2. Полярографический метод

Метод основан на способности фолиевой кислоты легко восстанавливаться в среде карбоната натрия до 7,8-дигидрофолиевой кислоты. Обратный процесс легко происходит даже под действием кислорода воздуха:

3. Обратная алкалиметрия

Титрант – 1). 0,1 М NaOH

2). 0,1 М HCL

Индикатор – фенолфталеин с метиленовым синим, тимолфталеин

Хранение.

Хранят препарат в хорошо укупоренной таре, в темном месте, так как кислота фолиевая гигроскопична и разлагается под действием света.

Особенно быстро процесс разложения происходит в кислой среде в растворах под воздействием УФ-лучей с длиной волны 365 мм.

Более стабильны раствори при рН 5,0 – 10,0.

В результате неправильного хранения фолиевая кислота инактивируется и образуются n-аминобензоилглутаминовая кислота и 6-формилптерин, окисляющийся кислородом воздуха до птериновой кислоты (дает голубую флюоресценцию в УФ-свете):

Применение.

Фолиевая кислота вместе с витамином В₁₂ стимулирует эритропоэз, учавствует в синтезе аминокислот.

Суточная потребность организма взрослого человека 2 мг кислоты фолиевой.

В медицинской пракитике ее назначают для усиления эритропоэза, при некоторых видах анемий (макроцитарная или фолиеводефицитная, в том числе анемиях и лейкопениях, вызванных лекарствами и ионизирующей радиацией).

Вводят внутрь; лечебная доза 0,005 – 0,01 г 1 -2 раза в день. Курс лечения 20-30 дней.

препарат	описание	растворимость
Methotrexate Метотрексат 4-дезокси-4-амино-N-10-метилфолиевая кислота	Желтый или желто-оранжевый мелкокристаллический порошок. Удельное врщение от +19 до +24 (1%-ный раствор в растворе карбоната натрия)	Практически нерастворим в воде, этаноле, дихлорэтане, эфире, легко растворим в разведенных растворах щелочей и карбонатов.

Определение подлинности.

1. Физико-химические методы

- ИК-,УФ-спектрофотометрия

- Хроматография

2. Химические методы

- Голубая флоуресценция в УФ-лучах после окисления KMnO₄

Количественное определение.

1. Хроматоспектрометрия (сочетание бумажной хроматографии с УФ-спектрофотометрией)

Сначала проводят хроматографию препарата на бумаге, используя в качестве вещества-свидетеля фолиевую кислоту. Хроматограмму подвергают УФ-облучению. Затем зоны с метотресантом и фолиевой кислотой вырезают, экстрагиру.т раствором NaOH и измеряют оптическую плотность фолиевой кислоты (при 356 нм) и метотрексата (при 258 нм). Содержание метотрексата должно быть не менее 85%.

2. ВЭЖК

Хранение.

Хранят метотрексат в плотно укуполенной таре, предохраняющей от действия света, в сухом месте при температуре от +5 до +10°С.

Применение

Применяют для лечения острых лейкозов, при злокачественных заболеваниях различных органов. Назначают внутрь в таблетках по 0,0025 г, также внутримышечно и внутривенно.

Ситуационные задания (письменно дать ответы в рабочей тетради):

1. Напишите структурные формулы глутаминовой и фолиевой кислот. Назовите общие химические свойства и приведите доказывающие их реакции.

2. Напишите уравнения реакций всех возможных методов количественного определения глутаминовой и фолиевой кислот. Какой нормативный показатель в ФС введен для глутаминовой кислоты, характеризующий ее оптическую активность. Приведите формулу для его расчета.

3. Рассчитайте навеску кислоты фолиевой, которую следует взять для количественного определения, чтобы с ней связалось 10,00 мл раствора натрия гидроксида (0,1 моль/л) с К 1,0000. М. м. кислоты фолиевой 441,40.

4. Обоснуйте возможность количественного определения фолиевой кислоты

полярографическим методом. Охарактеризуйте условия испытания и приведите соответствующий химизм.

5. Обоснуйте возможность количественного определения фолиевой кислоты

фотоколориметрическим методом на основе реакции образования азокрасителя. Охарактеризуйте условия проведения испытания и приведите соответствующие уравнения реакций.

6. Объясните, можно ли использовать реакцию с раствором калия перманганата для отличия субстанций фолиевой кислоты и метотрексата. Ответ проиллюстрируйте уравнениями реакций.

7. Рассчитайте величину удельного вращения метотрексата и сделайте заключение о качестве, если угол вращения 1 % раствора в растворе натрия карбоната составил +0,48°. Длина трубки поляриметра 190 мм. Согласно ФС, величина удельного вращения должна составлять от +19° до +24°

8. Рассчитайте величину удельного вращения метотрексата и сделайте заключение о качестве, если угол вращения 1%-ного раствора в растворе натрия карбоната составил +0,48°, а длина использованной трубки поляриметра – 190 мм. Согласно МКК, удельное вращение метотрексата должно составлять от +19° до +24°.