36. Лейкозы крупного рогатого скота: этиология, клинико-эпизоотологическая характеристика, диагностика и меры борьбы.
Лейкоз крупного рогатого скота (гемобластоз) - хроническая болезнь опухолевой природы, протекающая бессимптомно или характеризующаяся лимфоцитозом и злокачественным разрастанием кроветворных и лимфоидных клеток в различных органах.
Возбудитель болезни - Вирус лейкоза КРС - РНК-содержащий вирус семейства Retroviridae (подсемейства Oncornavirinae - опухолевые вирусы; род - Delra-retrovirus):
Основной признак семейства - наличие в вирионе обратной транскриптазы.
В состав подсемейства Oncornavirinae входит три рода, дифференцируемых на основании морфологии вирионов - вирусы типов С, В и D.
Вирусы типа С подразделяют на два подрода: вирусы типа С млекопитающих и вирус лейкоза крупного рогатого скота (ВЛКРС).
Экзогенный вирус в отношении КРС и других чувствительных видов животных.
Репликация ограничивается клетками лимфоидной популяции, не выявляется в других тканях организма.
Репродуцируется в перевиваемых хронически инфицированных культурах клеток тканей животных разных видов.
Чувствительность (1 группа устойчивости):
Разрушается при многократном замораживании и оттаивании и при нагревании до температуры 56 °С в течение 15 мин.
Пастеризация молока (74 °С в течение 16 с) - убивает вирус
Полностью инактивируется в молоке или вируссодержащей жидкости (кровь, молозиво) при 50 °С в течение 70 с, при 70-74 °С в течение 17 с.
Прямые солнечные лучи убивают ВЛКРС в течение 4 ч, УФ лучи (120 Вт на расстоянии 1 м) - в течение 30 мин.
Полностью теряет активность в 2%-х растворах гидроксида натрия и формальдегида, а также в растворах других дезинфектантов в общепринятых концентрациях.
В жидком азоте лимфоциты, несущие вирусную ДНК, сохраняют инфекционность в течение нескольких лет.
Канцерогенный эффект ВЛКРС проявляется в зависимости от иммунобиологического состояния организма и действия стресс-факторов. Отмечена также более выраженная генетическая устойчивость к ВЛКРС отдельных пород и линий животных.
Эпизоотологические данные
Восприимчивые животные:
КРС всех возрастов и разводимых пород и помесей, но чаще эту болезнь отмечают у животных старше 4 лет.
Телята до 6-месячного возраста резистентны к ВЛКРС. Устойчивость телят обусловлена колостральным иммунитетом.
Источник возбудителя инфекции - больные и инфицированные животные.
Способы передачи:
Пренатальная (внутриутробная) - около 10%. Вирус передается от матери потомству во время последних 6 мес внутриутробной жизни, а не через половые клетки - Транспланцетарно
Постнатальная (горизонтальная) - передача вируса через молоко или при контакте. В большинстве случаев (более 90%) вирус передается с инфицированными лимфоцитами - Контактно, алиментарно, ятрогенно
Факторы передачи: Кровь, молоко и др секреты и экскреты с лимфоидными клетками инфицированных и больных животных
Интенсивность ЭП - медленно развивающаяся инфекционная болезнь.
Сезонность не выявляется.
Природно-географические и климатические факторы не влияют на распространение болезни
Напряженность ЭП зависит от породы , возраста, физиологического состояния и уровня эксплуатации животных.
Патогенез
Стадии:
Инициация: Лейкозогенный фактор (радиация, вирусы и др.) действует на стволовые кроветворные клетки II-III классов, вызывая их опухолевую трансформацию в результате мутационного превращения протоонкогенов в онкогены и инактивации антионкогенов
Промоция: Активация и гиперпролиферация лейкозных клеток при действии промотора с формированием клона лейкозных клеток, идентичных по фенотипу и генотипу (моноклоновая стадия)
Инфильтрация: «Расселение» лейкозных клеток в костном мозгу с угнетением нормального гемопоеза
Прогрессия: Формирование множества клонов лейкозных клеток, различающихся по фенотипу и генотипу (поликлоновая стадия), и естественный отбор наиболее автономных из них, что ведет к «озлокачествлению» заболевания
Метастазирование: Образование очагов патологического кроветворения вне костного мозга за счет способности лейкозных клеток к инвазии, интра- и экстравазации, миграции по сосудистой системе, имплантации ипролиферации в различных тканях и органах
Течение и клиническое проявление
Длительный латентный период (инкубационный период; 14-60 дней), во время которого в крови выявляют ВЛКРС и антитела к нему.
При спонтанном заражении этот период длится от 2 до 6 лет.
Инфекционный процесс при лейкозе развивается медленно и незаметно.
Стадии:
Предлейкозная стадия:
Относительный лимфоцитоз (до 14 • 10%/л) за счет лимфоидных клеток, характерных для подозрительных по заболеванию по «лейкозному ключу».
Начальная (Доклиническая) стадия:
Отсутствие клинических признаков болезни
Число лейкоцитов колеблется от 15 • 10%/л до 40 • 10%/л, а среди лимфоцитов преобладают юные и средние клетки.
Гематологические изменения стабильны
Общее состояние животного - упитанность, молочная продуктивность и воспроизводительная функция - в норме
При обострении хронического течения болезни могут появляться такие признаки, как понижение удоя, истощение и т.д.,
Развернутая (Клинико-гематологическая) стадия (1-2 мес -> 3 года):
Гематологические сдвиги
Ухудшается общее состояние
Быстрая утомляемость
Плохой аппетит
Понижаются удои
Прогрессирует истощение
Возможна атония преджелудков, сменяющаяся диареей
Перкуссия - увеличение сердца. Число пульсовых ударов достигает 110-120 в 1 мин, пульс слабого наполнения, волна малая. Сердечный толчок ослаблен.
При сердечной слабости у животного развиваются отеки подкожной клетчатки в области подгрудка и межчелюстного пространства.
Специфический признак - прогрессирующее значительное симметричное, но неравномерное увеличение поверхностных (околоушных, нижнечелюстных, заглоточных, предлопаточных, надвыменных и др.) лимфатических узлов. Размер лимфатических узлов достигает 5-20 см и более, они безболезненные, подвижные, эластичной или плотной консистенции.
У молодняка возможны опухолевидные разрастания зобной железы, обусловливающие затрудненное дыхание.
При значительном увеличении селезенки перкуссией устанавливают притупленный или тупой звук, в некоторых случаях болезненность.
Возможен разрыв селезенки, и животное внезапно погибает вследствие внутреннего кровоизлияния
Увеличение печени. В тяжелых случаях ее границы сдвигаются назад и вниз, что устанавливают перкуссией.
У некоторых (3-5% случаев) больных лейкозами животных отмечают экзофтальмию (пучеглазие).
Лейкемическая картина крови (число лейкоцитов 40 • 10%/л и более), увеличение количества молодых, недифференцированных клеток в лейкоцитарной формуле (до 5%).
Терминальная (опухолевая) стадия - дальнейшее развитие патпроцесса и более резким проявлением клинических признаков:
Значительно увеличенные лимфатические узлы, которые могут заметно выступать на теле
Отеки подкожной клетчатки в области подгрудка, межчелюстного пространства, конечностей
Число лейкоцитов в крови иногда понижается, при этом преобладают патологические формы. Это приводит к крайнему истощению органов кроветворения, блокаде иммунной системы и заканчивается смертью животного.
Кожная форма лейкоза:
На теле - узелковые припухлости диаметром до 2,5 см, хорошо заметные на шее, спине, крестце и бедрах.
В течение нескольких недель происходит облысение припухлости, ее поверхность покрывается корочкой, состоящей из эпителия и экссудата. Затем корочки отпадают, а облысевшие участки вновь покрываются шерстью
Через несколько месяцев после кажущегося выздоровления наступает рецидив с появлением тех же признаков болезни. Происходит инфильтративное поражение висцеральных органов, и животное погибает.
Патолого-анатомические признаки
Увеличение лимфатических узлов (особенно средостенных и брыжеечных) которые не спаяны между собой
Поверхность разреза - саловидная, рисунок строения слегка или совсем стерт.
Селезенка увеличена (длиной от 48 до 100 см):
Поверхность разреза - красная, сочная, зернистая.
Увеличенные фолликулы:
Обычно вишнево-красного или сероватого цвета. У некоторых животных фолликулы могут быть малиново-красного цвета.
Возвышаются над поверхностью разреза
Почки:
Макроскопических изменений обычно не выявляют
У некоторых животных можно наблюдать сероватую бугристость размером 1-5 мм и более.
При гистологическом исследовании выявляют системную диффузную лейкозную инфильтрацию во всех органах кроветворения: костном мозге, селезенке, лимфатических узлах, а также пейеровых бляшках и солитарных фолликулах кишечника, в печени, почках, сердце, легких, скелетных мышцах.
Гистологический анализ:
В лимфатических узлах - общий рисунок строения, состояние капсулы, трабекул, светлых центров, синусов, мякотных тяжей
В селезенке - состояние капсулы, трабекул, белой и красной пульпы, наличие границ фолликулов.
В паренхиматозных органах - наличие и локализацию лимфоклеточных инфильтратов.
В костном мозге грудной кости возрастает число лимфобластов и недифференцированных клеток с нуклеолами.
Гемобластозы по характеру и месту локализации опухолевых разрастаний, по морфологии и принадлежности пролиферирующих клеток к определенным росткам гемопоэза разделены на 2 группы:
Лейкозы - системные поражения органов кроветворения:
Лимфоидный
Миелоидный
Моноцитарный
Недифференцированный
Гематоскаркомы - сопровождающиеся опухолевым ростом:
Лимфосаркома
Ретикулосаркома
Лимфогрануломатоз
Миеломная болезнь
Правила 156
Профилактические мероприятия
В целях предотвращения возникновения и распространения лейкоза владельцы восприимчивых животных обязаны:
Предоставлять по требованиям специалистов госветслужбы восприимчивых животных для осмотра
Извещать в течение 24 часов специалистов госветслужбы обо всех случаях заболевания или гибели восприимчивых животных, а также об изменениях в их поведении, указывающих на возможное заболевание
Принимать меры по изоляции подозреваемых в заболевании восприимчивых животных, а также восприимчивых животных, находившихся в одном помещении с подозреваемыми в заболевании восприимчивыми животными, которые могли контактировать с ними, а также обеспечить изоляцию трупов павших восприимчивых животных
Выполнять требования специалистов госветслужбы о проведении в личном подсобном хозяйстве, крестьянском (фермерском) хозяйстве, хозяйстве индивидуального предпринимателя, в организациях, в которых содержатся восприимчивые животные противоэпизоотических и других мероприятий
Соблюдать условия, запреты, ограничения в связи со статусом региона, на территории которого расположено хозяйство
Не допускать смешивания восприимчивых животных из разных стад при их выпасе и водопое.
Поступившие в хозяйство восприимчивые животные подвергаются серологическим исследованиям на лейкоз методами
В целях доказательства отсутствия циркуляции возбудителя в хозяйствах специалистами госветслужбы проводятся:
Отбор проб крови для серологических исследований методами:
Восприимчивых животных старше 6-месячного возраста (за исключением быков-производителей (доноров), коров-доноров, эмбрионов, восприимчивых животных, используемых для получения крови или сыворотки крови в целях производства биологических препаратов (животные-продуценты) - 1 раз в год;
От животных-продуцентов - 2 раза в год с интервалом не менее 180 календарных дней;
Ветеринарно-санитарная экспертиза продуктов убоя (за исключением крови), полученных от восприимчивых животных.
Диагностические мероприятия
Отборы проб:
От восприимчивых животных старше 6 месяцев - пробы крови для серологических исследований в объеме 5 - 7 мл без антикоагулянта или с фактором свертывания крови
От восприимчивых животных в возрасте от 15 календарных дней до 6 месяцев включительно - пробы крови для молекулярно-биологических исследований в объеме 5 - 7 мл с антикоагулянтом
От восприимчивых животных старше 6 месяцев, давших положительный результат при серологических исследованиях - пробы крови для гематологических исследований в объеме 5 - 7 мл с антикоагулянтом
От трупов восприимчивых животных: фрагменты селезенки, лимфатических узлов, грудной кости, печени, почек, легких, сердца, органов пищеварения (в случае их поражения), матки и скелетных мышц длиной 2 см, шириной 2 см, толщиной 1 см.
Патологический материал отбирается в случае, если с момента гибели или убоя восприимчивого животного прошло не более 8 часов.
Пробы должны быть помещены в емкости с герметично закрывающейся крышкой и законсервированы 10-процентным раствором формалина в соотношении 1:30.
Пробы крови для серологических и гематологических исследований должны отбираться не ранее, чем через 14 календарных дней после дня введения восприимчивым животным живых вакцин или иммунобиологических лекарственных препаратов-аллергенов, дня отела, не позднее чем за 14 календарных дней до дня отела
Пробы крови для гематологических исследований должны отбираться не позднее 7 календарных дней со дня получения положительных результатов серологических исследований.
Транспортировка:
Пробы биологического и/или патологического материала помещаются в герметичные контейнеры, охлаждаются и на период транспортирования помещаются в термос со льдом или иным охладителем.
При направлении проб крови от восприимчивых животных к сопроводительному письму должна прилагаться опись проб крови с указанием порядковых номеров проб, инвентарных номеров или кличек восприимчивых животных, их пола и возраста, даты последнего введения восприимчивым животных живых вакцин или иммунобиологических лекарственных препаратов-аллергенов, а также даты отела или даты планового отела коров (нетелей), от которых отобраны пробы крови.
Лабораторные исследования:
Гистологические методы
Гематологические методы
Серологические исследования - методы ИФА и/или РИД
Молекулярно-биологические исследования - ПЦР
Диагноз на лейкоз считается установленным в одном из следующих случаев:
Получен положительный результат при гематологическом исследовании;
Обнаружены патологоанатомические изменения, характерные для лейкоза при гистологическом исследовании;
Получен положительный результат при серологических исследованиях.
Результаты серологических исследований являются положительными при обнаружении антител к возбудителю.
В случае, если получен положительный результат при проведении серологических исследований, при отрицательных результатах гематологических исследований и отсутствии патологоанатомических изменений восприимчивые животные считаются инфицированными восприимчивыми животными.
В случае, если получен положительный результат гематологических исследований или обнаружены патологоанатомические изменения восприимчивое животное считается больным восприимчивым животным.
Ограничения
Должны быть определены:
Эпизоотический очаг - место нахождения источника
и факторов передачи возбудителя в тех границах,
в которых возможна его передача восприимчивым животным
Резервация - территория, предназначенная для содержания
инфицированных восприимчивых животных, в условиях,
исключающих их контакт с другими восприимчивыми
животными, если в хозяйстве суммарное количество
больных и инфицированных восприимчивых животных либо
количество инфицированных восприимчивых животных
составляет 5% и более процентов от общего количества
восприимчивых животных
Неблагополучный пункт - территория вокруг эпизоотического очага, радиус которой составляет от 1 км до 5 км от границ эпизоотического очага и зависит от эпизоотической ситуации, ландшафтно-географических особенностей местности, хозяйственных, транспортных и других связей между хозяйствами, расположенными на указанной территории
В эпизоотическом очаге:
Запрещается:
Вывоз (вывод) восприимчивых животных, за исключением вывоза восприимчивых животных на убой на предприятия по убою животных или оборудованные для этих целей убойные пункты или вывоза восприимчивых животных в резервацию;
Посещение территории посторонними лицами, кроме персонала, выполняющего производственные (технологические) операции,
Сбор, обработка, хранение, вывоз и использование спермы, яйцеклеток и эмбрионов для искусственного осеменения животных, а также использование быков-производителей для случки
Совместное содержание в помещениях или на выгульных площадках инфицированных, больных и здоровых восприимчивых животных
Совместное доение больных, инфицированных и здоровых восприимчивых животных
Использование для доения больных, инфицированных и здоровых восприимчивых животных одних и тех же доильных аппаратов, не прошедших дезинфекцию
Сбор в общую емкость молока при доении больных, инфицированных и здоровых восприимчивых животных
Получение крови от животных-продуцентов
Использование больных, инфицированных восприимчивых животных и полученного от них приплода для воспроизводства стада
Использование молозива от больных, инфицированных коров для выпойки телят
Проведение отелов здоровых, больных и инфицированных восприимчивых животных в одном помещении (родильном отделении)
Совместный выпас больных, инфицированных и здоровых восприимчивых животных;
Осуществляется:
Отбор проб крови с интервалом в 90 календарных дней в целях проведения серологических исследований восприимчивых животных до получения двукратных отрицательных результатов
Молекулярно-биологических исследований восприимчивых животных, а также гематологических исследований вновь выявленных инфицированных восприимчивых животных
Изолированное содержание и направление на убой больных восприимчивых животных в течение 15 календарных дней с даты установления диагноза на лейкоз
Направление на убой инфицированных восприимчивых животных в случае, если в хозяйстве суммарное количество больных
и инфицированных восприимчивых животных составляет до 5% от общего количества восприимчивых животных;
Вывоз в резервацию инфицированных восприимчивых животных в течение 15 календарных дней с даты обнаружения у них антител к возбудителю, в случае, если в хозяйстве суммарное количество больных и инфицированных восприимчивых животных составляет 5% и более процентов от общего количества восприимчивых животных, или направление инфицированных восприимчивых животных на убой на предприятия по убою животных или оборудованные для этих целей убойные пункты;
Оборудование дезинфекционных ковриков и/или ванночек на входе (выходе) и дезинфекционных ковриков на въезде (выезде) на территорию (с территории) эпизоотического очага;
Уничтожение запасов спермы, полученных от инфицированных быков в течение 60 календарных дней до даты обнаружения у них антител к возбудителю;
Обеспечение смены одежды, обуви при входе на территорию эпизоотического очага и выходе с территории эпизоотического очага;
Обеспечение дезинфекции одежды, обуви при выходе с территории эпизоотического очага
Дезинфекционная обработка всей поверхности транспортных средств при выезде с территории эпизоотического очага
Дезакаризация и дезинсекция помещений, в которых содержатся восприимчивые животные
Обеспечение отсутствия на территории эпизоотического очага животных без владельцев
Молоко и молозиво, полученные от больных восприимчивых животных, подлежат уничтожению.
Молозиво, полученное от инфицированных восприимчивых животных подвергается термической обработке
Молоко, полученное от здоровых восприимчивых животных, реализуется на молокоперерабатывающие предприятия и/или отгружается на собственную переработку и/или используется внутри хозяйства.
В неблагополучном пункте:
Запрещается проведение сельскохозяйственных ярмарок, выставок (аукционов) и других мероприятий, связанных с перемещением восприимчивых животных;
Осуществляется проведение клинического осмотра и серологических исследований на лейкоз восприимчивых животных старше 6-месячного возраста в соответствии с главой V настоящих Правил.
В резервации:
Запрещается:
Вывоз (вывод) больных и инфицированных восприимчивых животных за исключением вывоза больных и инфицированных восприимчивых животных на убой на предприятия по убою животных или оборудованные для этих целей убойные пункты;
Контакт инфицированных восприимчивых животных с другими животными;
Сбор в общую емкость молока при доении инфицированных и больных восприимчивых животных;
Сбор, обработка, хранение, вывоз и использование спермы, яйцеклеток и эмбрионов для искусственного осеменения животных, сбор крови или сыворотки крови для производства биологических препаратов, а также использование быков-производителей для случки коров и телок;
Осуществляется:
Обустройство помещения для содержания восприимчивых животных, расположенного на огороженной территории с расстоянием от помещения до ограды не менее 50 метров, в случае содержания восприимчивых животных без выгула
Помещения, расположенного на территории с двойной оградой с расстоянием от ограды до животноводческого помещения не менее 10 метров, между внутренней и внешней оградами не менее 50 метров, в случае содержания восприимчивых животных с выгулом
Участка местности, огороженного двойной оградой с расстоянием между внешней и внутренней оградами не менее 50 метров в случае содержания восприимчивых животных на условиях круглогодичного пастбищного содержания
Отбор проб крови от инфицированных восприимчивых животных для проведения гематологических исследований каждые 6 месяцев;
Направление больных восприимчивых животных на убой в течение не более 15 календарных дней с даты установления диагноза на лейкоз;
Обеспечение смены одежды, обуви при входе на территорию резервации и выходе с территории резервации;
Обеспечение дезинфекции одежды, обуви при выходе с территории резервации
Дезинфекционная обработка всей поверхности транспортных средств при выезде с территории резервации
Дезакаризация и дезинсекция помещений, в которых содержатся восприимчивые животные;
Обеспечение отсутствия на территории резервации животных без владельцев.
Отмена ограничений осуществляется:
После вывоза из эпизоотического очага больных и инфицированных восприимчивых животных
Убоя последнего больного и инфицированного восприимчивого животного
Получения двух подряд, интервалом в 90 календарных дней, отрицательных результато ерологических исследований восприимчивых животных старше 6-месячного возраста, и отрицательных результатов молекулярно-биологических исследований восприимчивых животных в возрасте от 15 календарных дней до 6 месяцев включительно