Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Основы микробиологии. Учебное пособие
.pdf
91
Оформление и анализ результатов исследований
Выполнить микробиологические исследования и сделать выводы
о микробиологической безопасности воды, упаковочных материалов,
посуды и инвентаря.
После ознакомления с данной темой студенты могут оценивать
микробиологическую безопасность воды, упаковочных материалов,
посуды и инвентаря.
Контрольные вопросы
1. Какие микробиологические показатели определяются согласно ГОСТ в
питьевой воде для оценки ее санитарного состояния?
2. Как часто проводят исследование питьевой воды для оценки ее
санитарного состояния?
3. Каким образом готовятся смывы с оборудования для оценки его сани-
тарного состояния?
4. Какие микробиологические показатели определяют в смывах с посуды?
5. Каким образом проводят микробиологический контроль упаковочных
материалов?
6. Что такое ОМЧ?
7. Дайте определение колифагам.
8. Какие способы обеззараживания воды Вам известны?
9. Каким образом определяется коли-титр и коли-индекс в питьевой воде?
10. На чем основан титрационный метод определения содержания общих и
колиформных бактерий?
[1, с. 172–182; 2, с. 65–90; 10, с. 10–20; 12, с. 10–20; 11; 13, с. 169–
174; 14]
91
92
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
Микроорганизмы заселяли Землю еще 3−4 млрд лет назад, задолго до появления высших растений и животных. Микробы представляют самую многочисленную и разнообразную группу живых существ. Микроорганизмы чрезвычайно широко распространены в природе и являются единственными формами живой материи, заселяющими любые, самые разнообразные субстраты (среды обитания),
включая и более высокоорганизованные организмы животного и растительного мира.
С помощью микроорганизмов осуществляются важные производственные процессы − хлебопечение, виноделие и пивоварение, производство органических кислот, ферментов, пищевых белков, гормонов,
антибиотиков и других лекарственных препаратов.
Для успешного решения задач, связанных с повышением качества и биологической ценности продуктов питания, необходима система мероприятий, улучшающая санитарно-гигиеническое состояние
производства, а также условия окружающей среды.
В России государственный контроль санитарно-гигиенических
условий производства осуществляют органы санитарного надзора.
Качество воды, пищевых продуктов гарантировано стандартами, комплексными методами проверки, в том числе и санитарномикробиологическими исследованиями.
Заранее невозможно предусмотреть задачи, в решении которых
потребуется будущему специалисту знания по микробиологии. Но он
в полной мере должен уметь оценивать микробиологическую безопасность непродовольственных товаров и пищевых продуктов как
важнейшее потребительское свойство на современном этапе развития
и элемент конкурентной борьбы на мировом рынке, осознавать ответственность за торговлю некачественными и опасными товарами,
иметь навыки организации и проведения экспертизы микробиологической безопасности.
92
93
Библиографический список
Основная литература
1. Жарикова, Г. Г. Микробиология продовольственных товаров.
Санитария и гигиена : учебник для вузов / Г. Г. Жарикова. – 3 изд. стер. –
М. : Издательский центр «Академия», 2008. – 304 с.
Дополнительная литература
2. Королев, А. И. Гигиена питания : учебник для студентов
вузов / А. И. Королев. – 3 изд. перераб. – М. : Издательский центр
«Академия», 2008. – 528 с.
3. Вербина, Н. М. Микробиология пищевых производств : учеб-
ник / Н. М. Вербина, Ю. В. Каптерева. – М. : Агропромиздат, 1988. –
256 с.
4. ГОСТ 26668-85 «Продукты пищевые и вкусовые. Порядок от-
бора проб для микробиологических анализов».
5. ГОСТ 10444.12-88 «Продукты пищевые. Метод определения
дрожжей и плесневых грибов».
6. ГОСТ 9225-84 «Молоко и молочные продукты. Методы микро-
биологического анализа».
7. ГОСТ 25102-90 «Молоко и молочные продукты. Методы опре-
деления содержания спор мезофильных анаэробных бактерий».
8. Методы микробиологического контроля продуктов детского,
лечебного питания и их компонентов : методические указания МУК
4.2.577-96. – М. : Информационно-издательский центр Минздрава
России, 1998. – 94 с.
9. Королева, Н. С. Основы микробиологии и гигиены молока и
молочных продуктов / Н. С. Королева. – М. : Легкая и пищевая промышленность, 1984. – 168 с.
10. Лерина, И. В. Лабораторные работы по микробиологии :
учеб. пособие для товаровед. и технол. фак. торг. вузов / И. В. Лерина,
А. И. Педенко. – 2 изд., перераб. – М. : Экономика, 1986. – 128 с.
11. Методы контроля. Биологические и микробиологические фак-
торы. Санитарно-микробиологический анализ питьевой воды : методические указания 4.2.1018-01.
12. Микробиология : практикум / Л. Г. Бранцевич, Л. Н. Лысенко,
В. В. Овод, А. В. Гурбик. – Киев : Вища школа, 1987. – 200 с.
93
94
13. Микробиология, санитария и гигиена : учебник для вузов /
К. А. Мудрецова-Висс, А. А. Кудряшова, В. П. Дедюхина. –
Владивосток : Изд-во ДВГАЭУ, 1997. – 312 с.
14. СанПиН 2.1.4.1074-01 «Питьевая вода. Гигиенические требо-
вания к качеству воды централизованных систем питьевого водоснабжения. Контроль качества». Действительно с 1 января 2002 г. –
М. : Изд-во стандартов, 2002.
15. Слюсаренко, Т. П. Лабораторный практикум по микробиоло-
гии пищевых производств / Т. П. Слюсаренко. – М. : Легкая и пищевая промышленность, 1984. – 208 с.
94
95
ПРИЛОЖЕНИЕ 1
ПРАВИЛА ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ
В МИКРОБИОЛОГИЧЕСКОЙ ЛАБОРАТОРИИ
1. В микробиологических лабораториях учебных заведений не разрешается
работать с живыми патогенными микроорганизмами.
2. Рабочее место, где непосредственно проводится работа с культурами
микроорганизмов, следует дезинфицировать не только до начала работы, но и
после ее окончания растворами лизола или хлорамина, а также 70%-ными (по
объему) растворами изопропилового или этилового спиртов.
3. Нельзя загромождать рабочее место посторонними предметами.
4. Все сосуды, содержащие реактивы и другие вещества, должны иметь
этикетки или быть пронумерованы, чтобы их нельзя было перепутать.
5. Нельзя пробовать на вкус химические вещества и питательные среды.
6. Нельзя работать в лаборатории без спецодежды. В микробиологической
лаборатории можно находиться только в белом халате.
7. По окончании работ в лаборатории дежурный и руководитель перед уходом обязаны проверить, закрыты ли все газовые и водяные вентили, потушены
ли спиртовки, выключены ли электронагревательные приборы и вентиляция,
убраны ли горючие вещества.
8. Работа под вакуумом должна производиться в очках, стеклянные сосуды
должны быть защищены экранами или обернуты полотенцем.
9. Проводить операции с нагревом, при которых используются кислоты или
щелочи, следует только в очках.
10. По окончании работы привести рабочее место в порядок.
11. Не оставлять в открытом состоянии реактивы, едкие щелочи и кислоты.
12. Сдать в мойку лабораторную посуду или вымыть её самому.
13. Нельзя находиться в небольших помещениях (боксах) при включенной
бактерицидной лампе.
14. Не разрешается в лаборатории курить, хранить и употреблять еду,
напитки, жевательную резинку.
15. К работе с автоклавом и другими сосудами под давлением допускаются
только подготовленные лица!
95
96
ПРИЛОЖЕНИЕ 2
КЛАССИФИКАЦИЯ ПАТОГЕННЫХ ДЛЯ ЧЕЛОВЕКА
МИКРООРГАНИЗМОВ III И IV ГРУПП ПАТОГЕННОСТИ
(ИЗВЛЕЧЕНИЕ ИЗ ПРИЛОЖЕНИЯ 5.1 К СП 1.2.011-94)
Бактерии III группа
1. Bordetella pertussis
2. Borrelia recurrentis
3. Campylobacter fetys
4. Campylobacter jejuni
5. Clostridium botulinium
6. Clostridium tetani
7. Corynebacterium diphteriae
8. Erysipelothrix rhusiopathiae
9. Helicobacter pylori
10. Leptospira interrogans
11. Listeria monocytogenes
12. Mycobacterium leprae
13. Mycobacterium tuberculosis Mycobacterium bovis Mycobacterium avium
коклюша возвратного тифа абсцессов, септецимий энтерита, холецистита ботулизма столбняка дифтерии эризепелоида гастрита, язвенной болезни желудка и
12-перстной кишки лептоспироза листериоза проказы туберкулеза
14. Neisseria gonorrhoeae
15. Neisseria meningitidis
16. Nocarolia asteroides
17. Proactinomyces israelii
18. Salmonella paratyphi A
19. Salmonella paratyphi В
20. Salmonella typhi
21. Shigellaspp.
22. Treponema pallidum
23. Yercinia pseudotuberculosis
24. Vibrio cholerae 01
IV группа
1. Aerobacter aerogenes
2. Bacillus cereus
3. Bacteroides spp.
4. Borrelia spp.
5. Bordetella bronchiseptica Bordetella parapertussis
6. Campylobacter spp.
7. Citrobacter
8. Clostridium perfringens Clostridium novyi Clostridium septicum Clostridium
histolyticum Clostridium bifermentans
9. E. coli
96
97
Окончание прил. 2
10. Eubacterium endocarditidis
11. Eubacterium lentum Eubacterium ventricosum гонореи, менингита, нокардиоза, актиномикоза паратифа А, паратифа В, брюшного тифа, дизентерии, сифилиса, псевдотуберкулеза, нетоксигенной диареи, энтерита, пищевой токсикоинфекции, абсцессов легких, бактериемии, клещевого спирохетоза, бронхосептикоза, паракоклюша, гастроэнтерита, гингивита, периодонтита местных воспалительных процессов, пищевой токсикоинфекции, газовой гангрены, энтерита
септического, эндокардита вторичных септецемий абсцессов
12. Flavobacterium meningoseptium
13. Haemophilus influenza
14. Hafnia alvei
15. Klebsiella ozaenae
16. Klebsiella pneumoniae
17. Klebsiella rhinoscleromatis
18. Mycobacterium spp. Photochromogens Scotochromogens Nonphotochromogens Rapid growers
19. Micoplasma hominis 1Micoplasma hominis 2 Micoplasma pneumoniae
20. Propionibacterium avidum
21. Proteus spp.
22. Pseudomonas aeruginosa
23. Salmonella spp.
24. Serratia marcescens
25. Staphilococcus spp.
26. Streptococcus spp. менингита, септецемий менингита, пневмонии, ларингита холецистита, цистита озены пневмонии риносклеромы микробактериозов
местных воспалительных процессов, пневмонии сепсиса, абсцессов пищевой
токсикоинфекции, местных воспалительных процессов, сепсиса сальмонеллезов
местных воспалительных процессов, сепсиса пищевой токсикоинфекции, септецемий, пневмонии пневмонии, тонзиллита, полиартрита, септецемий энтерита,
колита актиномикоза
27. Yersinia enterocolitica;
28. Actinomyces albus
97
98
ПРИЛОЖЕНИЕ 3
ПРИГОТОВЛЕНИЕ НЕКОТОРЫХ
КРАСИТЕЛЕЙ И ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД
1. Красители
Фуксин основной спиртовой раствор – насыщенный
Фуксин основной кристаллический – 10 г;
Этиловый спирт, 96 % – 100 мл.
Фуксин растворяют в 100 мл 96%-ного этанола. Раствор может храниться
долгое время в бутылке из темного стекла с притертой пробкой.
Фуксин основной карболовый – фуксин Циля
Фуксин основной кристаллический – 1 г;
Карболовая кислота (фенол) – 5 г;
Этиловый спирт, 96 % – 10 мл;
Дистиллированная вода – 100 мл.
При приготовлении раствора предварительно взвешивают 1 г фуксина основного кристаллического, вносят в фарфоровую ступку и растирают с 5 г карболовой кислоты, добавляя спирт небольшими порциями и дистиллированную
воду до полного растворения кристаллов, после чего приливают оставшуюся во-
ду. Приготовленный краситель ставят в термостат при 37 С на двое суток. Затем
отфильтровывают через складчатый бумажный фильтр.
Фуксин основной карболовый устойчив и может храниться долго. Хранить
следует в бутылке из темного стекла с притертой пробкой.
Фуксин основной карболовый можно приготовить другим способом:
Вначале готовят два раствора.
1-й раствор
Фуксин основной кристаллический – 1 г;
Этиловый спирт, 96 % – 10 мл.
Смесь растирают в фарфоровой ступке до полного растворения кристаллов
фуксина.
2-й раствор
Карболовая кислота – 5 г;
Дистиллированная вода – 95 мл.
Воду подогревают до 50 С для лучшего растворения карболовой кислоты.
Второй раствор вливают в первый, хорошо взбалтывают и фильтруют через
складчатый бумажный фильтр.
Фуксин основной, водный (фуксин Пфейффера)
Карболовый фуксин Циля – 10 мл;
Дистиллированная вода – 90 мл.
Водный фуксин нестоек, его лучше готовить непосредственно перед упо-
треблением. Раствор водного фуксина может храниться не более 10 дней.
98
99
Продолжение прил. 3
Карболовый генциановый фиолетовый
Генциановый фиолетовый (кристаллы) – 1 г;
Этиловый спирт, 96 % – 10 мл;
Карболовая кислота – 5 г;
Дистиллированная вода – 100 мл.
Техника приготовления карболового генцианового фиолетового такая же,
как карболового фуксина Циля.
При приготовлении карболового генцианового фиолетового можно также
готовить предварительно два раствора.
1-й раствор
Генциановый фиолетовый – 1 г;
Этиловый спирт, 96 % – 10 мл.
2-й раствор
Карболовая кислота – 5 г;
Дистиллированная вода – 95 мл.
Последовательность и способ приготовления первого и второго растворов
такие же, как и при приготовлении карболового фуксина Циля.
Приготовление красящих бумажек генцианвиолета (по Синеву)
Для приготовления бумажек фильтровальную бумагу предварительно ис-
пытывают на пригодность. Для этого полоску фильтровальной бумаги погружают в спиртовой раствор красителя (карболового генцианового фиолетового), высушивают на воздухе. Хорошая бумага окрашивается равномерно без пятен. Если небольшой кусок такой бумаги положить на стекло с несколькими каплями
воды, он сразу же пропитается водой и краситель через несколько секунд перейдет в раствор. Бумагу для пропитывания нарезают полосками (шириной 2,5–
3 см, длиной 30 см) и погружают в краситель так, чтобы смачивались обе поверхности. Затем полоски вынимают, высушивают на воздухе при комнатной
температуре или в термостате при 37 С.
Пропитывать красящиеся бумажки можно также спиртовым раствором ген-
цианвиолета следующего состава:
Генциановый фиолетовый (кристаллы) – 1 г;
Спирт этиловый, 96 % – 100 мл;
Глицерин – 5 мл.
Метиленовый синий (насыщенный спиртовой раствор)
3 г метиленового синего растворяют в 100 мл 96%-ного этанола. Раствор
выдерживают 2–3 дня, периодически взбалтывая. Затем фильтруют через бумажный фильтр. Раствор устойчив.
Раствор бриллиантовой зелени (раствор малахитового зеленого)
Водный насыщенный раствор готовится путем растворения 10 г малахито-
вого зеленого в 10 мл дистиллированной воды. Спиртово-водный раствор: 10 г
малахитового зеленого смешивается с 80 мл дистиллированной воды и 20 мл
96%-ного этанола.
99
100
Продолжение прил. 3
Метиленовый синий 1:40
1 мл насыщенного спиртового раствора метиленового синего смешивают с
40 мл дистиллированной воды.
Метиленовый синий, щелочной раствор (по Леффлеру)
К 100 мл дистиллированной воды прибавляют 30 мл насыщенного спирто-
вого раствора метиленового синего и 1 мл 1%-ного водного раствора гидроксида
калия.
Метиленовый синий по Финку
Отдельно взвешивают 0,9 г гидрофосфата натрия, 13,6 дигидрофосфата ка-
лия и 0,1 г метиленового синего. Каждую навеску растворяют в 500 мл дистиллированной воды. Смешивают 0,25 мл первого раствора с 99,75 мл второго и
100 мл третьего (рН 4,6).
Сафранин (водный)
10 мл 2,5%-ного раствора сафранина в 96%-ном этаноле смешивается со
100 мл дистиллированной воды.
Раствор Люголя (в модификации Грама)
В ступку вместимостью 30−50 мл помещают 1 г кристаллического йода и
2 г йодида калия, растирают смесь пестиком, добавляют 1 мл дистиллированной
воды, продолжают растирать кристаллы и добавляют еще 5 мл воды. При этом
йод растворяется в йодиде калия. Раствор количественно переносят в склянку и
доводят общий объем до 300 мл. Раствор годен не более 30 дней, хранят его в
прохладном месте, в темноте, лучше в посуде оранжевого цвета.
Раствор Люголя для выявления гликогена и гранулезы
Кристаллический йод – 1 г;
Йодид калия – 3 г;
Вода дистиллированная – 300 мл.
Раствор готовят так же, как и предыдущий.
Для обнаружения гликогена можно также использовать крепкий раствор
йода
Кристаллический йод – 7 г;
Йодид калия – 20 г;
Вода дистиллированная – 100 мл.
Краска Муромцева
Готовят два раствора:
1-й раствор
Фуксин основной – 0,15 г;
Спирт, 96 % – 20 мл;
Кристаллическая карболовая кислота – 10 г.
100
Соседние файлы в предмете [НЕСОРТИРОВАННОЕ]