Основы паразитологии. Паразитоценозы животных. Учебное пособие для СПО
.pdfпереносят на большое предметное стекло (7X10 см) н исследуют под микроскопом. Многие ветеринарные лаборатории считают, что применение зажимов на резиновую трубку в аппарате Бермана связано с неудобствами. Поэтому нижние концы резиновых трубок непосредственно соединяют с маленькими или центрифужными пробирками. Перед исследованием осадка под микроскопом жидкость не центрифугируют. Используют в качестве основного метода для диагностики диктиокаулеза и протостропгилидозов жвачных.
Метод Вайда. Несколько свежевыделенных шариков (4-5) овец или коз помещают в бактериологическую чашку или на часовое стекло и увлажняют их небольшим количеством теплой воды (37-40°). Через 15-30 мин фекалии удаляют, а оставшуюся жидкость исследуют под микроскопом на наличие живых личинок нематод. Эффективность данного метода значительно ниже в сравнении с методом Бермана - Орлова, поэтому его редко применяют для диагностики диктиокаулеза и не используют для распознавания протостропгилидозов мелких жвачных.
Упрощенный ларвоскопический метод. Навеску свежих фекалий овец или крупного рогатого скота (5 г), завернутую в маленькую марлевую салфетку или на ситечке, помещают в полуконический стаканчик емкостью 30-50 мл таким образом, чтобы она не касалась дна, и заливают теплой водой (37-40°). Пробы от овец осторожно извлекают из стаканчиков через 3-4 ч, а от молодняка крупного рогатого скота через 7-10 ч. Спустя 10-15 мин надосадочпую жидкость сливают или отсасывают спринцовкой, осадок переносят на большое предметное стекло (7X10 см) и микроскопируют. С целью ускорения гельминтоларвоскопических исследований в последнее время предложена; экспресс-диагностика диктиокаулеза овец. Небольшие пробы фекалий (3- 5 г) кладут в пробирки с водой температуры 20-22°, пробирки помещают в центрифугу и центрифугируют в течение 2 мин. Затем пробы вынимают пинцетом, воду сливают до осадка, а осадок микроскопируют на стекле (Г. А. Котельников).
Гельминтоскопические или макрогельминтоскопические методы. При гельминтоскопии (осмотре) фекалий животных можно обнаружить гельминты или их фрагменты, которые выделяются под воздействием медикаментозных средств или самопроизвольно (мониезий и тизаниезий у жвачных, дрепанидотений у гусей и др.). Чтобы обнаружить более мелких паразитических червей у мелких и средних животных, исследуют методом последовательного, промывания всю единовременную порцию фекалий, а у крупных животных - часть фекалий. Собранные фекалии после предварительного осмотра помещают в стеклянный цилиндр или небольшую банку, разбавляют 10-кратным количеством воды и тщательно размешивают. После 1015мин. отстаивания верхний слой жидкости сливают, а осадок снова смешивают с водой и отстаивают. Периодическое промывание и отстаивание фекалий повторяют до просветления фильтрата. Верхний слой жидкости последний раз сливают,
11
а осадок малыми порциями просматривают в кюветах с черным и белым дном. Обнаруженных гельминтов собирают при помощи пинцетов, препаровальных игл и кисточек, просматривают под микроскопом, после чего переносят в консервирующую жидкость. Чтобы выявить мелких гельминтов, осадок дополнительно исследуют по частям при помощи бинокулярной или штативной лупы с 10-20-кратным увеличением или стереоскопического биологического микроскопа (МБС). Для ускоренного сбора паразитических червей разной величины из фекалий животных иногда применяют метод отсеивания, для чего используют набор из нескольких металлических сит с отверстиями убывающего диаметра. Фекалии, находящиеся на верхнем сите, промывают струей воды, при этом частицы фекалий уносятся водой, а гельминты в зависимости от величины задерживаются на разных ситах и их выбирают и исследуют. Количественные методы гельминтокопрологических исследований применяют для установления степени (интенсивности) гельминтозной инвазии при жизни животных, а также для выяснения эффективности проводимых дегельминтизаций на основании сравнения числа обнаруженных яиц или личинок гельминтов до и после назначения антгельминтиков животным. Наиболее распространенными являются стандартизированные методы Фюллеборна, последовательного промывания и Бермана - Орлова, методика выполнения которых в принципе такая же, как и одноименных качественных гельминтокопрологических методов. Количественные методы характеризуются рядом особенностей: взятие навесок экскрементов проводят в определенные часы суток; стаканчики, воронки и ситечки равного объема или диаметра; пробы фекалий одинаковые по объему; время отстаивания взвеси фекалий одно и то же; петли и предметные стекла одного диаметра (размера); реактивы идентичные. Достоверность результатов повышается при использовании набора для гельминтокопрологических исследований и при увеличении количества проб и кратности исследований.
Занятия 3. Посмертные виды диагностики паразитоценозов
Цель занятия: освоить методику взятия проб фекалий от животных разных видов. Ознакомиться с оборудованием и реактивами, употребляемыми при исследовании проб фекалий животных на гельминтозы. Исследовать пробы фекалий животных гельминтоовоскопическими методами. Исследовать печень овцы или крупного рогатого скота по методу полного гельминтологического вскрытия.
Оборудование материалы и объекты исследования: микроскопы,
предметные и покровные стекла, пинцеты, стеклянные палочки, стаканчики, металлические петли, ситечки, насыщенные растворы натрия хлорида, технической аммиачной селитры, вода, оберточная бумага,
12
кюветы, стеклянные банки, прямые ножницы, компрессориумы, бактериологические чашки, жидкость Барбагалло, спирт 70%-ный пробы фекалий овец, свиней, лошадей, печень и легкие жвачных, кишечник птиц.
Методические указания
Посмертная диагностика гельминтозов заключается в обнаружении гельминтов на различных стадиях их развития в организме животного. Гельминты паразитируют во всех органах и тканях. Поэтому сбор и дальнейшее их определение обеспечиваются особыми методами вскрытий, которые отличаются от обычного патологоанатомического вскрытия трупов. Наиболее совершенная методика гельминтологических вскрытий разработана академиком К.И. Скрябиным. Различают полное гельминтологическое вскрытие и неполное.
Полное гельминтологическое вскрытие по К.И. Скрябину - наиболее надежный метод, позволяющий производить полный количественный и качественный учет всех гельминтов, которыми инвазировано животное. Данный метод заключается в следующем: после снятия с трупа кожи тщательно осматривают подкожную клетчатку, затем вскрывают грудную и брюшную полости и извлекают все внутренние органы.
Органы каждой системы–пищеварительной, дыхательной, кровеносной, мочеполовой и др., препарируют и исследуют отдельно. Все трубчатые органы вскрывают по их длине, содержимое помещают в таз, ведро или банку (в зависимости от объема органа); со слизистых оболочек делают соскоб, а стенку вскрытого органа просматривают под компрессориумом.
Паренхиматозные органы - печень, легкие, поджелудочную железу, почки и др. - помещают в отдельную посуду и превращают в детрит (фарш), разрезая их на мелкие кусочки ножом и ножницами. Детрит, соскобы, содержимое органов отмывают водой или физиологическим раствором, пользуясь методом последовательных смывов. Полученный материал изучают небольшими порциями сначала в черных, затем в белых кюветах или в чашках Петри на черном и белом фоне. Крупные гельминты отбирают визуально, а мелкие - при помощи лупы с 8-10- кратным увеличением. Собирают гельминты кисточками или препаровальными иглами.
Полное гельминтологическое исследование отдельных органов проводят в том случае, если необходимо иметь точные данные о местонахождении того или иного гельминта. Например, при фасциолезе исследуют только печень, при диктиокаулезе - легкие.
Неполное гельминтологическое вскрытие - это упрощенное гельминтологическое вскрытие, в процессе которого извлекают из органов и тканей лишь отдельные, резко выделяющиеся по размерам
13
гельминты. Такое вскрытие имеет большое значение как для диагностики гельминтозов, так для получения музейного материала.
Нативный мазок Небольшой кусочек кала переносят палочкой на предметное стекло
в каплю 50% водного раствора глицерина (для его получения смешивают равное количество воды и чистого глицерина), растирают до получения равномерного прозрачного мазка. На одном стекле готовят два мазка (два препарата), всего просматривают не менее двух стекол, т. е. 4 препаратов.
При небольшом количестве яиц в испражнениях этим методом выявить их не всегда удается. Поэтому исследование кала на яйца гельминтов только методом нативного мазка не является полноценным и достоверным.
Метод последовательного промывания. При проведения этого заливают водой и повторяют эти операции до тех пор, пока жидкость над осадком не будет прозрачной. После надосадочную жидкость сливают последний раз, а осадок помещают в кювету или чашку Петри для исследования под лупой. Так как одни гельминты хорошо видны на белом фоне, а другие на черном, для более полной выборки гельминтов чашку Петри ставят то на белую, то на черную бумагу. Гельминты выбирают препаровальной иглой или кисточкой, а затем микроскопируют для установления вида, при этом пользуются ручной, а также штативной лупой или стереоскопическим микроскопом.
Методы Котельникова и Хренова. Методы экспресс-диагностики, применяемые для определения возбудителей диктиокаулезов овец, коз и телят. Один из методов основан на химико-физических свойствах раствора сульфата цинка (плотность 1,24), который усиливает двигательную активность личинок диктиокаулюсов, ускоряет выделение их из фекалий. Раствор готовят из расчёта: 400 г сульфата цинка на 1 л воды. Плотные пробы фекалий овец и коз (5 г) кладут в стаканчики с раствором сульфата цинка и 1—2 мин энергично разгоняют по кругу палочкой (не растирая и не размешивая). Через 5-10 мин пробы вынимают пинцетом, взвесь отстаивают в течение 10-15 мин. Затем металлической петлей с диаметром кольца 8— 9 мм снимают 6 капель с поверхности взвеси и переносят их на предметное стекло для микроскопии. Пробы фекалий полужидкой консистенции от овец или телят (5 г) также кладут в стаканчики с раствором и выдерживают 20—30 мин (без размешивания). Затем пробы удаляют и через несколько минут снимают 6 капель и микроскопируют их.
Метод Акбаева. Методика подсчета яиц и мертвых личинок гельминтов наиболее проста и точна. Для этой цели готовят сетку из рентгеновских фотопленок.
Для приготовления сетки требуются линейка, циркуль или швейные иглы и безопасная бритва. Сначала пленку отмывают от эмульсии, затем четырехугольник линейки размером 40x17 мм размещают на куске пленки, иглой наносят едва заметные точки на расстоянии 1,6 мм друг от
14
друга, с помощью линейки и лезвия чертят 11 горизонтальных и 26 вертикальных линий, которые иглой по краю сетки нумеруют.
Пленку с сеткой вырезают по размеру предметного стекла и приклеивают канадским бальзамом начерченной сеткой вверх.
После высыхания бальзама сетка готова к длительному употреблению.
Для подсчета яиц берут 1-3 грамм фекалий и проводят исследования по методу последовательных смывов. Затем осадок энергично встряхивают и пипеткой с отпиленным кончиком набирают 0,1 мл взвеси и наносят на сетку. Взвесь накрывают тонким предметным стеклом (толщина 1 мм), укороченным на 1 см. Обнаруженное число яиц и личинок умножают на весь объем осадка в миллилитрах, что составляет количественное выражение изучаемой массы фекалий.
Сетку с успехом можно применять и для определения количества яиц гельминтов при использовании унифицированных методов флотации. В настоящее время при наличии тонких органических стекол не составляет труда начертить на них сетку, они экономичны и долговечны.
Флотации метод. Главный метод лабораторной диагностики гельминтозов, кокцидиозов крупного рогатого скота, овец и птиц; метод гельминтоовоскопии; основан на различной плотности яиц гельминтов или ооцист кокцидий и флотационных растворов. В растворах, плотность которых выше плотности зародышей паразитов, последние поднимаются на поверхность раствора, в результате поверхностная плёнка взвеси обогащается яйцами и ооцистами. Принят унифицированный и стандартизированный метод по Котельникову и Хренову с растворами гранулированной аммиачной селитры (нитрата аммония) и нитрата свинца. Растворы готовят из расчёта: на 1 л воды аммиачной селитры 1500 г, азотнокислого свинца 650 г. Соль растворяют в горячей воде в эмалированной посуде при постоянном размешивании и подогревании. Наилучшей флотационной способностью растворы обладают при t 2022°С и плотности 1,3-1,5 с раствором аммиачной селитры применяют для диагностики аскаридоза, параскаридоза, трихоцефалёзов, эзофагостомозов, стронгилятозов желелудочно-кишечного тракта, стронгилоидоза свиней, лошадей и жвачных, аскаридатозов плотоядных, мониезиозов жвачных, метод с раствором азотнокислого свинца - фасциолеза, дикроцелиоза, парамфистоматозов жвачных, метастронгилёзов свиней, а также всех перечисленных выше нематодозов.
Пробу фекалий (3 г) кладут в стаканчик, заливают небольшим количеством раствора и тщательно размешивают палочкой, добавляя раствор порциями до объёма 50 мл. Затем взвесь фильтруют через чистое ситечко в другой стаканчик. Профильтрованную взвесь оставляют на 1015 мин при исследовании на аскаридоз, трихоцефалёз и др. нематодозы и на 15-20 мин - на фасциолёз, дикроцелиоз, парамфистоматозы. Прикосновением металлич. петли к поверхности взвеси снимают не менее 3 капель с разных мест и переносят их на предметное стекло для
15
микроскопии. Металлическую петлю перед исследованием каждой пробы фламбируют или последовательно промывают водой в двух банках (воду
вбанках меняют после исследования 50 проб). Чтобы не допустить быстрого высыхания капель на стёклах, к каждой капле добавляют каплю глицерина, разведённого водой (1 – 1). Яйца фасциол и парамфистомат в растворе слегка деформируются, но при добавлении капли дистиллированной воды к препарату форма яиц восстанавливается.
Метод Фюллеборна. Готовят насыщенный раствор поваренной соли (хлористого натрия), растворяя 400 г ее в 1 л воды при кипении. Хранят его в закрытой бутыли.
Для проведения анализа в баночку объемом 3050 мл. помещают 2-3г. фекалий и при помешивании палочкой доливают доверху насыщенным раствором соли. Полоской бумаги тут же снимают всплывшие крупные частицы. Через 45-60 мин проволочной петлей снимают поверхностную пленку и стряхивают ее на предметное стекло в каплю 50% водного раствора глицерина, готовя таким образом 4 препарата на двух стеклах. Для выявления яиц пленку рекомендуют снимать через 10-20 мин и исследовать фекалии не позднее первых суток после их выделения. Проволочную петлю после каждого анализа прожигают на спиртовке.
Способом Фюллеборна хорошо обнаруживаются яйца нематод (за исключением неоплодотворенных яиц аскарид), карликового цепня и лентецов. Яйца же трематод и тениид всплывают плохо. Поэтому дополнительно просматривают 2-4 препарата из осадка, набирая его глазной пипеткой на 2 предметных стекла. К недостаткам этого метода относится необходимость просмотра препаратов из поверхностной пленки и осадка, а также длительность отстаивания.
Дарлинга метод. Метод обнаружения яиц гельминтов. В ступке или стаканчике тщательно размешивают с водой 5-10 г кала. Полученную суспензию процеживают через металлич. сито в центрифужные пробирки и центрифугируют 2-5 мин. Затем жидкость сливают, к осадку приливают смесь равных частей глицерина и насыщенного раствора поваренной соли. Содержимое пробирки тщательно перемешивают и вновь центрифугируют. Платиновой петлёй снимают верхнюю плёнку жидкости и переносят её на предметное стекло.
Метод Котельникова и Вареничева. Яйца описторхисов очень мелкие и тяжелые (удельный вес 1,38-1,46). В связи с этим обычные флотационные растворы непригодны. В качестве флотационной жидкости
вэтой методике применяют насыщенный раствор хлорида цинка (2 кг ZnCl2 на 1 л воды) с плотностью 1,82. Техника проведения этого метода аналогична как при методе Щербовича.
Метод Бермана-Орлова. Впервые метод был предложен Берманом для выявления личинок свободноживущих гельминтов (нематод) в почве и траве. Позже этот метод был приспособлен И. В. Орловым для диагностики диктиокаулезов животных. Сейчас метод применяют для
16
диагностики легочных и кишечных нематодозов. С этой целью пробы фекалий (10-20 грамм) помещают на сетку или марлю, слабо натянутую на широкую часть воронки, прикрепленной к штативу. С другой стороны на конец воронки надевают резиновую трубку с пробиркой. Затем в воронку наливают воду (37-38 °С) так, чтобы масса фекалий погрузилась в нее, и оставляют при комнатной температуре на 3-6 часов (фекалии овец) или на 6-12 часов (фекалии лошадей и крупного рогатого скота). По истечении этого времени резиновую трубку осторожно отсоединяют от воронки, сливают воду из каждой пробирки до осадка, а осадок микроскопируют. Упрощенные модификации метода Бермана (по И. А. Щербовичу и В. И. Шильникову): Фекалии (5-10 грамм) овец завертывают в кусочек марли и раскладывают или подвешивают в конусовидные стаканчики (50 мл) с теплой водой (37-38 °С) на 6 ч, фекалии крупного рогатого скота - на 12 часов.
Затем марлю с содержимым удаляют, а воду осторожно сливают до осадка. Осадок можно отцентрифугировать или перенести полностью (желательно в объеме 0,5-1 мл) на предметное стекло для микроскопирования.
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ:
1.Определить суть прижизненной и посмертной диагностики.
2.Указать при каких гельминтозах целесообразно проводить гельминтоскопические исследования.
3.Определить, в чем разница между полным и неполным гельминтологическим исследованием органов.
4.Изучить метод флотационного метода исследования фекалий.
ТЕМА 3. ПАРАЗИТОЦЕНОЗЫ ЖИВОТНЫХ В КАРАЧАЕВО-ЧЕРКЕСИИ
Занятие 4. Особенности паразитоценозов в Карачаево-Черкесии
Цель занятия: освоить методику взятия проб фекалий от животных разных видов. Ознакомиться с оборудованием и реактивами, употребляемыми при исследовании проб фекалий животных на гельминтозы. Исследовать пробы фекалий животных гельминтоовоскопическими методами. Исследовать печень овцы или крупного рогатого скота по методу полного гельминтологического вскрытия.
Оборудование материалы и объекты исследований: микроскопы,
предметные и покровные стекла, пинцеты, стеклянные палочки, стаканчики, металлические петли, ситечки, насыщенные растворы натрия хлорида, технической аммиачной селитры, вода, оберточная бумага, кюветы, стеклянные банки, прямые ножницы, компрессориумы, бактериологические чашки, жидкость Барбагалло, спирт 70%-ный, пробы
17
фекалий овец, свиней, лошадей, печень и легкие жвачных, кишечник птиц.
Методические указания
Помимо непосредственных исследований самих животных (иммунологические, гельминтокопрологические, вскрытие и так далее) следует обратить особое внимание на загрязненность внешней среды яйцами и личинками гельминтов (трава, сено, вода, почва, различные предметы ухода за животными и так далее).
Яйца и личинки геогельминтов рассеяны на пастбищах повсюду и невидимы невооруженным глазом. Тем не менее, для их обнаружения есть ряд методов исследования объектов внешней среды.
Обследованию подвергают как территорию животноводческих помещений, так и пастбищно-сенокосные участки, а в отдельных случаях и лесные массивы, где выпасают главным образом крупный рогатый скот.
Для исследования и сравнения загрязненности участков инвазионными элементами гельминтов берут стандартные навески в определенный период суток и число яиц, личинок гельминтов пересчитывают на 1 килограмм почвы или 1 литр воды. Объектами исследований являются: растительность, вода, почва.
При исследовании растительности для улавливания личинок гельминтов используют общеизвестный метод Бермана.
В большую воронку диаметром 50 см (по верхнему краю) с металлической сеткой помещают пробу сена или травы не менее 500 грамм и заливают ее теплой водой на сутки. Через сутки осадок исследуют под микроскопом.
При исследовании воды используют несколько методов и их модификации. Наиболее простой и приемлемый в практических условиях
— метод отстаивания пробы воды в течение нескольких часов и изучения осадка под микроскопом.
Для получения осадка применяют сеть, изготовленную из шелкового сита №70. Сеть опускают в водоем и протаскивают на некоторое расстояние.
Взвешенные в воде частицы, осевшие на сети, переносят в стаканы, добавляют воду, отстаивают и исследуют под микроскопом
Для обнаружения яиц гельминтов используют аппарат Гольдмана, в котором воду фильтруют через мембранные фильтры. После фильтрования воды мембранные фильтры просветляют 50%-ным раствором глицерина и просматривают под микроскопом.
Для исследования воды на яйца гельминтов 3.Г. Василькова рекомендует более простой, но достаточно эффективный метод: мембранные фильтры заменяют фильтровальной бумагой (лучше в два слоя) в аппарате Зейца или в обычной стеклянной воронке. После фильтрования исследуемой воды фильтры высушивают на открытом воздухе и разрезают на кусочки (по величине покровного стекла). На
18
кусочки фильтра наносят кедровое масло, накрывают покровным стеклом и исследуют через 12-20 ч.
Личинок цестод консервируют в жидкости Барбагалло. При консервировании скребней, предварительно склеивая их между двумя стеклами, выдавливают хоботок. Нематод после гибели в воде фиксируют в жидкости Барбагалло и этикетируют так же, как и других гельминтов.
Весь законсервированный материал должен быть плотно упакован при помощи ваты и ветоши. Пробирки вкладывают в банки и хранят в плотно закупоренном виде. Гельминтологический материал можно пересылать в герметически закрытых пробирках, стаканчиках, банках, которые укладывают в прочный деревянный ящик, закрепив при помощи пенопласта, поролона, ваты или ветоши.
Патологический материал фиксируют 10%-ным нейтральным формалином, этикетируют и отправляют так же, как и гельминтов. Фиксированный материал можно отправлять и без жидкости. Его заворачивают во влажную вату или марлю (с фиксатором), кладут в целлофановые мешочки и затем упаковывают в плотный ящик. Фекалии больных животных для длительного хранения фиксируют 25%-ным раствором формалина.
Определение жизнеспособности яиц или личинок гельминтов по внешнему виду. Яйца гельминтов микроскопируют вначале при малом, затем при большом увеличении. У деформированных и мертвых яиц гельминтов оболочка разорвана или прогнута внутрь, плазма мутная, разрыхлена. У сегментированных яиц шары дробления (бластомеры) неравного размера, неправильной формы, часто сдвинуты к одному полюсу. Иногда встречаются аномальные яйца, которые, имея внешние уродства, развиваются нормально. У живых личинок аскарид мелкая зернистость имеется только в средней части тела, по мере их гибели она распространяется по всему телу, появляются крупные блестящие гиалиновые вакуоли, так называемые "нитки жемчуга".
Для определения жизнеспособности зрелых яиц аскарид, власоглавов, остриц следует вызывать активные движения личинок легким подогреванием препарата (до температуры не выше 37 °С). Жизнеспособность личинок аскарид и власоглавов удобнее наблюдать после их выделения из скорлупы яйца надавливанием на покровное стекло препарата препаровальной иглой или пинцетом.
У инвазионных личинок аскарид часто замечается чехлик, отслоившийся на головном конце, а у закончивших развитие в яйце личинок власоглавов на этом месте при большом увеличении обнаруживается стилет. У погибших личинок гельминтов независимо от их места нахождения (в яйце или вне его) замечают распад тела. При этом внутренняя структура личинки становится зыбчатой или зернистой, а тело мутным и непрозрачным. В теле обнаруживаются вакуоли, а на кутикуле - разрывы.
19
Жизнеспособность онкосфер тениид (бычьего, свиного цепней и др.) определяют по движению зародышей при воздействии на них пищеварительных ферментов. Яйца помещают на часовое стекло с желудочным соком собаки или искусственным дуоденальным соком. Состав последнего: панкреатина - 0,5 г, натрия бикарбоната - 0,09 г, дистиллированной воды - 5 мл. Часовые стекла с яйцами ставят в термостат при 36 - 38°С на 4 часа. При этом живые зародыши освобождаются от оболочек. Оболочки живых онкосфер также растворяются в подкисленном пепсине и в щелочном растворе трипсина через 6 - 8 часов в термостате при 38 °С.
Метод Фюллеборна. Личинки анкилостомид и стронгилид культивируют на агаре в чашке Петри с животным углем. После выдерживания в термостате при температуре 25 - 30°С в течение 5 - 6 часов личинки расползаются по агару, оставляя за собой дорожку из бактерий.
Метод Харада и Мори. В пробирки, помещенные в штатив, добавляют 7 мл дистиллированной воды. Деревянной палочкой берут 0,5 г испражнений и делают мазок на фильтровальной бумаге (15 х 150 мм) в 5 см от левого края (эту операцию проводят на листе бумаги, чтобы защитить поверхность лабораторного стола). Затем полоску с мазком вставляют в пробирку так, чтобы свободный от мазка левый конец достигал дна пробирки. Накрывают верхний конец куском целлофана и плотно обхватывают резинкой. На пробирке пишут номер обследуемого. В таком состоянии пробирки хранят 8 - 10 суток при температуре 28 °С. Для изучения личинок снимают и удаляют целлофановую крышку и извлекают пинцетом полоску фильтровальной бумаги. При этом следует проявлять осторожность, так как небольшое количество инвазионных личинок может передвигаться к верхнему концу фильтровальной бумаги или к стенке пробирки и проникать под поверхность целлофана. Пробирки помещают в горячую водяную баню при температуре 50°С на 15 минут, после чего содержимое их встряхивают и быстро переливают в 15-миллилитровую пробирку для осаждения личинок. После центрифугирования на досадочную жидкость удаляют, а осадок переносят на предметное стекло, накрывают покровным стеклом и микроскопируют под малым увеличением.
ЗАДАНИЯ ДЛЯ САМОСТОЯТЕЛЬНОЙ РАБОТЫ:
1.Изучить наиболее распространенные виды паразитоценозов по районам Карачаево-Черкесии.
2.Изучить факторы, влияющие на пораженность животных паразитоценозами, и зависимость от условий окружающей среды.
3.Изучить инвазионные болезни жвачных и дать рекомендации по профилактике данных заболеваний.
4.Сравнить разные виды антгельминтиков, дать рекомендации по их применению.
20
