Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Сельскохозяйственная биотехнология. Лабораторный практикум
.pdf
Словарь терминов
In vitro – выращивание растительных объектов «в стекле» (пробирке, колбе, биореакторе) на искусственных питательных средах,
в асептических условиях.
Тотипотентность – свойство соматических клеток полностью
реализовать генетический потенциал целого организма.
Омнипотентность ядер – сохранение ядрами соматических клеток растений всех потенций ядра зиготы, то есть сохранение всей генетической информации.
Культура тканей in vitro – выращивание в длительной пересадочной культуре тканей, возникших путем пролиферации клеток изолированных сегментов разных органов или самих органов растений.
Культура органов in vitro – асептическое выращивание на искусственной питательной среде в пересадочном режиме изолированных
корней, стеблевых апексов, незрелых частей цветка, незрелых плодов.
Культура корней in vitro – асептическое выращивание на искусственной питательной среде в пересадочном режиме изолированных
корней.
Культура меристем in vitro – асептическое выращивание на ис-
кусственной питательной среде изолированного апекса или пазушной
почки побега конуса нарастания с одним или двумя листовыми примордиями.
Культура суспензионная, или культура клеток in vitro, – асептическое выращивание отдельных клеток или их небольших групп
во взвешенном состоянии в жидкой питательной среде.
Культура зиготических зародышей in vitro – асептическое выра-
щивание на искусственной питательной среде незрелых или зрелых
изолированных зародышей.
Апекс – верхушечная часть стебля или корня.
Меристема – образовательная ткань с мелкими, активно деля-
щимися клетками.
Апикальное доминирование – явление подавления роста боковых
почек побега в присутствии терминальной почки.
61
Адвентивные почки – почки, возникшие из тканей и клеток растения, обычно их не образующих.
Фитогормоны (гормоны растений) – биологически активные со-
единения, образующиеся в растениях в малых количествах, вызывающие специфический ростовой или формообразовательный эффект.
Ауксины – фитогормоны (ИУК, НУК, 2,4-Д), активизирующие
рост стеблей и корней, стимулирующие образование корней у проростков.
Цитокинины – фитогормоны (кинетин, 6-БАП), активизирующие
развитие меристем, стимулирующие образование почек.
Гиббереллины – фитогормоны (ГК и др.), активизирующие рост
стеблей, вызывающие прорастание семян.
ГК – гибберелловая кислота.
ИУК – индолилуксусная кислота.
НУК – нафтилуксусная кислота.
2,4-Д – 2,4-дихлорфеноксиуксусная кислота.
6-БАП – 6-бензиламинопурин.
Клональное микроразмножение или микроклональное размножение – получение in vitro неполовым путем растений, генетически
идентичных исходному (метод вегетативного размножения растений
в культуре in vitro).
Эксплант – фрагмент ткани или органа, инкубируемый на питательной среде самостоятельно или используемый для получения первичного каллуса.
Пролиферация – новообразование клеток и тканей путем размножения уже существующих.
Дедифференциация – переход специализированных клеток к пролифирации и неорганизованному каллусному росту (утрата клетками
специализации).
Редифференциация – переход специализированных клеток из одного состояния дифференцировки в другое с предшествующими делениями или непосредственно.
Дифференциация – комплекс процессов, приводящих к различиям между клетками.
62
Дифференцировка – состояние специализации клеток, отличающее их от других.
Морфогенез in vitro – процесс формообразования, то есть заложения, роста и развития клеток (цитогенез), тканей (гистогенез) и органов (органогенез) в культуре клеток и тканей in vitro.
Ризогенез – процесс заложения, роста и развития корней.
Регенерация – восстановление целостного организма из клетки,
ткани, органа.
Эмбриоидогенез – процесс образования зародышеподобных
структур (эмбриоидов) неполовым путем в культуре тканей и клеток
in vitro.
Каллус – группа дедифференцированных клеток, возникших in
vivo или in vitro путем неорганизованной пролиферации.
Культура каллусов in vitro – выращивание в длительной пересадочной культуре каллусов, возникших путем дедифференциации и
пролиферации клеток, тканей, органов растений.
Культура «привыкших» тканей – выращивание тканей, возникших
путем редифференциации или мутации клеток нормальных каллусных
тканей и способных расти на питательных средах без гормонов.
Трансплант – часть каллусной ткани, используемая для переноса
на свежую питательную среду.
Инокулюм – часть клеточной суспензии, используемая для переноса на свежую питательную среду.
Субкультивирование – процесс переноса транспланта или инокулюма в культуральный сосуд на свежую питательную среду.
Цикл выращивания – период от помещения клеточного инокулюма или каллусного транспланта на питательную среду до последующего субкультивирования.
Ростовой цикл – рост популяции клеток в цикле периодического
выращивания, характеризующийся сигмоидальной (S-образной) кривой.
Фазы ростового цикла: латентная (лаг-фаза), экспоненциальная
(лог-фаза, фаза логарифмического роста), замедления роста, стационарная, деградации.
63
Штамм – культура, возникшая после первого субкультивирования и состоящая из многих клеточных линий, возникших из клеток
первичного каллуса.
Линия – культура, возникшая из штамма путем селекции или
клонирования, имеющая маркерные признаки.
Клон – культура, возникшая из одной клетки.
Клеточная селекция in vitro – метод выделения мутантных клеток
и сомаклональных вариаций с помощью селективных условий.
Сомаклональная изменчивость (вариации и варианты) – фенотипическое выражение непостоянства ядерного и органелльных цитоплазматических геномов культивируемых клеток. От истинных генных мутаций отличаются большей частотой возникновения и комплексностью
изменений (изменения в структуре генов, хромосом, геномов).
Эпигенетические вариации – фенотипическое выражение дифференциальной активности генов. От мутаций и сомаклональных вариаций отличаются тем, что не сохраняются в цикле клетка-растениеклетка.
Соматическая (парасексуальная) гибридизация – способ создания гибридных клеточных линий и соматических гибридов растений
путем генетической рекомбинации хромосом, генов ядра и органелл
вне сексуального цикла, например путем слияния изолированных
протопластов.
Изолированный протопласт – растительная клетка, лишенная
клеточной стенки с помощью ферментативного или механического
разрушения.
Цитопласт – ограниченный мембраной участок цитоплазмы,
возникший при фрагментации изолированного протопласта.
Субпротопласт – изолированный протопласт, потерявший часть
цитоплазмы, сохранивший ядро.
Слияние изолированных протопластов – формирование одной
клетки из двух и более объединением их поверхностных мембран.
Культура изолированных протопластов – выращивание клеток,
лишенных стенок, в жидкой или на агаризованной среде, содержащей
64
в качестве дополнительного компонента осмотически активное вещество (стабилизатор) в оптимальной для данного вида концентрации.
При регенерации стенок изолированные протопласты превращаются
в культуру клеток.
Соматический гибрид – растение, полученное путем гибридизации изолированных протопластов.
Цибрид – растение, полученное при слиянии изолированного
протопласта с цитопластом, протопластом с инактивированным ядром или с энуклеированным протопластом.
Кариотип – набор хромосом, характерных для данного вида.
Моноплоид – ядро, клетка, организм, характеризующиеся основ-
ным числом хромосом в полиплоидной серии (символ n).
Гаплоид – ядро, клетки, организм, характеризующиеся набором
хромосом, представляющим половину полного набора, свойственного
виду (символ n).
Диплоид – ядро, клетки, организм, характеризующиеся двойным
набором гомологичных хромосом, представленным числом, характерным для данного вида (символ 2n).
Полиплоид – ядро, клетки, организм, характеризующиеся умноженным основным числом хромосом (символ 3n, 4n и т.д.).
Анеуплоиди я – изменение кариотипа, при котором число хромосом в клетках не кратно гаплоидному набору (n). Отсутствие в хромосомном наборе диплоидного организма одной хромосомы называется моносомией (2n – 1); отсутствие двух гомологичных хромосом –
нуллисомией (2n – 2); наличие дополнительной хромосомы называется трисомией (2n + 1).
Мутация – изменения в генетическом материале клеток путем
перестройки ДНК ядер и органелл, изменений в структуре хромосом
или уровне плоидности организма.
Рецессив – ген или генетически обусловленный признак, проявляющийся в диплоидной клетке или организме при условии, когда
оба набора хромосом несут данные гены.
Доминант – ген, проявляющийся как признак при условии, когда
гомологичные наборы имеют разные гены.
65
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
1. Сельскохозяйственная биотехнология: метод. указания / А.В. Кильчевский,
Т.В. Никонович, В.В. Французенок, В.В. Ермоленков, Е.П. Воробьева. –
Горки: Белорус. гос. сельскохоз. акад., 1999. – 24 с.
2. Кривов Н.В. Биохимия и физиология микроорганизмов: лаборат. практи-
кум. – Самара: СГТУ, 2016. – 76 с.
3. Цыренов В.Ж. Основы биотехнологии: культивирование изолированных кле-
ток и тканей растений: учеб.-метод. пособие. – Ч. 2. – Улан-Удэ, 2003. – 58 с.
4. Воинов Н.А., Волова Т.Г. Направления и возможности использования
культуры изолированных тканей растений. http://medbe.ru/materials/
5. Регуляторы роста и развития растений в биотехнологиях (26–28 июня
2001 г.). Тезисы докладов VI международной конференции. – М.: Изд-во
МСХА, – С. 344.
6. Чистова А.В., Монахос С.Г. Репродукция самонесовместимых линий мор-
кови (daucus carota L.) с использованием культуры тканей // Известия
ТСХА. Вып. 3. – 2014. – С. 43–50.
7. Тюкавин Г.Б. Основы биотехнологии моркови / Под общ. ред.
В.Ф. Пивоварова. – М., 2007. – 481 с.
8. Биотехнология растений: учебник и практикум для бакалавриата и маги-
стратуры / Л.В. Назаренко, Ю.И. Долгих, Н.В. Загоскина, Г.Н. Ралдугина. –
2-е изд., испр. и доп. – М., 2018. – 161 с.
9. Чистова А.В. Совершенствование in vitro технологии получения удвоен-
ных гаплоидов для селекции гибридов моркови на основе самонесовме-
стимости: дис. на соискание учёной степени канд. с.-х. наук, специаль-
ность 06.01.05. – М., 2014. – 129 с.
10. https://studme.org/211657/geografiya/laboratornaya_rabota_izolirovanie_kultivi
rovanie_apikalnyh_meristem_kartofelya
11. http://genetiku.ru/books/item/f00/s00/z0000016/st028.shtml
12. Дитченко Т.И. Культура клеток, тканей и органов растений. – Минск: БГУ,
2007. – 102 с.
13. Лабораторный практикум по биохимии и биофизике / В.И. Резяпкин,
В.С. Слышенков, И.Б. Заводник, В.Н. Бурдь, Л.И. Сушко, Е.И. Романчук,
Л.М. Караедова. – Гродно: ГрГУ им. Я. Купалы, 2009.
https://elib.grsu.by/doc/11215
14. Методические указания для выполнения лабораторных работ по дисци-
плине «Химические регуляторы роста и их применение» / составитель
Л.Е. Бадина. – Мичуринск: Изд-во Мичуринск. гос. аграрн. ун-та, 2006.
15. http://labx.narod.ru/documents/acetokarminovye_micropreparaty. html
66
16. Хлебова Л.П., Яценко Е.С., Сперанская Н.Ю.: практикум по биотехноло-
гии. – Барнаул: Изд-во Алтайск. гос. ун-та, 2016. – 137 с.
17. https://otvet.mail.ru/question/172920794
18. https://www.activestudy.info/razvitie-endosperma-i-zarodysha-u-rastenij/
19. Krivov N.V. The influens of chronic gibberelin treatment on the expression of
the heterochronic mutation Cg2 // Maize Genetic Cooperation News Letter,
1994. – 68: 48.
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .............................................................................................................. 3
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 1. Изучение методов стерилизации при работе
с культурой изолированных клеток и тканей ......................................................... 4
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 2. Приготовление питательных сред
для культивирования изолированных клеток и тканей растений ....................... 11
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 3. Получение культуры тканей из моркови ..... 18
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 4. Выделение и культивирование
апикальных меристем картофеля .......................................................................... 24
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 5. Получение культуры изолированных
зародышей пшеницы .............................................................................................. 28
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 6. Количественное определение содержания
белка по альбумину методом Лоури .................................................................... 35
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 7. Определение различий в способе действия
регуляторов роста растений на прорастание семян злаковых культур ............... 40
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 8. Действие фитогормонов на рост растений .. 43
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 9. Микроклональное размножение растений ... 47
ЛАБОРАТОРНАЯ РАБОТА № 10. Мейоз и гаметогенез.................................... 54
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ................................................ 66
67
Учебное издание
Составитель КРИВОВ Николай Васильевич
Сельскохозяйственная биотехнология
Редактор О.Н. Акопян
Компьютерная верстка И.О. Миняева
Выпускающий редактор Е.С. Захарова
Подписано в печать 20.10.20
Формат 60×84 1/16. Бумага офсетная
Усл. п. л. 3,95. Уч.-изд. л. 3,92
Тираж 50 экз. Рег. № 166/20
_______________________________________________________________
Федеральное государственное бюджетное
образовательное учреждение высшего образования
«Самарский государственный технический университет»
443100, г. Самара, ул. Молодогвардейская, 244. Главный корпус
Отпечатано в типографии
Самарского государственного технического университета
443100, г. Самара, ул. Молодогвардейская, 244. Корпус № 8
68
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]