
- •Вирус, определение. Строение вирусной частицы.
- •Классификация вирусов по клиническим признакам.
- •Строение вириона гриппа. Противовирусный препарат для гриппа – Римантадин. Характеристика, синтез.
- •Нуклеозидные ингибиторы обратной транскриптазы (ниот) вич -1. Классификация. Зидовудин, Диданозин, Ставудин.
- •Ненуклеозидные ингибиторы от (нниот) вич -1. Этравирин, Рилпавирин.
- •Вирусный фермент – интеграза, её функции, строение. Ингибиторы интегразы: Релтегравир – характеристика, структура.
- •Релтегравир
- •Ингибиторы входа вич-1 в клетку. Рецепторы.
- •Этапы входа вириона вич-1 в клетку.
- •Ингибиторы прикрепления вируса к клетке. Циклотриаза-сульфонамиды, Temsavir – характеристика, структура.
- •Циклотриаза-сульфонамиды
- •Ингибиторы связывания вируса с со-рецепторами ссr5 и cxcr4 (схема). Маравирок – характеристика, структура.
- •Маравирок
- •Викривайрок
- •Ингибитор слияния - ингибитор белка gp41. Взаимодействие Энфувиртида с вирусом. Часть цепочки пептида Энфувертида.
Вирусный фермент – интеграза, её функции, строение. Ингибиторы интегразы: Релтегравир – характеристика, структура.
СТРОЕНИЕ ИНТЕГРАЗЫ ВИЧ-1
ИН ВИЧ-1 содержит 288 аминокислотных остатков, молекулярная масса фермента составляет 32 кДа (килоДальтоны). Частичным протеолизом (гидролиза белков) и направленным мутагенезом (процесс изменения в нуклеотидной последовательности ДНК, приводящий к мутациям) было показано, что в структуре фермента можно выделить три домена:
короткий N-концевой, в состав которого входят аминокислотные остатки с 1 по 50;
каталитический, который образуют аминокислотные остатки с 51 по 212;
C-концевой, состоящий из аминокислотных остатков с 220 по 270.
Найдено, что в состав активного центра фермента входят катионы Mg2+.
|
Рис1: Взаимное расположение аминокислотных остатков каталитического центра и иона Mg2+ в составе каталитического домена ИН ВИЧ 1.
Ингибиторы ИН способны образовывать комплексы с этими катионами и тем самым блокировать стадию переноса цепи вирусной ДНК (рисунок 2).
Ингибиторы интегразы (ИИ) представляют собой класс антиретро-вирусных препаратов, предназначенных для блокирования дейст-вия интегразы вирусного фермента, который вставляет вирусный геном в ДНК клетки-хозяина.
Ингибиторы интегразы влияют на один из этапов процесса встраивания провирусной ДНК – перенос цепи ДНК. После переноса из цитоплазмы в клеточное ядро прединтеграционного комплекса (провирусная ДНК в связи с интегразой) интеграза присоединяется к ДНК клетки, что приводит к необратимому связыванию провирусной ДНК и ДНК инфицированной клетки.
Поскольку интеграция является жизненно важным этапом репликации ретровирусов, ее блокирование может остановить дальнейшее распространение вируса. Ингибиторы интегразы первоначально были разработаны для лечения ВИЧ-инфекции, но были применены к другим ретровирусам.
Ингибиторы интегразы нацелены на определенный этап жизненного цикла ретровирусов, поэтому их можно принимать в сочетании с другими типами препаратов против ВИЧ, чтобы минимизировать адаптацию вируса. Они также полезны в терапии спасения пациентов, чей вирус мутировал и приобрел устойчивость к другим лекарствам.
Репликативный цикл ВИЧ-1 условно можно разделить на две фазы:
раннюю, которая начинается с узнавания клетки-мишени зрелым вирионом и включает все процессы, ведущие к интеграции вирусной ДНК в хромосому зараженной клетки
позднюю, начинающуюся с регулируемой экспрессии интегрированного провирусного генома и заканчивающуюся созреванием и отпочковыванием вириона.
На ранней фазе частицы ВИЧ-1
связываются специфично только с клетками, несущими на поверхности белок CD4, ответственный за иммунное узнавание клетки. Вслед за
проникновением вируса в клетку следуют
процессы «раздевания» вируса и высвобождения внутриклеточного предтранскрипционного комплекса.
Поздняя фаза репликативного цикла вируса начинается с
транскрипции вирусных генов. Обратная транскрипция геномной РНК осуществляется вирусным ферментом – обратной транскриптазой – в цитоплазме. Результатом этого процесса является получение ДНК-копии вирусной РНК. Эта
двухцепочечная вирусная ДНК транспортируется в ядро в составе прединтеграционного комплекса, включающего ряд вирусных и клеточных белков. После транспорта в ядро
вирусная ДНК ковалентно встраивается в геном зараженной клетки благодаря каталитической активности вирусного фермента – интегразы.
Таким образом, интеграция вирусной ДНК в клеточную является ключевой стадией репликативного цикла ВИЧ. Понятно, что подавление репликации вируса разумно вести на ранних этапах его развития – обратной транскрипции и интеграции, которые осуществляются вирусными ферментами. Направление, связанное с подавлением стадии обратной транскрипции ВИЧ-1, широко развито.
На сегодняшний день комплексная терапия, основанная на использовании ингибиторов обратной транскриптазы и другого вирусного фермента – протеазы, рассматривается как наиболее действенная и доступная. К сожалению, она не приводит к полной остановке репликации вируса, а позволяет лишь подавлять ее до низкого уровня. Кроме того, использование этой терапии ограничено токсичностью многих ингибиторов обратной транскриптазы и протеазы, недостаточной селективностью их действия в клетках и восприимчивостью к ним организма инфицированного человека.
Вирусная интеграза (ИН) не имеет аналогов в клетке, и именно по этой причине она является очень привлекательной фармакологической мишенью с точки зрения селективности и эффективности воздействия антивирусных препаратов. Подавление стадии интеграции позволило бы предотвратить репликацию вируса в de novo (с самого начала) зараженных клетках и впоследствии элиминировать зараженные клетки, изолированные в тканях пациента, подвергающегося химиотерапии.
К сожалению, разработка эффективных ингибиторов ИН во многом затрудняется ограниченностью наших знаний о механизме действия и структуре этого фермента. Можно сказать, что ИН (вирусная интеграза) является наименее изученным ферментом ВИЧ-1.
ИН ВИЧ-1 относят к семейству полинуклеотидилтрансфераз. Ферменты данного семейства катализируют процессы, приводящие к перемещению ДНК или ее фрагментов внутри генома либо между геномами. Следует отметить, что данные процессы осуществляются без привлечения дополнительных источников энергии и, в конечном итоге, без изменения числа фосфодиэфирных связей.
Первым ингибитором ИН (вирусной интегразы) явился релтегравир - противовирусное средство. Ингибирует каталитическую активность ВИЧ интегразы - фермента, участвующего в репликации вируса. Ингибирование интегразы предотвращает ковалентное введение генома ВИЧ в геном клетки хозяина на ранних стадиях развития инфекции. Не включенные в ДНК человека геномы ВИЧ не способны индуцировать продукцию новых вирусных частиц, вследствие этого происходит подавление процесса интеграции и предотвращение дальнейшего распространения вирусной инфекции в организме. Ингибирующая способность ралтегравира в отношении фосфотрансферазы человека выражена незначительно.