
- •1) Микроорганизмы – важнейшие объекты селекции продуцентов
- •2) Цели и задачи селекции продуцентов
- •3) Основные направления развития селекции продуцентов
- •4) Принципы подбора исходного штамма для селекции
- •5) Требования предъявляемые к промышленным штаммам
- •6) Подготовка исходного штамма к селекции
- •7) Мутагенез in vivo. Типы мутагенов, используемых при индуцированном мутагенезе.
- •8) Способы отбора мутантов
- •9) Методы повышение продуктивности мутантов
- •10) Получение рекомбинантов у грибов и дрожжей методом гибридизации.
- •11) Конъюгация у бактерий
- •12) Создание систем конъюгационного переноса плазмид
- •13)Трансдукция как метод создания рекомбинантных геномов
- •14)Способы сближения att-сайтов
- •15) Трансформация бактерий фаговыми и плазмидными днк.
- •16) Особенности трансформации у дрожжей
- •17) Мобильные генетические элементы эу- и прокариот.
- •Мобильные генетические элементы эукариот
- •18) Характер мутаций, вызываемых мгэ
- •19) Транспозонный матугенез
- •20) Векторы, используемые для введения транспозонов
- •21) Методы получения рекомбинантной днк
- •22) Протопласты и сферопласты микрорганизмов
- •23)Способы получения протопластов у грамположительных, грамотрицательных бактерий, грибов и дрожжей. Отредачить
- •Подавление синтеза
- •24)Метод слияния протопластов и его использование для получения рекомбинантов у бактерий, грибов и дрожжей
- •25) Характеристика ферментов, используемых в генной инженерии
- •26) Векторные молекулы днк
- •27) Определение вектора. Требования, предъявляемые векторам.
- •28) Плазмидные векторы, используемые для клонирования в клетка прокариот.
- •29) Векторы для клонирования крупных фрагментов днk
- •30) Космиды. Особенности клонирования генов с помощью космид.
- •31) Фазмиды. Характеристика фазмидных векторов
- •32. Векторы на основе днк нитевидных фагов
- •33. Создание геномной библиотеки
- •34. Скрининг полученной коллекции???
- •35. Скрининг с помощью гибридизации, иммуннологический скринин, скрининг по активности белка
- •36. Селекция продуцентов ак
- •37. Характеристика основных групп микроорганизмов-продуцентов аминокислот редачить
- •38. Основные тенденции в развитии селекции продуцентов аминокислот
- •39. Селекция продуцентов аминокислот семейства аспарагиновой кислоты редачить
- •40. Селекция продуцентов ароматических аминокислот
- •41. Селекция продуцентов аминокислот семейства глутаминовой кислоты
- •42. Селекция продуцентов пролина и гистидина
- •43. Селекция продуцентов ферментов.
- •44. Преимущества использования микроорганизмов для создания продуцентов ферментов
- •45. Основные тенденции в развитии селекции продуцентов ферментов
- •46. Важнейшие классы ферментов, получаемые ферментов, получаемых микробиологическим способом, их основные продуценты. Способы создания продуцентов ферментов.
- •47. Мировое производство ферментов, основные производители
- •48. Селекция продуцентов полисахаридов(?)
- •49. Использование полисахаридов, получаемых микробиологическим способом
- •50. Тенденции в развитии селекции продуцентов полисахаридов
- •51. Селекция продуцентов липидов
- •52. Характеристика микробных липидов
- •53. Основные продуценты липидов среди бактерий, грибов и дрожжей
- •54. Селекция продуцентов липидов у дрожжей
- •55. Селекция продуцентов органических кислот
- •56. Селекция продуцентов витаминов
- •57. Характеристика микробных витаминов
- •58. Использование бактерий, грибов и дрожжей для создания витаминов.
- •59. Селекция продуцентов фитогормонов
- •60. Селекция продуцентов антибиотиков.
- •61. Разнообразие антибиотических веществ, продуцируемых микроорганизмами.
- •62. Методы создания продуцентов антибиотиков и способы повышения их продуктивности редачить
44. Преимущества использования микроорганизмов для создания продуцентов ферментов
В настоящее время человечеству известно около 2000 ферментов, из них только две сотни получены или синтезированы как индивидуальные соединения. Вместе с тем микроорганизмы представляют большой интерес как продуценты этих соединений. Этот интерес обусловлен рядом факторов:
метаболизм микроорганизмов (следовательно, и работа ферментных систем) отличаются высокой интенсивностью. КПД работы клеток
Azotobacter в 200–400 раз превышает таковой у клеток печени человека;
микроорганизмы отличаются высокой степенью прироста биомассы;
многие микроорганизмы растут на дешевых средах (целлюлоза, углеводороды нефти, метан, метанол и т. д.);
микроорганизмы могут продуцировать ферменты во внешнюю среду (экзоферменты) и это не требует разработок специальных технологий по их выделению;
микроорганизмы являются источником некоторых уникальных ферментов: танназы (расщепляет дигаллат до галловой кислоты), рацемазы (превращение аминокислот), кератиназы (гидролизирующей серосодержащие белки – кератины), пенициллиназы (расщепление пенициллина до пеницилловой кислоты), нитрогеназы (образование аммиака из молекулярного азота и воды);
некоторые бактерии (термофильные) имеют оптимум роста 60– 80 °С и выше, что позволяет получать на их основе термостабильные ферменты и белки. Так, экстремальный термофил Thermus aquaticus обладает энолазой с оптимумом действия при 90 °С. А гриб Malbranchea pulchella выделяет термостабильную протеиназу, сохраняющую активность при 73 °С;
большой интерес как продуценты ферментов представляют анаэробные микроорганизмы. Использование этих организмов позволит проводить процесс в больщих емкостях с высоким слоем сред;
ферменты, продуцируемые многими микроорганизмами, являются индуцибельными. Так, синтез β-галактозидазы Е. coli индуцируется лактозой и происходит через 3 мин после ее внесения.
45. Основные тенденции в развитии селекции продуцентов ферментов
Селекция продуцентов ферментов является ключевым аспектом в области биотехнологии и промышленного производства. Вот несколько основных тенденций в развитии этой области:
1. Генетические методы селекции: С развитием генетических технологий, таких как CRISPR/Cas9, селекция продуцентов ферментов стала более точной и эффективной. Это позволяет инженерам изменять геномы микроорганизмов для увеличения производства нужных ферментов.
2. Метагеномика: Использование метагеномики позволяет изучать геномы микроорганизмов в естественных средах, что помогает обнаруживать новые продуценты ферментов и их гены.
3. Оптимизация условий культивирования: Развитие биоинформатики и системной биологии позволяет оптимизировать условия культивирования микроорганизмов для увеличения производства ферментов.
4. Использование роботизированных систем: Автоматизация процессов селекции продуцентов ферментов с помощью роботизированных систем позволяет ускорить процесс отбора и тестирования потенциальных продуцентов.
5. Экологическая устойчивость: С увеличением интереса к экологической устойчивости, селекция продуцентов ферментов также ориентируется на поиск микроорганизмов, способных работать в более экологически чистых условиях.
6. Многофункциональность ферментов: Интерес к разработке многофункциональных ферментов, способных выполнять несколько задач, также влияет на развитие селекции продуцентов ферментов.