Добавил:
ivanov666
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Микробиологическая безопасность при зооантропонозных болезнях. Учебное пособие.pdf
1
МИНИСТЕРСТВО СЕЛЬСКОГО ХОЗЯЙСТВА РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования
«БУРЯТСКАЯ ГОСУДАРСТВЕННАЯ СЕЛЬСКОХОЗЯЙСТВЕННАЯ АКАДЕМИЯ ИМЕНИ
В.Р. ФИЛИППОВА»
Алексеева С.М., Дансарунова О.С.
Микробиологическая безопасность при
зооантропонозных болезнях
Допущено Методическим советом Бурятской ГСХА в качестве учебного
пособия для обучающихся по направлению подготовки 36.04.01
Ветеринарно-санитарная экспертиза
Улан-Удэ
ФГБОУ ВО «Бурятская ГСХА имени В.Р. Филиппова»
2022
2
УДК 619:579 (07)
А46
Протокол методического совета ФГБОУ ВО «Бурятская государственная
сельскохозяйственная академия имени В.Р. Филиппова» № 7 от 09.03.2022 г.
Рецензенты:
Л.-Д.В.Хибхенов - д.вет.н., профессор кафедры анатомии, физиологии, фармакологии
ФГБОУ ВО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия имени В. Р.
Филиппова».
А.С.Батомункуев – к.вет.н., доцент кафедры специальных ветеринарных дисциплин
факультета биотехнологии и ветеринарной медицины ФГБОУ ВО «Иркутский государственный
университет им.А.А. Ежевского».
А 46 В учебном пособии представлены темы лабораторных работ по проведению занятий
семинарского типа и самостоятельной работы обучающимся направления подготовки
магистратуры 36.04.01 Ветеринарно-санитарная экспертиза, включающая краткую
теоретическую информацию, способствующую усвоению материала, контрольные вопросы
для самоконтроля и закрепления полученных знаний.
Микробиологическая безопасность при зооантропонозных болезнях [Электронный
ресурс]: учебное пособие / Сост.: Алексеева С.М., Дансарунова О.С.– Улан-Удэ: ФГБОУ ВО
БГСХА, 2022. – 82 с. Системные требования: PC не ниже класса IntelCeleron 2 ГГц; 512 Mb
RAM; Adobe Acrobat
УДК 619:579 (07)
А46
Текстовое (символьное) электронное издание
Минимальные системные требования:
PC не ниже класса Intel Celeron 2 ГГц; 512 Mb RAM; Adobe Acrobat Reader.
Об издании – 1, 2, 3
© Алексеева С.М, Дансарунова О.С., 2022
© ФГБОУ ВО «Бурятская государственная сельскохозяйственная академия имени В.Р.
Филиппова», 2022
3
Электронное издание создано при использовании программного
обеспечения MS Microsoft Word
Техническая обработка и подготовка материалов:
Дата подписания к использованию
Объем к изданию – 128 КБ
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение
высшего образования
«Бурятская государственная сельскохозяйственная академия им. В.Р.
Филиппова»
670024, г. Улан-Удэ, ул. Пушкина, 8
e-mail: bgsha@bgsha.ru
Об издании – 1, 2, 3
4
Оглавление
ВВЕДЕНИЕ ...............................................................................................................6
1. Правила взятия проб, их консервирование и пересылка патологического
материала ................................................................................................................................................ 8
1.1. Материал для бактериологических исследований ....................................................... 8
1.2. Взятие крови для серологических исследований ............................................ 11
1.3. Взятие проб воды, почвы, кормов, шерсти ...................................................... 13
1.4. Упаковка и пересылка патологического материала ........................................ 15
1.5. Взятие и пересылка патологического материала при отдельных
инфекционных болезнях ......................................................................................... 17
Сибирская язва ........................................................................................................ 17
Туберкулез ............................................................................................................... 18
Бруцеллез ................................................................................................................. 18
Сап………………. ................................................................................................... 20
Лептоспироз............................................................................................................. 20
Паратуберкулез ....................................................................................................... 21
Некробактериозы (некротические поражения конечностей, слизистой полости
рта, внутренних органов) ........................................................................................ 22
Столбняк .................................................................................................................. 22
Ботулизм .................................................................................................................. 23
Рожа свиней ............................................................................................................. 23
Листериоз................................................................................................................. 24
Туляремия ................................................................................................................ 24
Пастереллез (геморрагическая септицемия) крупного рогатого скота, овец,
свиней, кроликов, птиц ........................................................................................... 24
Сальмонеллезы ........................................................................................................ 25
Микотоксикозы ....................................................................................................... 26
2. Материал для вирусологических исследований ................................................ 26
5
2.1. Общие правила .................................................................................................. 26
2.2. Взятие проб крови от переболевших животных .............................................. 27
2.3. Отбор проб кости .............................................................................................. 28
2.4. Отбор проб мозга .............................................................................................. 28
2.5. Отбор проб при заболеваниях с поражением эпителиальных покровов
(везикулярные поражения) ..................................................................................... 29
2.6. Отбор проб при подозрении на заболевания с признаками поражения
нервной системы ..................................................................................................... 29
3. Бактериологический метод диагностики инфекционных заболеваний ........... 30
4. Серологические методы диагностики инфекционных заболеваний ................ 33
4.1. Реакция преципитации (РП)
........................................................................ 35
4.2. Реакция агглютинации (РА)
........................................................................ 41
4.3. Реакция связывания комплемента (РСК) ......................................................... 48
4.4. Методы флуоресцирующих антител (МФА) ................................................................ 50
4.5. Иммуноферментный анализ (ИФА) .................................................................................. 52
4.6. Полимеразная цепная реакция (ПЦР) .............................................................................. 56
4.7. Использование в микробиологии ДНК-зондов ............................................................ 60
5. Аллергические методы диагностики .................................................................. 65
ЛИТЕРАТУРА ......................................................................................................... 70
ПРИЛОЖЕНИЯ ................................................................................................................................. 71
Приложение А ПБА по группам патогенности согласно СанПиН 3.368621"Санитарно-эпидемиологические требования по профилактике
инфекционных болезней" .............................................................................................................. 71
Приложение Б. Требования к изолированной лаборатории 3 уровня - ПБА II
группы, предъявляются следующие санитарно-эпидемиологические требования:
77
Приложение В. Требования к изолированной лаборатории 4 уровня - ПБА I
группы .................................................................................................................................................... 80
6
ВВЕДЕНИЕ
Особо опасные болезни — это инфекционные болезни, возбудители
которых относятся к I или II группе патогенности, перекрестно передающиеся
от животных к человеку и наоборот, так называемые зооантропонозы.
Зооантропонозные инфекции – это заболевания общие для животных и
человека, то есть этими болезнями (зооантропонозами) люди заражаются от
животных. Известно около 100 заболеваний зооантропонозной природы, среди
них бешенство, токсоплазмоз, бруцеллёз, чума, сап, сибирская язва, туберкулёз,
ящур, клещевой энцефалит, актиномикоз, лептоспироз, ку-лихорадка,
трипаносомоз, дифиллоботриоз, листериоз, туляремия, мелиоидоз, орнитоз,
трихофития, микроспория, некоторые гельминтозы и др.
Зооантропонозы — это инфекционные болезни, возбудители которых
(бактерии, микроскопические грибы, риккетсии, вирусы, простейшие и др.) в
процессе эволюции приспособились к паразитированию в организме животных
и человека. Возбудители зооантропонозов, размножающиеся в организме, могут
непродолжительное время, а иногда длительно сохраняться во внешней среде
или в организме живого переносчика. Их источником являются больные и
переболевшие животные- микробоносители, факторами передачи могут быть
продукты, получаемые от больных животных при жизни (молоко, яйца) или
после убоя (шерсть, мясо, шкуры), и различные объекты внешней среды,
заражаемые выделениями больных животных.
К зооантропонозам относятся возбудители, которые могут перекрестно
передаваться от животных к человеку и наоборот.
1. Поражающие кишечник — ботулизм, бруцеллез, иерсиниоз,
хламидийная инфекция, кампилобактериоз, лептоспирозы, листериоз,
мелиоидоз, псевдотуберкулез, сальмонеллезы.
7
2. Поражающие дыхательные пути — хламидиоз (орнитоз), туберкулез,
сап.
3. Поражающие кровеносную систему — риккетсиоз блошино-
крысиный, чума, Ку-лихорадка, туляремия, инфекционная анемия лошадей,
лейкоз.
4. Поражающие наружные покровы организма — пастереллез, сап,
сибирская язва, столбняк, рожа свиней, некробактериоз, оспа, ящур.
5. Поражающие центральную нервную систему — бешенство, болезнь
Ауески.
Наиболее опасные зооантропонозы
бактериальные
Сибирская язва Туберкулез Бруцеллез Лептоспироз Сап
Сальмонеллезы Туляремия Ку-лихорадка Рожа (эризипелоид)
Ерсиниоз Листериоз Ботулизм
Вирусные
Бешенство Болезнь Ауески Псевдочума птиц
Грибные
Трихофития Микроспория
Паразитарные
Трихинеллез Цистицеркоз Эхинококкоз Альвеококкоз
Фасциолез
8
1. Правила взятия проб, их консервирование и пересылка
патологического материала
1.1. Материал для бактериологических исследований
Патологический материал должен быть взят после смерти животного как
можно раньше, особенно в теплое время года, так как начавшееся разложение
трупа может сделать его непригодным для исследования. Если невозможно
доставить в лабораторию патологический материал в течение суток, то его
отправляют туда в консервированном виде.
Для бактериологического исследования патологический материал
(органы или их части) консервируют 30%-ным водным раствором химически
чистого глицерина. Воду предварительно стерилизуют кипячением или
автоклавированием в течение 30 минут. Материал можно консервировать также
в стерильном вазелиновом масле, 10%-ном растворе поваренной соли. Материал
заливают жидкостью, превышающей в 4—5 раз его объем.
Небольшие трупы павших поросят, ягнят, телят и других, мелких
животных лучше посылать целыми в непроницаемой таре.
Трубчатые кости посылают на исследование целыми, с
неповрежденными концами и тщательно очищенными от мышц и сухожилий.
Кости завертывают в марлю или полотно, смоченные дезинфицирующей
жидкостью (5%-ным раствором карболовой кислоты или др.) Кости можно
также посыпать поваленной солью и завернуть в полотно или марлю.
Кишечник перед посылкой освобождают от фекальных масс, а концы
перевязывают. На исследование посылают части кишечника с наиболее
характерными патологическими изменениями. Кишечник помещают в банки с
30%-ным водным раствором глицерина или насыщенным водным раствором
поваренной соли. Объем консервирующей жидкости должен превышать объем
взятого материала в 4—5 раз.
9
Кал для исследования отправляют в стерильных стаканах, пробирках,
банках, которые закрывают пергаментной бумагой, пробками. От трупов
животных кал можно послать в отрезке невскрытого кишечника, завязанного с
обоих концов. Кал в лабораторию должен быть доставлен не позднее 24 ч после
его взятия.
Для исследования участков кожи берут наиболее пораженные кусочки ее
размером 10X10 см и посылают в стерильной, герметически закупоренной
посуде.
Кровь, гной, слизь, экссудат, мочу, желчь и жидкий патологический
материал для бактериологического и вирусологического исследований
посылают в запаянных пастеровских пипетках, стерильных пробирках или во
флаконах, закрытых стерильными резиновыми пробками.
При взятии содержимого пиром (бурс) в области поражения выстригают
шерсть, кожный покров дезинфицируют 70° спиртом и смазывают настойкой
йода. Затем стерильным шприцем с иглой большого диаметра делают пункцию,
отсасывают содержимое гигромы и переносят его в стерильную пробирку с
резиновой пробкой.
Мокроту собирают (вызывают у рогатого окота кашель), обмотав куском
полотна нос и рот и сжимая носовые отверстия. После кашля находят на
полотне небольшое количество мокроты. Если заставить животное кашлять и
при этом держать у него язык вытянутым изо рта, нагибая голову вниз, можно
собрать на тарелку большие массы мокроты. После кашля слизь остается на
стенке глотки, а в некоторых случаях — между языком и коренными зубами.
Оттуда ее достают тампоном или стерильной марлевой салфеткой, которые и
направляют в стерильной посуде в лабораторию. Слизь можно брать из трахеи
путем введения в нее стерильного тампона на проволоке через трахеотубус.
Перед взятием проб молока у коров вымя обмывают теплой водой, соски
обрабатывают 70° спиртом. Из каждой доли вымени берут последние порции
10
молока по 10—15 мл в отдельные стерильные пробирки с резиновыми
пробками. У овец и коз пробы молока берут путем пункции цистерны вымени.
Для этого животное фиксируют в боковом положении, вымя у основания соска
протирают 70° спиртом и смазывают настойкой йода. Стерильным шприцем с
иглой делают пункцию у основания соска, и после попадания иглы в цистерну
(о чем судят по свободному движению конца иглы) набирают в шприц молоко и
переносят его в стерильную пробирку с резиновой пробкой.
Пробы слизи из половых органов животных берут стерильным марлевым
тампоном при помощи специальных инструментов конструкции Павловского,
Жабоедова, Казеева, а также применяемых при искусственном осеменении
коров шприца-катетера или полистероловой пипетки, соединенной со шприцем.
Кровь, гной, выделения из различных полостей, естественных отверстий и др.
можно посылать для микроскопического исследования в виде мазков.
Кровь у животных берут из вены ушной раковины или края верхушки уха, у
птиц — с поверхности гребня или подкрыльцовой вены. Шерсть на месте взятия
крови выстригают или выбривают, кожу тщательно протирают ватными
тампонами, смоченными сначала спиртом, а затем эфиром. Инструменты (иглы,
скальпель) должны быть стерильными. Первую каплю удаляют стерильной
ватой, (исключение делают при исследовании крови на гемоспоридиозы), а
следующую свободно выступившую каплю, крови берут быстрым и легким
прикосновением к ней поверхностью предметного стекла. Затем стекло быстро
поворачивают вверх каплей и удерживают между пальцами левой руки в
горизонтальном положении. К левому краю капли прикасаются под углом 45°
шлифованным краем другого предметного (или покровного) стекла. Как только
капля равномерно распределится по ребру этого стекла, им быстро проводят по
поверхности предметного стекла слева направо, не доводя до края на 0,5—1,0
см. Ширина мазков должна быть уже предметного стекла. Для каждого нового