- •Характеристика основных таксонов. Понятие о виде как основной номенклатурной единице. Штамм, клон, чистая культура. Инфраподвидовые категории – морфовар, хемовар, серовар, биовар, фаговар, патовар.
- •Основной таксономической единицей в биологии является вид (species).
- •Занятие 1. Принципы устройства иммерсионного, люминесцентного, электронного микроскопов. Типы микроскопических препаратов.
- •В лабораторной практике используют следующие типы микроскопических препаратов:
- •Этапы приготовления фиксированного мазка.
- •Методы микробиологических исследований.
- •Характеристика бактериоскопического метода исследования.
- •Структуры прокариотной клетки и их функции.
- •Структура прокариотной клетки
- •Характеристика клеточной стенки микробов.
- •Волютиновые зёрна. Химический состав. Функции. Способы окраски.
Волютиновые зёрна. Химический состав. Функции. Способы окраски.
Характерны только для дифтерийной палочки.
Располагаются по полюсам и интенсивно прокрашиваются (метахромазия).
По химическому составу – полифосфаты.
Играют диагностическую и трофическую роль.
Выявляются простым методом окраска – Окраска метиленовым синим в течение 20-30 секунд (тёмно-синие зёрна на полюсах светло-голубых тел бактерий) и сложным методом – по Нейссеру.
Окраска по Нейссеру: 1. На фиксированный мазок наносят ацетат синьки Нейссера – 2 минуты, промывают водой. 2. Наносят раствор Люголя на 30 секунд и промывают водой. 3. Везувин на 1 минуту, промывают водой, высушивают, микроскопируют.
Результат: зёрна волютина, имеющие щелочную реакцию, воспринимают синьку и окрашиваются в тёмно-синий цвет. Цитоплазма с кислой рН воспринимает везувин и окрашивается в жёлтый цвет.
Простые и сложные методы окраски. Механизм окраски по Граму.
Способы окрашивания микробов делятся на простые и сложные, или дифференциальные.
При простой окраске употребляется только один краситель, чаще всего - фуксин Пфейффера (экспозиция 1-2 мин), или синька Леффлера (экспозиция 3-5 мин). Их относят к группе анилиновых красителей.
Сложные, или дифференциальные способы окраски бактерий основаны на особенностях физико-химического строения микробной клетки, и применяются для детального изучения структуры клетки, также для дифференциации данного микроба от других. Способность микробов воспринимать красители называется тинкториальными свойствами.
Окраска по Граму (механизм)
Этап |
Продолжительность |
Результат |
|
Грамположительные |
Грамотрицательные |
||
Генциановый фиолетовый |
1 – 2 минуты |
Синие |
Синие |
Раствор Люголя |
1 – 2 минуты |
Синие |
Синие |
Этиловый спирт с последующим промыванием водой |
½ минуты |
Синие |
Бесцветные |
Водный фуксин |
1 – 2 минуты |
Синие |
Красные |
Простые |
Сложные (основные) |
||
Метод |
Цель |
Метод |
Цель |
Окраска метиленовым синим |
Изучение: - формы бактерий - их расположения в мазке |
Окраска по Граму (основной метод окраски в бактериологии) |
Определение типа строения клеточной стенки |
Окраска по Цилю-Нильсену |
Выявление: - кислотоустойчивых бактерий (микобактерий) - спор |
||
Окраска по Нейссеру |
Выявление включений волютина и идентификация по их наличию коринебактерий |
||
Окраска водным фуксином |
Окраска по Бурри-Гинсу |
Выявление капсул |
|
Окраска по Морозову |
Выявление:
|
||
Окраска по Здрадовскому |
Выявление хламидий |
||
Окраска по Романовскому-Гимзе |
Выявление:
|
Грамхарактеристика основных форм бактерий
Шарообразные формы бактерий - кокки грамположительны (Гр+), за исключением гонококка, менингококка и катарального микрококка.
Цилиндрические формы: спорообразующие палочки - бациллы и клостридии – Гр+.
Неспорообразующие (собственно бактерии) – грамотрицательны (Гр-), за исключением актиномицетной линии бактерий. В последнюю входят: коринебактерии, в т. ч. возбудитель дифтерии; микобактерии – возбудители туберкулёза, микобактериозов и актиномикоза.
Актиномикотическая друза окрашивается по Граму смешанно: аморфный центр - Гр+, периферия - Гр-.
Извитые формы: вибрионы, спириллы, спирохеты – Гр-.
Риккетсии, хламидии - Гр-.
Микроорганизмы с дефектами или не имеющие КС–Гр-.