Глава 3. Физиология микробов 75

ния. Серу и фосфор бактерии способны утилизировать в виде неорганических солей: сульфатов и фосфатов. Для нормального функционирования ферментов бактериям требуются ионы Cа²⁺, Mg²⁺, Mn²⁺, Fe²⁺, которые добавляют в пита тельную среду в виде солей, чаще всего фосфатов.

4. Решающее значение для роста микроорганизмов имеет рН среды для пре дотвращения гибели от ими же образованных продуктов обмена. С этой целью питательную среду забуферивают, чаще всего используя фосфатный буфер. При сильном выделении бактериями кислот как продуктов обмена добавляют к питательной среде карбонат кальция CaCl₂.

5. Среда должна обладать определенным осмотическим давлением. Большин ство бактерий способны расти на изотоничных средах, что достигается добав лением NaCl в концентрации 0,87%. Бактерии, не способные расти на средах с концентрацией соли ниже 1%, называются галофильными.

Так как устойчивость к осмотическому давлению определяется наличием у бактерий клеточной стенки, бактерии, лишенные клеточной стенки, мико плазмы и L-формы, могут расти на питательных средах, содержащих гиперто нический раствор, обычно сахарозы.

При необходимости к питательной среде добавляют факторы роста, ингиби торы роста определенных бактерий, субстраты для действия ферментов, инди каторы.

6. Питательные среды должны быть стерильными.

В зависимости от консистенции питательные среды могут быть жидкими, полужидкими и плотными. Плотность среды достигается добавлением агара. Агар — полисахарид, получаемый из водорослей. Он плавится при темпера туре 100 θС, но при охлаждении остывает при температуре 45–50 θС. Агар до бавляют в концентрации 0,5% — для полужидких сред и 1,5–2% — для создания плотных сред.

В зависимости от состава и цели применения различают простые, сложные, элективные, минимальные, дифференциально-диагностические и комбини рованные среды. К простым средам относятся пептонная вода, питательный бульон, мясопептонный агар. На основе этих простых сред готовят сложные, например сахарный и сывороточный бульоны, кровяной агар.

Под элективными понимают среды, на которых лучше растет какой-то определенный микроорганизм. Например, щелочной агар, имеющий рН 9, слу жит для выделения холерного вибриона. Другие бактерии, в частности кишеч ная палочка, из-за высокого рН на этой среде не растут.

Среды обогащения стимулируют рост какого-то определенного микроорга низма, ингибируя рост других. Например, среда, содержащая селенит натрия, стимулирует рост бактерий рода Salmonella, ингибируя рост кишечной палочки.

Дифференциально-диагностические среды служат для изучения фермен тативной активности бактерий. Они состоят из простой питательной среды с добавлением субстрата, на который должен подействовать фермент, и инди

76 ^{Часть I. Общая микробиология}

катора, меняющего свой цвет в результате ферментативного превращения суб страта. Примером служат среды Гисса, используемые для изучения способности бактерий ферментировать сахара.

Комбинированные питательные среды сочетают в себе элективную среду, подавляющую рост сопутствующей флоры, и дифференциальную среду, диа гностирующую ферментативную активность выделяемого микроба. Примером служат среда Плоскирева и висмут-сульфитный агар, используемые при выде лении патогенных кишечных бактерий. Обе эти среды ингибируют рост кишеч ной палочки.