Добавил:
Sekretar
kiopkiopkiop18@yandex.ru
t.me/Prokururor I Вовсе не секретарь, но почту проверяю
Опубликованный материал нарушает ваши авторские права? Сообщите нам.
Вуз:
Предмет:
Файл:Ординатура / Хирургия / @xirurgi_2025 / @xirurgi_2025 - 1279 - файл
.pdf
https://t.me/medicina_free
кулы воды адсорбируются на гидроксильных группах макромолекул,
что сопровождается разрывом водородных связей и изменением механических свойств целлюлозных волокон. Вода поглощается макромолекулами, расположенными в аморфных участках волокон, и гидроксильными группами, находящимися на поверхности кристаллических
участков. Влажность хлопкового волокна зависит от изменения относительной влажности и температуры окружающей среды, с которой
волокно соприкасается. С уменьшением влажности хлопковое волокно
подсыхает и, наоборот, с увеличением ее – увлажняется. Химически
очищенное хлопковое волокно поглощает меньше влаги, чем неочищенное. Поглощение влаги волокном во времени протекает неравномерно. Сухое волокно сначала очень быстро поглощает влагу, затем
этот процесс замедляется.
«Целоформ» - сорбент из хлопковой целлюлозы - вещество белого
цвета, порошкообразной мягкой консистенции, гигроскопичное, с размером волокон 20-50 мкм, выгодно отличается от других сорбентов
хорошей сорбционной ѐмкостью к биологическим жидкостям (кровь)
и биологической инертностью по отношению к тканям организма [24,
76, 89].
Биологическая активность сорбента из хлопковой целлюлозы. Как
уже отмечалось выше, разрыв волокон хлопковой целлюлозы в условиях компрессионно-сдвигового воздействия приводит к образованию
свободно-радикальных фрагментов с концевыми атомами кислорода
или углерода (- 0* и – С*). Эти концевые атомы связаны с фрагментом β-глюкозы и остальной частью макромолекулы целлюлозы. При
взаимодействии с бактериальными клетками эти свободнорадикальные фрагменты могут встраиваться в мембрану клетки с образованием ковалентных связей. В результате бактериальная клетка,
связанная с макромолекулой, фактически обездвиживается и теряет
способность к перемещению и контакту с тканями организма человека. В результате такого обездвиживания и нарушения обменных процессов через мембрану бактериальной клетки она погибает, т.е. наблюдается бактерицидное действие механохимически активированной
целлюлозы.
Параллельно может протекать процесс сталкивания движущейся
бактериальной клетки, которая не вступила во взаимодействие со свободно-радикальными фрагментами, с иглообразными фрагментами
31
https://t.me/medicina_free
целлюлозы. Это неизбежно будет приводить к разрыву мембран бактериальных клеток и также их гибели.
В целом бактерицидность механохимически активированной целлюлозы будет зависеть от этих двух факторов и теоретически малопредсказуема.
При нанесении «Целоформа» на инфицированную раневую поверхность может происходить и частичное рассасывание порошка
целлюлозы. Ранее указывалось, что макромолекулы целлюлозы, содержащие фрагменты β-глюкозы не поддаются воздействию пищеварительных ферментов человека, но тем не менее легко усваиваются в
пищеварительном тракте жвачных животных. С одной стороны, сам
процесс пережевывания целлюлозных волокон и есть механохимическое их активирование. Но, с другой стороны, бактериальная микрофлора пищеварительной системы жвачных животных обеспечивает
расщепление макромолекул целлюлозы с образованием глюкозы. Эти
бактерии чрезвычайно распространены в природе и реально приводят
к нагноению ран, однако в природе посредством своих ферментов они
осуществляют окисление больших количеств целлюлозы мертвых растений и возвращают в атмосферу углекислый газ, необходимый для
фотосинтеза. Роль этих гнилостных бактерий очень велика, так как
при их отсутствии в природе за очень короткое время накопились бы
несоизмеримые количества целлюлозы и исчез бы весь запас углекислого газа в атмосфере.
Фермент, вырабатываемый гнилостными бактериями – целлюлаза,
гидролизует целлюлозу в целлобиозу, которая далее легко гидролизуется до глюкозы. По-видимому, в условиях инфицированных ран
именно этот процесс может приводить к рассасыванию порошковой
механохимически активированной целлюлозы. Образующаяся целлобиоза также содержит свободный радикал, чем усиливает бактерицидные свойства.
Результаты контрольных токсикологических испытаний и морфологических исследований. Изучение подострой токсичности проводи-
лось в условиях нанесения порошка «Целоформ» на кожную рану и
подкожно подопытным животным – белым крысам. На протяжении
всего периода наблюдения не отмечено гибели подопытных животных, изменений внешнего вида, поведения, поедаемости корма, двигательной активности по сравнению с контрольной группой животных.
32
https://t.me/medicina_free
При обследовании животных с помощью лабораторных методов исследования изменений гематологических и биохимических показателей не выявлено [76]. На вскрытии животных макроскопически не выявлено патологических изменений внутренних органов и тканей подопытных животных. Коэффициенты масс внутренних органов подопытных животных не имели статистически достоверных отличий от
аналогичных показателей животных контрольной группы.
По результатам эксперимента на белых крысах с использованием
провокационной внутрикожной пробы, сенсибилизирующего действия
вытяжки из порошка, о наличии которого судили по реакции дегрануляции тучных клеток (РДТК), и раздражающего действия на кожу не
обнаружено.
После вскрытия животных макроскопически не выявлено патологических изменений внутренних органов и тканей подопытных животных. Коэффициенты масс внутренних органов подопытных животных
не имели статистически достоверных отличий от аналогичных показателей контрольных животных.
Гистологическое исследование тканевой реакции показало, что вокруг волокон «Целоформа» в глубокой части дермы, жировой клетчатке и мышцах образовались гранулемы инородных тел. Изменений во
внутренних органах не обнаружено.
Вытяжки из образцов не проявляли гемолитического действия на
опытах «ин витро» с изолированными эритроцитами кроликов: гемолиз составил 0,2% при допустимом значении менее 2%.
Таким образом, «Целоформ» не токсичен, стерилен, отвечает требованиям нормативной документации [76].
Биоцидные и фунгицидные свойства «Целоформа». Для исследова-
ния бактериальной микрофлоры использовался метод «колодцев», основанный на диффузионных свойствах веществ, общепринятый для
определения активности антисептических препаратов [76] .
Исследование фунгицидной активности «Целоформа» проводили
по ГОСТ 9.051-75 (Метод Б, устанавливающий наличие у компонента
фунгицидных и фунгистатических свойств и влияние внешних загрязнений на грибоустойчивость компонента) [76].
В результате испытаний на наиболее распространенных видах бактерий установлены бактерицидные свойства «Целоформа» в отношении музейных штаммов Staphylococcus aureus, Staphylococcus
33
https://t.me/medicina_free
epidermidis, Streptococcus pyogenes (в средней степени); Escherichia
coli, Klebsiella pneumoniae, Pseudomonas aeruginosa (в умеренной сте-
пени); а также бактериостатические в отношении Bacillus subtilis, Bacillus megaterium.
На свежевыделенных клинических штаммах Staphylococcus aureus,
Staphylococcus epidermidis, Pseudomonas aeruginosa, Streptococcus
faecalis, полученных от больных с внутриротовыми воспалительными
заболеваниями, препарат проявлял слабые бактериостатические свойства, на клинических же штаммах Echerichia coli и Proteus spp. бактериостатические свойства были более выраженными.
Во всех случаях при выращивании штаммов в течение восьми суток
на агаризованной среде не отмечено обрастания нанесенных на среду
порций порошка «Целоформ».
При воздействии музейных штаммов грибов Aspergillus niger,
Penicillium tardum, Trichophyton rubrum, Candida albicans, Rhodotorula
rubra установлена грибоустойчивость препарата целлюлозы 1-2 балла
(высокая степень), а также и некоторая степень фунгицистатических
свойств в отношении плесневых грибов рода Mucor. В отношении патогенных клинических штаммов грибов Candida albicans фунгицидных
свойств «Целоформ» не проявил, но адгезии грибных клеток на волокнах не отмечено.
При хранении образцов «Целоформа» изучалась их общая обсемененность. В течение всего срока наблюдения (1 месяц при 30°С) общая
обсемененность бактериальной и грибковой микрофлорой не увеличилась. В контрольном варианте на фильтровальной бумаге общая обсемененность увеличилась на 50% [76].
4.1.2. Характеристика клинических групп
Проведен ретроспективный анализ историй болезни 285 больных
ООГВЗ (мужчин – 147, женщин – 138), находившихся на лечении в
отделении челюстно-лицевой хирургии больницы скорой медицинской помощи №1 г. Казани в 2006-2009 гг. Для оценки эффективности
лечения были выбраны больные одонтогенными поверхностными
флегмонами одной области или пространства (поднижнечелюстные,
подподбородочные, поджевательные, крыловидно-нижнечелюстные) в
возрасте 20-49 лет (мужчин – 55, женщин - 47) (табл. 4.1 и 4.2), всего
34
Возрастные
группы
Мужчины
Женщины
Оба пола
абс. % абс.
%
абс.
%
20 - 29 лет
13
22,2
7
17,8
20
20,5
30 - 39 лет
24
40,0
18
42,9
42
41,1
40 - 49 лет
23
37,8
17
39,3
40
38,4
Итого
60
100
42
100
102
100
Возрастные
группы
Мужчины
Женщины
Оба пола
абс. % абс.
%
абс.
%
20 - 29 лет
13
65,0
7
35,0
20
100
30 - 39 лет
24
57,1
18
42,9
42
100
40 - 49 лет
23
57,5
17
42,5
40
100
Итого
60
58,8
41,2
38,4
102
100
https://t.me/medicina_free
102 человека, из которых 60 пациентов составили основную (ОГ) и 42
– группу сравнения (ГС). Эффективность лечения оценивали по субъективным ощущениям больных, клиническим наблюдениям и результатам гистологического исследования.
Таблица 4.1
Распределение исследуемых лиц по возрастным группам
в зависимости от пола
Таблица 4.2
Распределение исследуемых лиц внутри возрастных групп
в зависимости от пола
Для изучения структуры и сорбционных свойств сырья (хлопковой
хирургической ваты) и модифицированной хлопковой целлюлозы
4.2. Методы исследования
35
https://t.me/medicina_free
(МХЦ) были использованы следующие методы исследования: микроскопический, гравиметрический, рентгенофазовый.
4.2.1 Атомно-силовая микроскопия
Использовался атомно-силовой микроскоп типа Multi mode V фирмы «Veeco» (США) – увеличение 400х. Для оценки состояния поверхности нанесенных покрытий осуществляли микрофотографирование с
увеличением 150х на специальной установке с микроскопом типа МБА
в отраженном свете. Общий вид установки представлен на рис. 4.3.
Микрофотографирование проводили на цифровую фотокамеру.
Рис. 4.3. Установка для микрофотографирования поверхности
Атомно-силовое сканирование поверхности осуществляли с
помощью атомно-силового микроскопа с платиновой иглой. Схема
микроскопа представлена на рис. 4.4.
образцов
36
https://t.me/medicina_free
Рис. 4.4. Схема атомно-силового микроскопа
Принцип работы атомного силового микроскопа состоит в сле-
дующем. Очень тонкая игла-зонд с острием толщиной в несколько
атомов перемещается над поверхностью объекта на расстоянии порядка нескольких нанометров. В соответствии с законами квантовой механики возникает «туннельный эффект»: электроны преодолевают
барьер между объектом и иглой, и в цепи «образец–игла» начинает
течь ток. Величина его чрезвычайно сильно зависит от расстояния между концом иглы и поверхностью объекта, так сильно, что даже при
уменьшении промежутка всего на один нанометр ток возрастает примерно на порядок. Поэтому, следя за величиной тока при перемещении иглы вдоль поверхности, можно изучать ее рельеф. Иглу изготавливают из платиновой проволочки, откусывая ее маникюрными ножницами или специальными кусачками с режущими поверхностями из
твердого сплава.
4.2.2. Гравиметрический метод исследования
«Целоформ» испытан нами на сорбционную емкость по отношению
к воде и крови. Определение сорбционной емкости проводили гравиметрическим методом. Навеску порошка сорбента (1 г) помещали в
37
https://t.me/medicina_free
шоттовский стаканчик объемом 20 мл. В чашку Петри наливали жидкость в количестве, чтобы ее поверхность была выше стеклянного
фильтра шоттовского стаканчика на несколько миллиметров. Предварительно стаканчик с пробой порошка взвешивали на аналитических
весах. Затем его погружали в жидкость. Происходило смачивание
нижнего слоя порошка, а за счет капиллярных сил жидкость быстро
смачивала весь порошок.
Опыты проводили следующим образом. Взвешивали шоттовский
стаканчик вместе с порошком сорбента на аналитических весах и после контакта его с жидкостью каждые 5 минут извлекали стаканчик из
жидкости, ставили на лист фильтровальной бумаги для удаления излишков несорбированной жидкости и снова взвешивали. Разность веса
стаканчика после сорбции и первоначального веса стаканчика с сухим
порошком сразу давала величину сорбционной емкости порошка в
граммах жидкости на 1 г порошка.
4.2.3. Рентгенофазовый метод исследования
Рентгенофазовый анализ образцов «Целоформа» проводили на дифрактометре «ДРОН-УМ-1» с CuKa излучением при Fe – фильтре и
следующих параметрах съемки: ширина первой и второй щели – 0,5 мм,
ширина щели перед счетчиком – 0,5 мм, масштаб дифрактограммы –
10 соответствует 12 мм. Плоскость образца была установлена на оси
гониометра с точностью до 0,1 мм, погрешность при определении нуля счетчика не превышала 1 мм.
4.2.4. Метод электронного парамагнитного резонанса
С использованием спектрометра Bruker ESP300 (Германия) изучали
особенности состава сорбента «Целоформ». Для этого все измеряемые
образцы сырья (хирургическая вата) и сорбента помещали в особо
чистые ампулы, сертифицированные фирмой-изготовителем спектрометра ЭПР. Отбор проб осуществлялся исходя из размера рабочей области ампулы спектрометра. В указанном объеме образцы должны
иметь гомогенную структуру, в случае ярко выраженной гетерогенной
структуры, требуется разделение образца на гомогенные области, выходящее за рамки данной методики. Образцы должны иметь низкое
38
22
33
220
https://t.me/medicina_free
нерезонансное поглощение в области СВЧ-спектрометра. Порошок в
ампулу насыпался путем вдавливания открытого конца ампулы в порошкообразный образец. После заполнения рабочего объема ампулы в
нее вставляли кварцевую вату (из ОСЧ-кварца) и с помощью длинного
стеклянного стержня утрамбовывали порошок в ампуле.
При проведении измерений соблюдали следующие условия:
- температура окружающего воздуха 213 ºС.
- относительная влажность не более 80%
- напряжение питания переменного тока
- частота питающей сети переменного тока 501 Гц.
При проведении измерений выполняли следующие операции, следуя указаниям руководства пользователя:
1. Помещали ампулу с образцом в резонатор спектрометра и на-
страивали СВЧ-тракт.
2. Выбирали следующие настройки:
начальное магнитное поле 100 Гс (минимально возможное значе-
ние для ЭПР спектрометра);
конечное магнитное поле 10000 Гс (максимально возможное зна-
чение для ЭПР спектрометра);
время развертки примерно 10 мин;
величина модуляции 10 Гс (максимально возможное значение для
ЭПР спектрометра);
усиление 60 dB;
постоянная времени 80 мс.
3. Записывали спектр ЭПР.
4. Выделяли области спектра ЭПР, где наблюдался сигнал.
5. Записывали данные области, изменяя параметры спектрометра
для получения неискаженного сигнала ЭПР с максимальным отношением сигнал/шум (зависят от ширины и интенсивности линий).
Линии спектра ЭПР для спектрометров, работающих в стационарном режиме представляют собой производную резонансного поглощения ЭПР (рис. 4.5, красная линия).
В.
39
https://t.me/medicina_free
Рис. 4.5. Характерная линия спектра ЭПР для спектрометров,
работающих в стационарном режиме
Из записанной линии спектра ЭПР можно определить три первичных параметра парамагнитного центра: g-фактор, пиковую интенсивность I и пиковую ширину H. Для этого соединяют горизонтальной
линией области спектра с минимальным сигналом ЭПР (тонкая
сплошная черная линия на рис. 1). Пересечение записанной линии
спектра ЭПР с этой линией даст значение положения линии спектра
ЭПР - H0 . Затем из экстремумов записанной линии спектра ЭПР опускают две вертикальные линии (тонкие пунктирные черные линии на
рисунке 1). Измеряя расстояние между ними по горизонтали, определяют пиковую ширину H. А измеряя расстояние между ними по вертикали, определяют пиковую интенсивность I. Следует учитывать, что
не все спектрометры учитывают усиление прибора при записи спектра
ЭПР, в случае такого спектрометра параметр I необходимо умножить
на коэффициент усиления спектрометра.
Зная значения положения линии спектра ЭПР H0 и частоты спектрометра , необходимо вычислить g-фактор по формуле
40
Соседние файлы в папке @xirurgi_2025