Правила отбора и пересылки патологического материала для лабораторного исследования на инфекционные болезни. Учебное пособие

Патогенез. Распространение листерий происходит по периневральным,

лимфогенным, гематогенным путями. У взрослых животных чаще поражается ЦНС, у беременных животных – половая система, у молодняка развивается сепсис.

Рис.1 Культура листерий в мазке, окрашенном по Грамму (по А.К Мусаевой)

Клинические симптомы: заболевание может протекать в нервной,

септической, генитальной, смешанной, субклинической и бессимптомной формах. В паренхиматозных органах павших животных характерные патологоанатомические изменения: изменен цвет паренхимы печени, мягкой консистенции, бывает разложившаяся; селезенка кровенаполнена, темного цвета; паренхима почки мягкой консистенции, цвет изменен.

При нервной форме отмечают угнетение, потерю аппетита, расстройство координации движения (круговые движения), судорожные сокращения мышц и искривление шеи, слюнотечение. У некоторых животных наблюдают слепоту, кератоконьюктевит, паралич глотки.

При септической форме – лихорадка, угнетение, общая слабость, потеря аппетита, желудочно-кишечные расстройства, исхудание.

При генитальной форме – аборты, задержание последа, метриты,

маститы.

31

Патологоанатомические изменения. При нервной форме: гиперемия,

отек, иногда кровоизлияния в стволовой части головного мозга и шейной части спинного мозга, зернистая или жировая дистрофия печени,

кровоизлияния под эпикардом, застойная гиперемия и отек легких,

кератоконьюктевит.

Для исследования в лабораторию направляют трупы мелких животных или голову (головной мозг), кусочки печени, селезенки, почки,

лимфатические узлы, пораженные участки легких, абортированный плод и его оболочки, истечения из половых органов абортировавших самок, молоко из пораженных долей вымени при маститах или при подозрении на скрытый мастит. Материал посылают свежий или консервированный в 30%-ном растворе глицерина. Для прижизненной диагностики для серологического исследования посылают кровь или сыворотку крови от больных и подозрительных по заболеванию животных (желательно парные сыворотки,

взятые с интервалом 7-14 дней).

2.7. Лептоспироз

Лептоспироз - инфекционная болезнь животных и человека,

характеризующаяся у животных лихорадкой, анемией, желтухой, появлением в моче крови, некрозами слизистых оболочек и кожи, атонией желудочно-

кишечного тракта. Лептоспира — грамотрицательная палочка, на вид похожа на спирохету. Подвижна, характерны поступательные, колебательные и вращательные движения, Возбудитель болезни относится к семейству спирохет, к роду Leptospira, серогруппы: L.canicola, L.icterphaemorrhagie,

значительно реже L.pomona. Лептоспирозы подвижны, в темном поле микроскопа выглядят как серебристо-белые тонкие нити, концы которых крючкообразно загнуты.

Болезнь проявляется повышением температуры, развитием желтухи,

малокровия. Массовая гибель эритроцитов приводит к анемии, а некроз

32

клеток, выстилающих слизистые мембраны, — к изъязвлению. Поражается алиментарный тракт. На коже, слизистых мембранах возникают изъязвления.

Больные лептоспирозом самки абортируют или рожают нежизнеспособных детенышей. Мелкие спиралеобразные бактерии из рода спирохет отличаются типовым разнообразием, поэтому способны заражать многие виды животных. Чаще всего заболевают КРС, мелкие жвачные, свиньи, лошади. К

возбудителю лептоспироза восприимчивы домашние плотоядные животные,

пушные звери, грызуны. Микробы дольше всего выживают в почве и водной среде, хорошо переносят замораживание, но погибают при нагревании, а

также высушивании. Чаще всего при лептоспирозе страдает молодняк. Недуг протекает у них в более тяжелой, чем у взрослых форме. Характеризуется поражением капилляров, часто поражением печени, почек, мышц, явлениями интоксикации, сопровождается волнообразной лихорадкой,

Распространителями инфекции становятся больные и выздоровевшие животные. Грызунов считают пожизненными лептоспироносителями.

Лептоспиры —вне водной среды способны существовать недолго, поэтому чаще всего заражение происходит летом на пастбище, алиментарным путем. Спирохеты обладают большой подвижностью, и в считаные минуты минуют лимфоузлы и пробираются в кровоток из очагов проникновения.

Размножаясь, лептоспиры выделяют метаболиты, обладающие пирогенным действием, поэтому жертву лихорадит

Характерными признаками лептоспироза является желтая окраска кожи, а

также слизистых. На туловище животного возникают отеки, в

абдоминальной полости скапливается гной или красноватый экссудат.

Желтоватая печень увеличена, на ней обнаруживают очаги геморрагий и некроза. Почки сглажены, усеяны кровоподтеками. Мочевой пузырь переполнен, гиподермальная клетчатка пропитана экссудатом. В

лабораторию отправляют цитрированную кровь, ликвор, мочу, печень,

почки, кусочки свежих паренхиматозных органов.

33

В случае возникновения в хозяйстве лептоспироза больных и подозреваемых в заболевании животных изолируют, лечат – гипериммунной сывороткой и антибиотиками. В качестве лечебных препаратов применяют стрептомицин-сульфат – внутримышечно по 25 тыс. ед. /кг массы тела с интервалов 12 часов в течение пяти дней. Свиньям, кроме того, вводят дитетрациклин внутримышечно по 30 тыс. ед./кг массы дважды через 48–72

часа. Применяют также и другие антибиотики.

Для бактериологического исследования в лабораторию направляют цитрированную кровь, ликвор, мочу, кусочки свежих не консервированных органов (печени почки и др.).

Для гистологического исследования на наличие лептоспир от павших животных берут кусочки печени почек, лимфатических узлов и мышц сердца.

При подозрении на заболевание животных лептоспирозом посылают мазки периферической крови от больных и павших животных для исследования с целью исключения пироплазмоза.

При необходимости серологического исследования посылают кровь или сыворотку ее в пробирках.

2.8. Рожа свиней

Рожа свиней – одно из самых распространенных инфекционных заболеваний, поражает также овец, лошадей и домашних птиц, протекает остро или хронически в виде энзоотических вспышек, с явлениями септицемии при острой форме и симптомами эндокардита, полиартрита и некроза кожи. Болеют свиньи всех возрастов. Поросята до 3-х месяцев менее восприимчивы, что связано с колостральным иммунитетом. Болеет рожей свиней и человек. Возбудителем рожи является бактерия Erysipelothrix insidiosa - неподвижная, не образующая капсул и спор грамположительная

34

палочка. Возбудитель устойчив к воздействию внешних факторов благодаря наличию воско-липидных веществ в оболочке. При отсутствии своевременной вакцинации приносит огромный экономический ущерб.

Латентное течение проходит с локализацией возбудителя в миндалинах и фолликулах кишечника. При стрессовых ситуациях заболевание проявляется клиническими признаками. Патология характеризуется рожистым воспалением и вызывает осложнения — заболевания суставов, сердца и внутренних органов.

Рис. 2 Труп свиньи. Рожистое воспаление кожи

Наибольшим эффектом при терапии заболевания, обладает противорожистая сыворотка. Её вводят подкожно или внутримышечно в расчёте 1 — 1,5 мл на 1 кг живого веса животного. При тяжелых состояниях животных введение проводится внутривенно в ушную вену. Хорошие результаты показывает совместное применение сыворотки и антибиотиков.

Для исследования на рожу свиней отбирают трубчатую кость, селезенку,

почку Для бактериологического и биологического исследований лучше послать

свежий труп с целью исключения чумы, пастереллеза, паратифа и других болезней. При невозможности переслать весь труп для бактериологического исследования направляют.

а) трубчатую кость и пораженные суставы, очищенные от мышц;

б) кусочки пораженной кожи селезенку, почку и сердце.

35

ГЛАВА III. ВЗЯТИЕ ПАТОЛОГИЧЕСКОГО МАТЕРИАЛА ПРИ ПОДОЗРЕНИИ НА ВИРУСНУЮ ИНФЕКЦИЮ

Вирусные болезни животных, вириозы, - болезни животных,

вызываемые вирусами. Вирусы — суперпаразиты, достигшие крайней степени паразитизма: они могут существовать и размножаться только в клетке другого организма и вызывают в нем заболевания. Вирусы очень быстро и спонтанно приспосабливаются к новым условиям, т.е. мутируют.

Вирусы не считаются клетками, а существуют как частицы нуклеиновой кислоты (ДНК или РНК), заключенные в оболочку белка. Хотя они содержат генетический материал, но не имеют клеточной стенки или органелл,

необходимых для производства и воспроизводства энергии, Для репликации вирусы используют органеллы клетки-хозяина.

Вирусы могут воспроизводить себя только внутри живой клетки, поэтому они являются облигатными паразитами. Возбудители ряда острых вирусных инфекций (классическая чума свиней, африканская чума свиней, бешенство,

ящур, болезнь Ауески (по имени венгерского бактериолога А. Ауески),

болезнь Ньюкасла в значительной степени приспособлены к современному животноводству, распространяются и передаются на громадные расстояния.

быстро рассеиваются на больших территориях. Болезнь Ньюкасла является опаснейшим вирусом, поражающим домашнюю птицу. Другое название болезни Ньюкасла — псевдочума. Чаще всего она протекает стремительно, в

острой форме, а также быстро распространяется, вызывая большую смертность птицы.

Вирусные заболевания широко распространены в природе. Частицы вирусов попадают в организм животного самыми различными путями: через кожу, слизистые оболочки, через пищу вместе с кормом, также вирус может попасть через дыхательные органы. При несвоевременном и неправильном лечении вирусных заболеваний исход будет смертельный.

Список наиболее распространенных вирусных заболеваний:

36

аденовироз собак;

бешенство;

вирусный гепатит;

вирусный перитонит кошек;

парвовирусной энтерит;

ринотрахеит кошек;

чума

Вирусные заболевания передаются алиментарным, респираторным путями, через кожу, с помощью клещей, насекомых, трансовариально.

Вирусы являются опасными возбудителями заболеваний, поскольку извлечь зараженную ДНК или РНК из клетки невозможно, можно только уничтожить пораженную вирусом клетку.

Заболевания, вызванные вирусами, не лечатся антибиотиками. Вирусные инфекции сопровождаются следующими симптомами:

1.Выделение сероватой слизи.

2.Увеличение количества лимфоцитов, которые отвечают за образование необходимого количества антител.

Следует учитывать, что при многих вирусных инфекциях наблюдается

феномен посмертной аутостерилизации, в результате чего вирус может быть вообще не обнаружен или его количество окажется очень незначительным.

Вторая причина необходимости экстренного взятия материала – избежать посмертных изменений в тканях, иначе они могут оказаться непригодными для бактериологических и вирусологических исследований.

Для вирусологических исследований желательно направлять пробы от животных в трех стадиях болезни:

от больных с выраженной клиникой с указанием температуры, частоты пульса и дыхания (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные органы);

от убитых в агонии (кровь, кость, лимфатические узлы и пораженные

органы);

37

 от выздоравливающих животных (кровь).

Взятые пробы следует как можно быстрее поместить в условия,

обеспечивающие замедление процессов разложения материала. Такие условия обеспечивают низкие температуры.

Для вирусологического исследования материалом могут служить: кровь или ее сыворотка, смывы из носоглотки и другие жидкости организма,

стенки и содержимое афт, папулы (узелки), везикулы (серозные пузырьки),

пустулы (гнойные пузырьки), кусочки головного мозга, печени, легких,

селезенки или кусочки других органов и тканей, в которых вирус предполагаемого заболевания содержится в наибольшем количестве.

Для гистологического исследования берут по возможности свежий материал от павших или убитых животных. Необходимо брать небольшие пластинки толщиной 0,5-1 см и площадью 3-4 см2 так, чтобы в пластинке была как измененная ткань, так и нормальная. Взятый патматериал фиксируют фиксирующей жидкостью. Объем фиксирующей жидкости должен превышать объем патматериала в 10-15. раз. Для гистологического исследования патматериал берут только от свежих трупов. В лабораторию отправляют кусочки площадью 3...4 см2, толщиной не более 1 см, при этом следят, чтобы в них вошли пораженные и граничащие с ними неизмененные участки ткани.

Поверхность органа или ткани трупа на участке, из которого предполагают брать пробу, очищают от загрязнений, обеззараживают спиртом, 3%-м раствором фенола или прижигают нагретой металлической пластинкой (шпателем). Материал берут стерильными инструментами и помещают в стерильную посуду (пенициллиновые флаконы, пробирки и другие стеклянные сосуды с резиновыми пробками). Жидкий патматериал

(кровь, слизь мочу, желчь и т. д.) можно набирать в одноразовые шприцы или пастеровские пипетки, которые затем с обоих концов запаивают. Кроме того,

различные выделения можно посылать в виде мазков или мазков-отпечатков,

38

которые фиксируют на воздухе, заворачивают каждый в отдельности в пергаментную бумагу и маркируют.

Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем виде направляют для исследования в лабораторию только нарочным. Посылаемый материал тщательно упаковывают в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить рассеивание возбудителя по пути следования.

Консервирование патологического материала. Полученные пробы отправляют в лабораторию в свежем виде; если невозможно отправить в течение ближайших 24...30 ч, то их фиксируют в консерванте.

Патматериал для гистологического исследования консервируют 10%-м

водным раствором формалина или 96%-м этиловым спиртом. Объем консерванта должен в 10 раз превышать объем взятого материала.

Материал, предназначенный для бактериологического исследования,

фиксируют 30 %-м химически чистым глицерином или вазелиновым маслом.

Соотношение патматериала и консерванта 1:4 или 1:5. Трубчатую кость и кишечник обычно консервируют поваренной солью.

Оформление документов на отправляемый материал. На взятый патологический материал ветеринарный врач составляет сопроводительный документ (форма 3). В документе необходимо указать также эпизоотическую ситуацию хозяйства, лечили животное или нет' если лечили, то какими препаратами, как законсервирован материал; число отправленных упаковок с пробами.

Для вирусологического исследования материалом могут служить:

кровь или ее сыворотка; смывы из носоглотки и другие жидкости организма;

стенки и содержимое афт; папулы (узелки); везикулы (серозные пузырьки);

пустулы (гнойные пузырьки); кусочки головного мозга, печени, легких,

селезенки или кусочки других органов и тканей, в которых вирус предполагаемого заболевания содержится в наибольшем количестве.

39

Для гистологического исследования патматериал берут только от свежих трупов. В лабораторию отправляют кусочки площадью 3...4 см2,

толщиной не более 1 см, при этом следят, чтобы в них вошли пораженные и граничащие с ними неизмененные участки ткани.

Поверхность органа или ткани трупа на участке, из которого предполагают брать пробу, очищают от загрязнений, обеззараживают спиртом, 3%-м раствором фенола или прижигают нагретой металлической пластинкой (шпателем). Материал берут стерильными инструментами и помещают в стерильную посуду (пенициллиновые флаконы, пробирки и другие стеклянные сосуды с резиновыми пробками). Жидкий патматериал

(кровь, слизь мочу, желчь и т. д.) можно набирать в одноразовые шприцы или пастеровские пипетки, которые затем с обоих концов запаивают. Кроме того,

различные выделения можно посылать в виде мазков или мазков-отпечатков,

которые фиксируют на воздухе, заворачивают каждый в отдельности в пергаментную бумагу и маркируют.

Трупы мелких животных, части трупов крупных животных и отдельные органы в свежем виде направляют для исследования в лабораторию только нарочным. Посылаемый материал тщательно упаковывают в плотный деревянный или металлический ящик, чтобы предупредить рассеивание возбудителя по пути следования.

Современные фармацевтические методы могут только блокировать размножение вирусов в организме (противовирусные препараты) и

активизировать выработку антигенов иммунной системой (интерферонов),

которые уничтожат зараженные клетки.

Вирусные болезни животных (ящур, чума и контагиозная плевропневмония кр. рог. скота, классическая и африканская чума свиней,

катаральная лихорадка овец, лихорадка долины Рифт, грипп птиц, болезнь Ньюкасла и др.) выделены в группу особо опасных болезней. Специфическое лечение не разработано. Специфическое профилактика осуществляется с

40