Модель предложена J. Brown (1977)

молекула альбумина содержит 5 больших двойных петель, 3 малых и 1 одинарную, в образовании которых участвует 17 дисульфидных связей.

•всю молекулу альбумина легко разделить на три очень сходных домена:

•1 – 190, 191 – 382, 383 – 585

Методы определения альбумина

•Бромкрезоловый зеленый для определения альбумина был предложен F. Rodkey в 1965. Реакцию обычно проводят при pH 4,2–4,5, фотометрию осуществляют при 620–630 нм (рис. 1)

Бромкрезоловые красители

Технология «сухой» химии

•В тест-полосках, предназначенных для определения альбумина в сыворотке человека, в качестве реактива использован БКЗ. Интенсивность окраски цветного комплекса определяют с помощью отражательной фотометрии (или по шкале сравнения)

Физико-химические свойства

•Альбумин относится к кислым белкам. Значение рI альбумина 4,8

•Достаточно устойчив к температурной денатурации

•выдерживает нагрев до 60 °С в течение 1 ч, но уже при 35—36 °С наблюдаются конформационное изменение молекулы и сдвиг флюоресценции альбумина на 5—7 нм (свидетельство об изменение электронных внутримолекулярных взаимодействий).

Сайты связывания

•Одновременно может связывать до 21 лиганда.

•жирных кислоты - обнаружено 7 сайтов связывания

•одна молекула альбумина может одновременно связать 25-50 молекул билирубина (молекулярная масса 500).

•Молекула органического лиганда (М 300 Да), связавшись с глобулой альбумина, изменяет свойства глобулы (66.000 Да) !!. Изменяются свойства оставшихся незанятыми центров связывания.

•константа связывания одного центра зависит от того, какие лиганды связаны с другими центрами той же молекулы альбумина. Эти влияния центров друг на друга называются

кооперативностью связывания лигандов

на связывание влияют разные факторы!

•Глобула альбумина лабильна и чувствительна даже к слабым влияниям потому, что каждый центр связывания лигандов формируется благодаря контакту разных участков полипептидной цепи, которые притягиваются друг к другу сравнительно слабыми гидрофобными и Ван-Дер-Ваальсовыми взаимодействиями.

•Такое взаимодействие легко нарушить, что сразу отразится на большом участке глобулы.

•Жирные кислоты увеличивают компактность альбуминовой глобулы, делают белок более устойчивым к воздействию денатурирующих агентов — температуры, мочевины, гуанидиновых солей [Dzafarov Т., 1992].

•Существует предположение, что потеря альбумином способности связывать жирные кислоты является одним из факторов его катаболизма [Титов В.Н., 1998].