смеси в пробирку с солевым бульоном.

 

Посевы инкубируют при 370С в течение 24-48 часов.

Pseudomonas

10,0см3 исследуемого материала из разведений 1:10 вносят в

aeruginosa

стеклянный стерильный флакон объемом 200,0см3, содержащий

 

100,0см3 МПБ с глюкозой. Посевы инкубируют при 370С в течение

 

24-48 часов.

171

13.2.Методы санитарно-микробиологического исследования

13.2.1.Санитарно-гигиенические нормативы исследования воды централизованного водоснабжения

(СанПиН 2.1.4.1074-01).

Определение ОМЧ аэробных и факультативно-анаэробных микроорганизмов

Метод основан на определении общего микробного числа микроорганизмов, образующих колонии на питательном агаре при температуре 370С в течение 24 часов.

Методика проведения анализа.

Из каждой исследуемой пробы делают высев не менее двух объемов по 1,0мл в стерильные чашки Петри. После внесения пробы в каждую чашку вливают по 8,0-10,0мл расплавленного и остуженного до 45-490С питательного агара и перемешивают содержимое чашек, равномерно распределяя по всему дну, избегая при этом образования пузырьков. После застывания агара чашки с посевами помещают в термостат вверх дном и инкубируют при 37±10С в течение 24 часов.

При учете посевов предыдущего дня подсчитывают все выросшие на чашке колонии, наблюдаемые в объектив с увеличением в два раза; количество колоний на обеих чашках суммируют и делят на два. Результат выражают числом колониеобразующих единиц (КОЕ) в 1,0мл исследуемой пробы.

Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий

методом мембранных фильтров.

Метод основан на фильтровании установленного объема воды через мембранные фильтры, выращивании посевов на дифференциальнодиагностической питательной среде с лактозой и последующей идентификацией культур из выросших колоний по культуральным и биохимическим свойствам.

Методика проведения анализа.

Пробу исследуемой воды разбивают на три объема по 100,0мл и фильтруют. Затем фильтры помещают на среду Эндо в чашки Петри, которые ставят в термостат дном вверх и инкубируют при 370С и при 44,50С в течение 24 часов.

Если на фильтрах через 24 часа (конец анализа) нет роста или выросли колонии пленчатые, губчатые, плесневые, то дают отрицательный ответ: отсутствие общих колиформных бактерий (ОКБ) и термотолерантных колиформных бактерий (ТКБ) в 100,0мл исследуемой воды.

Если на фильтрах обнаружен рост изолированных типичных лактозопозитивных колоний – темно-красных или красных с металлическим блеском или без него, или других подобного рода колоний, то подсчитывают число колоний каждого типа отдельно и приступают к подтверждению их принадлежности к ОКБ и ТКБ.

172

С этой целью каждую колонию исследуют на:

морфологию бактерий и отношение бактериальных клеток к окраске по

Граму;

наличие оксидазной активности;

способность к ферментации глюкозы, лактозы до кислоты и газа при 370С и 44,50С.

Как ОКБ учитываются грамотрицательные бактерии при отрицательном оксидазном тесте, ферментации глюкозы, лактозы при 370С с образованием кислоты и газа.

Как ТКБ учитываются грамотрицательные палочки при отрицательном оксидазном тесте и ферментации глюкозы и лактозы при 44,50С с образованием кислоты и газа.

При отсутствии общих колиформных бактерий и термотолерантных колиформных бактерий на всех фильтрах результат записывают как «не обнаружено КОЕ ОКБ в 100,0мл» и «не обнаружено КОЕ ТКБ в 100,0мл».

В случаях идентификации всех выросших подозрительных колоний число колониеобразующих единиц ОКБ и ТКБ подсчитывают на всех фильтрах и выражают результат анализа в 100,0мл воды, вычисляя его по формуле:

Х= (а ×100) / V , где

Х– число колоний в 100,0мл;

а – число подсчитанных колоний;

V – общий объем воды, профильтрованной через фильтр.

Например, при посеве 3-х фильтров с профильтрованных объемов по 100,0мл, на 1-ом выросло две колонии, а на остальных двух фильтрах – роста нет. В этом случае число общих или термотолерантных колиформных бактерий будет определяться таким образом:

(2 х 100) / 300 = 0,7 КОЕ ОКБ (ТКБ) в 100,0мл воды.

Определение общих и термотолерантных колиформных бактерий

титрационным методом.

Титрационный метод может быть использован в следующих случаях:

при отсутствии материалов и оборудования, необходимых для выполнения анализа методом мембранных фильтров;

при анализе воды с большим содержанием взвешенных веществ;

при наличии в воде посторонней микрофлоры, препятствующей получению на фильтрах изолированных колоний общих колиформных бактерий.

Титрационный метод основан на накоплении бактерий при посеве установленного (определенного) объема воды в жидкую питательную среду с последующим пересевом на среду Эндо.

Учет результатов анализа (рост колоний) проводится после инкубации

посевов на среде Эндо при 38±10С в течение 18-20 часов.

Если нет роста, то посевы оставляют в термостате и повторно просматривают через 48 часов.

Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]